166549. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-acilamino-CEF-3-EM-4-karbonsav-vegyületek előállítására
23 166549 24 és j'eges hűtés közben 5 mólos vizes foszforsavval 2-re beállítjuk. A szerves fázist elkülönítjük és telített vizes nátriumklorid-oldat kis mennyiségeivel négyszer mossuk. A vizes kivonatokat két rész etilacetáttal még extraháljuk, az egyesített szerves extraktumokat vízmentes magnéziumszulfáton szárítjuk és az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk. A maradékot 10 g szilikagélen (oszlop, 5% víz hozzáadásával) kromatografáljuk. Először a nem reagált terc-butiloxikarbonil-D-a-fenilglicint eluáljuk metilénkloriddal és acetont növekvő mennyiségben tartalmazó metilénkloriddal, majd ezt követően a (XVIII) általános képletű 7ß-[N-(N-terc-butiloxikarbonil-D-a-fenilglicil)-amino]-cef-3-ém-4-karbonsavat amorf alakban. Kitermelés: 67%. Analízis: ultraibolya abszorpciós spektrum (95%-os etanolban): Xmax=252 my (s=5100); az infravörös abszorpciós spektrum (metilénkloridban) karakterisztikus sávjai: 5,61, 5,85, 5,92 és 6,12 y; a vékonyrétegkromatogramon (Silikagel G, kimutatás jódgőzökkel) mért Rf-érték =0,6—0,7 (44 : 12 : 44 n-butanol-ecetsav-víz oldószerrendszer). A megfelelő 7ß-(N-terc-butiloxikarbonil-D-a-fenilglicil)-amino-cef-3-ém-4-karbonsav-terc-butilészter dietiléter és pentán keverékéből kristályosodik, olvadáspontja 159—161°; [a]g = +29° ±2° (c =0,521, kloroformban); a vékonyrétegkromatogramon (szilikagél, előhívás jódgőzökkel) mért Rf~0,67 (1 : 1 toluoletilacetát oldószerrendszer); ultraibolya abszorpciós spektrum (etanolban): Xmax=255 my (s=5400); az infravörös abszorpciós spektrum (metilénkloridban) karakterisztikus sávjai: 2,68, 2,89, 3,33, 5,57, 5,79, 5,88, 6,08, 6,22, 6,70, 7,15, 7,28, 7,68, 8,04, 8,64, 9,05, 9,52 és 9,79 y.. 2. példa 0,02 g 7ß-[N-(N-terc-butiloxikarbonil-D-oc-fenilglicil)-amino]-cef-3-ém-4-karbonsavat 3 ml tiszta trifluorecetsavban oldunk és az oldatot szobahőmérsékleten 15 percig állni hagyjuk. Az így kapott oldatot rotációs bepárlóban bepároljuk, a maradékot a trifiuorecetsav tökéletes eltávolítása céljából kloroform és toluol 1 : 1 arányú keverékének 20—20 ml keverékével kétszer szárazra pároljuk és 16 órán át 0,0001 Hgmm nyomáson szárítjuk. A7ß-[N-(D-a-fenilglicil)-amino]-cef-3-em-4-karbonsavat sárgás por alakjában kapjuk, ha a trifluorecetsavval kapott só vizes és metanolos oldatához ekvivalens menynyiségű trietilamint adunk, az elegyet bepároljuk és a maradékot metilénkloriddal digeráljuk. A terméket szűrjük, a szűrőt mintegy 150 ml metilénkloriddal mossuk és nagyvákuumban szárltjuk. Ekkor a (XIX) képletű 7ß-(D-a-fenilglicil)-amino-cef-3-em-4-karbonsavat ikerionos alakban, mint gyengén sárgás amorf port kapjuk. Kitermelés: 85%. Analízis: a vékonyrétegkromatogramon (szilikagél, előhívás jódgőzökkel): mért Rf = = ~0,29 (40: 24 : 6 : 30 n-butanol-piridin-ecetsav-vízoldószerrendszerben); ultraibolya abszorpciós spektrum (vízben): Xmax =250 mjj. (s =4300). 3. példa 0,20 g N-(2,2,2-triklóretoxikarbonil)-D-a-fenilglicin tetrahidrofurán és acetonitril 1: 1 keverékének 6 ml-ével készült szuszpenziójához 0,085 ml trietilamint adunk. A reakcióelegyet — 10°-ra lehűtjük, a nedvesség kizárása mellett 0,08 ml klórhangyasavas izobutilésztert adunk hozzá és 15 percen át — 10°-on keverjük. A vegyes anhidrid oldása céljából 2 ml víz-tetrahidrofurán 1 : 1 5 arányú keverékében oldott 0,081 ml trietilamin és 0,160 g 7ß-amino-cef-3-em-4-karbonsav oldatát csepegtetjük hozzá, úgy hogy a belső hőmérséklet a 0°-ot ne haladja meg. A reakciókeveréket 30 percen át 0°-on és 90 percen át szobahőmérsékleten tovább keverjük, majd a szerves 10 oldószer nagy részét csökkentett nyomáson elgőzölögtetjük. A maradékot 5 ml 0,5 mólos vizes dikáliumhidrogénfoszfát-oídattal és 5 ml etilacetáttal hígítjuki Az oldhatatlan anyagot üvegszűrőtégelyen, diatómaföldkészítménnyel szűrjük. A szűrlet rétegeit elkülönítjük, a szer-15 ves fázist a dikáliumhidrogénfoszfát-oldattál extraháljuk és eldobjuk. A vizes fázisokat etilacetáttal mossuk, friss etilacetátot rétegzünk rá és tömény foszforsavval 2 pH-értékre megsavanyítjuk. A szerves fázist elkülönítjük és telített vizes nátriumklorid-oldattal többször 20 mossuk. A vizes fázisokat 10—10 ml etilacetáttal kétszer extraháljuk és eldobjuk. Az egyesített szerves extraktumokat nátriumszulfáton szárítjuk és az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk. A nyersterméket 10 g szilikagélen kromatografáljuk. A változatlanul maradt 25 N-(2,2,2-triklóretoxikarbonil)-D-a-fenilglicint toluol-etilacetát 4 : 1 keverékével eluáljuk. A (XX) képletű 7ß-[N-(2,2,2-trikloretoxikarbonil)-D-a-glicil)-amino-cef-3-ém-4-karbonsavat toluol-etilacetát keverékével eluáljuk, (kitermelés: 83%) mimellett ennek 4: 1 arányához 30 viszonyítva az etilacetátot növekvő mennyiségben alkalmazzuk. Analízis: az infravörös abszorpciós spektrum (ásványolajban) karakterisztikus sávjai: 5,61, 5,86, 5,92 és 6,12pi; ultraibolya abszorpciós spektrum (etanolban): Xmax =252 my, a vékonyrétegkromatogramon (szilika-35 gél, előhívás jódgőzökkel): mért Rf-érték ~0,8 (71,5:7,5:21 n-butanol-ecetsav-víz oldószerrendszer). 4. példa 40 0,120 g 7ß-[N-(2,2,2-trikloretoxikarbonil)-D-a-fenilglicil]-amino-cef-3-ém-4-karbonsavat 6 ml dimetilformamidban oldunk, az oldathoz 10 ml 90%-os vizes ecetsavat adunk, majd 0,600 g cinkporral kezeljük. A reak-45 cióelegyet 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük, a nem reagált cinkport kiszűrjük, dimetilformamiddal átmossuk és a szűrletet mintegy 10 percig 25 ml ioncserélővel (Dowex 50—16, 20—50mesh, szulfonsav típusú, hidrogénion-formában) keverjük. Az ioncserélőt kiszűrjük 50 és vízzel mossuk. A szűrletet nagyvákuumban, 30° alatti fürdőhőmérsékleten, rotációs bepárlóban szárazra pároljuk. A maradékot metanol és víz 8 : 2 keverékének 5 ml-ében oldjuk és trietilamin 1%-os metanolos oldatával 4,3 pH-értékre beállítjuk. Az elegyet 1 órán át jeges 55 fürdőben keverjük, szárazra pároljuk, a maradékot metilénkloriddal digeráljuk, leszűrjük, metilénkloriddal alaposan átmossuk és nagyvákuumban szárítjuk. így a 7ß-(D-a-fenilglicil)-amino-cef-3-em-4-karbonsavat kapjuk, (kitermelés: 62%) amely a 2. példa szerint ka-60 pott vegyülettel azonos. 5. példa A 7ß-amino-cef-3-em-4-karbonsav az alábbi általános 65 eljárások szerint N-acilezhető és az (IB) képletű 7ß-(N-12
