166526. lajstromszámú szabadalom • Emberi epiteliális, heterploid májsejtvonal

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1970. VII. 1. (WE—417) Nagy-britanniai elsőbbsége: 1969. VII. 3. (33605/69) Közzététel napja: 1974. X. 28. Megjelent: 1976. VIII. 31. 166526 Nemzetközi osztályozás: C 12 k 9/00; 13/00; 5/00; 7/00. Feltaláló: Apostolov Kostadin vegyész, London, Nagy-Britannia Tulajdonos: THE WELLCOME FOUNDATION LTD., London, Nagy-Britannia Emberi epiteliális, heteroploid májsejtvonal i A találmány tárgya az 1. és 2. ábrákban bemutatottaknak megfelelő, patogén vírusok szaporítására alkalmas emberi epiteliális, heteroploid „Apostolov" májsejtvonal - ahol az ábrákban C jelentése egyedi sejt kerek vonalakkal, 5 N jelentése maximálisan 5 NL = nukleoluszt tartalmazó sejtmag, NL jelentése nukleolusz, CP jelentése citoplazma, MB jelentése szemcse, 10 M jelentése mitokondrium, GL jelentése glikogén -, amelyre az jellemző, hogy tápfolyadékban - amely előnyösen valamely ismert alapszérumot, szén- és energiaforrásként előnyösen szénhidrátot, nitrogén- 15 forrásként előnyösen aminosavakat, nyomelemekként előnyösen szervetlen sókat, adott esetben purinokat és pirimidin-származékokat és vitaminokat, valamint a pH-t 7,3-7,4-re beállító puffert tartalmaz - növesztve különálló szigeteket, vagy elkülönülő rögö- 20 ket alkot, morfológiailag az emberi máj hepatocitáihoz hasonló, generációs ideje legfeljebb 24 óra, és előnyösen 1% glükóz jelenlétében legalább 50%-kal megnövekedett glikogén-termelést mutat. A heteroploid sejtvonal definícióját lásd a Cancer 25 Research Vol. 27, 829 (1967) cikkben. Ismeretes (R. Haas, O. Vivell: Vírus - und Rickett - sieninfektionen des Menschen (1965), 49. oldal), hogy bizonyos emberi szövetek in vitro tenyészthetők szövetkultúra formájában, és hogy ezek 30 némelyike sejtvonallá alakul át, amely ismételten szaporítható és átoltható (passzálható), nagyobb méretekben is. Főleg azok alkalmazhatók jól, amelyek jelentős kromoszóma változáson mennek át és heteroploid tulajdonságúvá válnak, mert az ilyen vonalak folyamatosak és gyakorlatilag tetszőleges számú esetben átolthatók és, szaporíthatok, igen nagy méretekben is. Ennek célja, hogy alapul szolgáljanak vírusok, illetve a megfelelő vakcinák ipari termeléséhez. A patogén vírusok különböző típusai képesek megfertőzni a májat és azon szaporodni, így komoly igény merült fel egy olyan folyamatos sejtvonal • iránt, mely alkalmas ezen vírusok szaporítására. Ezideig a májsejtekből csak fibroblaszt (Cancer Research 27, 830 [1967]) típusú diploid sejtvonalakat nyertek, amelyek glikogén-tartalma nulla és ezek korlátozott élettartamúak voltak. Az emlősállatok májából nyert heteroploid májsejtvonalak már nem mutatják sem a differenciált parenhimás májsejtvonalak jellemző morfológiáját, sem a májsejtek jellemző biokémiai jellegzetességeit (G. L. Tritsch: Axenic Mammalian Cell Reactions, 313 [1969]). Emberi májsejtekből ténylegesen még nem sikerült olyan heteroploid folyamatos sejtvonalat nyerni, amely tulajdonságait megtartotta volna és módot adott volna a kutatóknak bizonyos patogén ágensek természetének vizsgálatára ilyen sejtekben, azok folyamatos szaporítására és ezáltal annak á lehetőségnek megteremtésére, hogy a szaporított és izolált vírusokból antigén tulajdonságú anyagokat állítsa-166526 1