166412. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antibiotikum előállítására
9 166412 10 működtetjük, míg a termékben a komponensek egyenletes eloszlást mutatnak. A baromfitakarmány komponensei — melyek egyúttal a X—5108 antibiotikum hordozóanyagaként szolgálnak — bizonyos mértékben az adott baromfi-típustól és a felhasználás módjától függnek. A takarmány főként fehérjeforrást (pl. húslisztet, hallisztet, kukoricát, földimogyorót stb.) és szénhidrátforrást (pl. magokat, lisztet, cukrokat stb.) tartalmaz. Az állatok ásványi anyag- és vitamin-egyensúlyának biztosításához a takarmányhoz a szükséges ásványi anyagokat (pl. nátrium-, kálium, magnézium, kalciumkarbonát stb.) és vitaminokat (pl. A-, B12-, D-vitamin és tiamin) is adhatunk. A takarmány természetesen más szokásos takarmányadalékanyagokat is tartalmazhat. A találmányunk szerinti növekedésserkentő készítményeket előnyösen oly módon állíthatjuk elő, hogy a hatóanyagként felhasznált X—5108 antibiotikumot koncentrált premixbe dolgozzuk be, melyet a későbbiekben baromfitakarmányhoz adhatunk. A X—5108 antibiotikumot tartalmazó szilárd premix készítéséhez bármely alkalmas hordozó- vagy hígítóanyagot felhasználhatunk, mely a hatóanyaggal szemben közömbös és a baromfira nézve nem toxikus. E követelményeket sokfajta szilárd anyag kielégíti, melyek a találmányunk célkitűzéseinek teljes mértékben megfelelnek. E célra pl. ásványi eredetű szilárd anyagokat (pl. őrölt osztrigahéjat), ehető gabonaneműeket, növényi, tengeri vagy állati eredetű anyagokat (pl. kereskedelemben kapható állati takarmányokat, maglisztet, citruslisztet, szójabablisztet, hallisztet, húsmaradványokat, fermentációknál kapott szárított maradványokat stb.) alkalmazhatunk. A X—5108 antibiotikumot a fent említett szilárd anyagokkal bármely ismert és megfelelő módszer segítségével pép, szemcse, vagy más kívánt alakban keverhetjük össze. Eljárhatunk oly módon, hogy a hatóanyagot az iners komponensekkel megfelelő őrlőberendezés segítségével finoman összeőröljük vagy porítjuk. Amennyiben az őrlésnél vagy porításnál egyes komponensek még nincsenek jelen, a kapott anyagot a további komponensekkel egyenletesen és alaposan összekeverjük. A kívánt növekedésserkentő és takarmányhasznosításjavító hatás eléréséhez szükséges X—5108 antibiotikummennyiség fontos tényező és előre meghatározott tartományon belül változhat. Növekedésserkentés céljából előnyösen alkalmazhatunk kb. 0,0001—0,01 hatóanyag/ /100 rész takarmány koncentrációjú takarmány-adalékanyagot. A takarmány hatóanyagtartalmának 0,01 rész/100 súlyrész takarmány érték fölé történő emelése általában nem szükséges, mert nem jár a hatás javulásával. A találmányunk szerinti növekedésserkentő készítmény 100 súlyrész takarmányra számítva előnyösen kb. 0,0005—0,0025 súlyrész X—5108 antibiotikumot tartalmaz. Eljárásunk előnyös foganatosítási módja szerint X—5108 antibiotikumot tartalmazó koncentrált előkeveréket készítünk. Az előkeveréket a későbbiek folyamán a takarmányhoz adhatjuk. E módszer növekedésserkentő készítmény alkalmazásának előnyös módját képezi és a hatóanyag egyenletes eloszlását biztosítja a takarmányban. A X—5108 antibiotikum mennyiségek koncentrációja az előkeverékben nem döntő jelentőségű tényező. A kívánt biológiai hatást a szükséges hatóanyagtartalmat biztosító mennyiségű premix felhasználásával — annak X—5103 antibiotikum koncentrációjától függetlenül — elérhetjük. A premix előnye, hogy a készítmény előnyösen szállítható a takarmánygyártóhoz vagy baromfitenyésztőhöz. A felhasználó a kívánt X—5108 antibiotikum-tartalmú takarmányt megfelelő mennyi-5 ségű előkeverék felhasználásával könnyen előállíthatja. Találmányunk további részleteit a példákban ismer^ tétjük anélkül, hogy találmányunkat a példákra korlátoznánk. A példákban szereplő mennyiségek súlyrészekben értendők feltéve, hogy mást kifejezetten nem köz-10 lünk. 1. Példa 15 A Streptomyces sp. X—5108 törzs fermentációja A Streptomyces sp. X—5108 törzs spóra-szuszpenzióját kémcsőben elhelyezett ferde agar táptalajból 20 literes levegőztetett Pyrex üvegben levő 15 liter alábbi össze-20 tételű táptalajba oltjuk be: 1% szójababliszt, 1% nyerscukor, 0,25% kukoricalekvár (szárazanyag), 0,1% K2 HP0 4 , 25 0,1% CaCOs , 0,5% habzásgátló (disznózsírolaj). A tenyészetet 28 C°-on 4 napon át levegőztetjük, majd a szálas tenyészetet 380 literes rozsdamentes acélból készült fermentorba visszük át, mely 230 liter alábbi össze-30 tételű táptalajt tartalmaz: 1% zsírtalanított gyapotmagliszt (Proflo), 1% kukoricakeményítő, 0,25% kukoricalekvár (szárazanyag), 0,1% CaCOs , 35 0,1% K2 HP0 4 , habzásgátló (disznózsírolaj). A táptalaj pH-ját beoltás előtt 6,8-ra állítjuk be. A fermentort levegőztetjük és a fermentációt 5 napon át végezzük. A fermentor tartalmát diatómaföld (Hyflo szűrő-40 anyag) segítségével leszűrjük. A szűrlet pH-ját 2,5-re állítjuk be és fele térfogatának megfelelő butilacetáttal extraháljuk. A derített extraktot vákuumban 40 C° alatti hőmérsékleten barna sziruppá betöményítjük, melyből petroléteres kezelés után sárga por alakjában 45 X—5108 antibiotikumot kapunk. Ennek aktivitása Bacillus E. ellen 120 egység/mg. 2. példa 50 Az X—5108 antibiotikum tisztítása szakaszos oldószeres extrakcióval A szakaszos oldószeres extrakciót 17 hektoliteres 55 rozsdamentes acél fermentorokban, 11 400 liter fermentlével végezzük el, melynek antibiotikum aktivitása in vitro teszt szerint B. simplex ellen kb. 130 egység/ml. A fermentlevet diatomaföldön átszűrjük és butilacetáttal 7,5 körüli pH-n extraháljuk. A szerves fázist vízzel 60 mossuk, majd 50 C°-nál alacsonyabb hőmérsékleten gyorsbepárlóban betöményítjük. A kapott vízmentes oldathoz nátrium-dietil-malonátot adva a pH-t 9,0 értékre állítjuk be. A kiváló sárga csapadékot szűrjük és butilacetáttal mossuk. A terméket víz és butilacetát között 65 megosztjuk és a PH-t 4-re állítjuk be, A szerves fázist 5
