166235. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 5-metil-tetrahidrohomofolsav, 5,11-metilén-tetrahidrohomofolsav és 5,11-metenil-tetrahidrohomofolsav és alkáli fémsóik előállítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1973. VI. 12. (HE-633) Elsőbbsége: Amerikai Egyesült Államok, 1972. VI 16 - 263,559 Közzététel napja: 1974. IX. 28. Megjelent: 1978. IX. 15. 166235 Nemzetközi osztályozás: C 07 d 57/30 ') Feltaláló: Knott Lyman Roger, vegyész, Taunton-Rigby Alison, vegyész, Waltham, Massachusetts, Amerikai Egyesült Államok Tulajdonos: Government of the United States of America Secretary of Health, Education and Welfare, Washington, D.C., Amerikai Egyesült Államok Eljárás 5-metil-tetrahidrohomofolsav, 5,11-metilén-tetrahidrohomofolsav és 5,11-metenil-tetrahidrohomofolsav és alkálifémsóik előállítására A találmány tárgya eljárás új, afolsawal antagonisztikus hatású 5-metil-tetrahidrohomofolsav, 5,11-metilén tetrahidrohomofolsav és 5,11-metenil-tetrahidrohomofolsav előállítására. A vegyületek az 5,6,7,8-tetrahidrohomofolsavból származtathatók le, amely vegyület mérsékelt stabilitása miatt a gyakorlatban kevéssé alkalmazható. A folsawal antagonisztikus vegyületeket Bertino J. R. tanulmányozta (Folate Antagonist as Chemotherapeutic Agents, Annals of New York Academy of Science, 186. kötet, 1971.). A kérdéssel Goodman és Gilman (Pharmacological Basis for Therapeutics, 4. kiadás 1970. 1431-1444 old.) is foglalkozott. A tetrahidrohomofolsav sóit a 3 468 886 és a 3 637 695 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírások ismertetik. Az (I) képletű folsav molekula három részből áll. Az első rész egy pterin-csoportból áll, amely egy pirimidin és egy pirazingyűru kondenzációs termékének tekinthető. A 6-os szénatomról kiinduló metilénhíd köti össze az első és második részt. A második rész egy paraaminobenzoesav-csoportból áll, a harmadik rész egy glutaminsav-csoport. A homofolsav abban különbözik a folsavtól, hogy a 9-es szénatom és a 10-es nitrogénatom között egy további metilén-csoport helyezkedik el. A tetrahidrofolsav a folsavból vezethető le, ha az 5,6,7 és 8 helyzetben hidrogént viszünk be. Az élő szervezetekből elkülönített legfontosabb folsav származékok közé tartoznak az 5-metil-, 5,10-metenil-, az 5,10-metilén-tetrahidrofolsav. E vegyületekhez hasonló homofolsav származékok a 35 10 15 20 25 30 legalkalmasabbak a folsawal antagonosztikus vegyületek előállítására; e vegyületek a folsav helyébe lépve annak funkcióit akadályozzák. Az 5-metil -tetrahidrofolsav előállítását Sakami W. írta le 1963-ban (Biochem. Prep. 10. 103 - 1963.). Tetrahidrofolsavat formaldehiddel reagáltattak, majd ezt követően a kapott 5,10-metilén-tetrahidrofolsavat káliumbórhidriddel redukálták. Az eljárás során kapott nyers 5-metil-tetrahidrofolsavat kromatográfiával tisztították; az elválasztást DEAE cellulózon (dietilaminoetilcelíulóz) végezték. Gupta V.S. és Huennekens F.M. (Arch. Biochem. Biophys. 120, 712—718, 1967.) a fentiekhez hasonló eljárást alkalmazott. A tetrahidrofolsav származékokat formaldehiddel kondenzáltaivá 5,10-metilén-tetrahidrofolsavat kaptak, amit nátriumbórhidriddel reduktív hasításnak vetettek alá. Gupta és társai azt találták, hogy a metilénhíd N5 oldalán semmilyen vagy csak csekély hasadás következik be, így kizárólag az 5-metü-származék képződik. A találmány szerinti eljárás abban különbözik az ismert eljárásoktól, hogy folsav helyett kiindulási anyagként homofolsavat alkalmazunk, és az eljárás további lépéseiben a tetrahidrohomofolsav bomlékonyságából származó nehézségeket küszöböljük ki. A találmány szerinti eljárás során homofolsavat sötétben katalitikusan redukálunk, katalizátorként platinaoxidot alkalmazva. Ezt követően a katalizátort közömbös gázt, például argon gázt alkalmazva, eltávolítjuk, majd a vizes oldatban kapott tetrahidrohomofolsavat sötétben azonnal formaldehiddel reagáltatjuk. A közbenső termékként kapott 5,11-metilén-166235