165986. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyógyászatilag hatásos, új leurozin származéok és sóik előállítására
7 165986 8 A kristályos N-dezmetil-leurozin fizikai állandói: op.: 208-210 C° (Boetius), [a]?,, = +50,1 (c = 1, kloroform). Az N-dezmetil-leurozin IR spektruma (3. ábra) abban különbözik a leurozinétól, hogy a 3350 cm-1 hullámhossznál a dezmetilezés útján keletkezett szekundér amincsoport erőteljes sávval jelentkezik. Az N-dezmetil-leurozin tömegspektruma alapján a molekula-ion tömegszáma: 794. Az ebből számított összképlet: QsH^^O«,. Elemanalízis: (C4S H S4 N 4 0 9 összegképletre) számított C = 68,00%, H = 6,85%, N = 7,05%, O = 18,10%, talált C = 67,85%, H = 6,79%, N = 6,90%, O = 17,95%. Mért tömeg: m/emé rt = 794,3895, a képlet alapján: m/eszám í to tt = 794,3882. 2. példa 1 g N-dezmetil-leurozint 6 ml tömény hangyasav és 1 ml ecetsavanhidrid elegyében oldunk és az elegyet 10 percen át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután az elegyet 30 ml 0° - +5 Cc közötti hőmérsékletre hűtött vízbe öntjük és keverés közben ugyancsak lehűtött, tömény vizes ammóniumhidroxid-oldattal pH = 9,0 értékig meglúgosítjuk. A vizes oldatból az alkaloidot 3 x 30 ml metüénkloriddal kivonatoljuk. Az egyesített, majd vízmentesített metilénklorid-oldatot csökkentett nyomás alatt szárazra pároljuk. 0,95 g amorf, fehér N-formil-leurozint kapunk, melyből az 1. példa szerint mono-szulfát-sót állítunk elő. Kitermelés: 1,01 g N-formü-leurozin-szulfát. 3. példa Az 1. példa szerint eljárva, a 12 g (0,0132 gmól) leurozin-szulfát oxidálása útján nyert 10 g drappos-fehér, habos N-formil-leurozinból és N-dezmetil-leurozinból álló szárazmaradékot 60 ml tömény hangyasav és 10 ml ecetsavanhidrid elegyében oldjuk, majd az elegyet 300 ml 0 - +5 C° közötti hőmérsékletre hűtött vízbe öntjük és keverés közben ugyancsak lehűtött tömény, vizes ammóniumhidroxid-oldattal pH = 9,0 értékig meglúgosítjuk, majd az oldatot 3 x 100 ml metüénkloriddal kivonatoljuk. Az egyesített, majd vízmentesített metilénkloridos oldatot csökkentett nyomás alatt szárazra pároljuk. 9,8 g amorf, fehér nyers N-formil-leurozint kapunk. A nyers N-formil-leurozint oszlopkromatográfiás módszerrel tisztítjuk. A 9,8 g nyers N-formil-leurozint 60 ml benzolban oldjuk, majd 500 g III. aktivitású alumíniumoxidból benzollal kiképzett 45 mm átmérőjű kromatografáló oszlopra öntjük. Az eluálást sorrendben a II. táblázatban feltüntetett oldószerekkel végezzük. II. táblázat Eluálószer 5 összetétele mennyisége ml benzd 1200 2 :1 arányú benzol-kloroform-elegy 5000 10 1 :1 arányú benzol-kloroform-elegy 3000 kloroform 800 400 ml-es frakciókat fogunk fel. Az 1—3. frakció alkaloidot nem tartalmaz. A 15 4-10. frakció kísérőanyagokat tartalmaz. Kb. all. frakciótól a kísérőanyagok mellett megjelenik az N-formil-leurozin. Kb. a 15-20. frakciók csak N-formil-leurozint tartalmaznak. Az ezt követő frakciókban egyre gyengül az N-fromil-leurozin 20 mennyisége. Az N-formil-leurozin tartalmú frakciókat egyesítjük és csökkentett nyomás alatt szárazra pároljuk. 6,5 g nyers, amorf N-formil-leurozint kapunk. A nyers, amorf N-formil-leurozin-bázisból mono-25 -szulfát-sót képzünk oly módon, hogy a 6,5 g N-formil-leurozint 32,5 ml vízmentes etanolban oldjuk, majd annyi 1% kénsavat tartalmazó vízmentes etanolt adagolunk az oldathoz, hogy pH értéke 4,0 legyen. A kristályosodás azonnal meg-30 indul. Az elegyet nénány órán át szobahőmérsékleten kristályosodni hagyjuk. Ezután a kristályos N-formil-leurozin-sót leszűrjük, vízmentes etanollal mossuk. Kitermelés: 6,05 g N-formil-leurozin-monoszulfát. 35 A tiszta N-formil-leurozint tartalmazó eluátumokat megelőző és követő, az N-formil-leurozin mellett kísérő anyagokat is tartalmazó frakciókat egyesítjük, majd szárazra pároljuk. Dy módon 1,75 g amorf anyagot kapunk, amelyet benzolban oldunk 40 és a fentiekben leírt módon újabb kromatográfiás tisztításnak vetjük alá. Az eluáláshoz azonban 1 200 ml 2 :1 arányú benzol-kloroform-elegyet alkalmazunk, így jobb elválasztást érünk el. Az egyedül N-formil-leurozint tartalmazó frakciókat a 45 fentiekben leírt módon dolgozzuk fel, ily módon további 1,05 g tiszta kristályos N-formil-leurozin-mbnoszulfátot kapunk. összkitérmelés: 7,10 g (63,7%) N-formil-leurozin-monoszulfát. 50 A termék fizikai állandói mindenben megegyeznek az 1. példában megadottakkal. 4. példa 55 A gyógyszergyártás önmagukban ismert módszereivel liofilizált ampullákat készítünk az alábbi összetétellel: N-formil-leurozin-szulfát 5 mg 60 laktóz 50 mg A liofilizátum oldásához használt oldószerampulla 5 ml fiziológiás, nátrium-klorid-oldatot és 1% benzil-alkoholt tartalmaz. Az oldószert ampuüá-65 zást megelőzően sterilre szűrjük. 4
