165789. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 9-/gamma-amino-propil/-3-amino-karbazol előállítására és e vegyületet tartalmazó tesztcsíkok - glükóz enzimatikus kimutatására
5 165789 6 Az ilyen módon elkészített tesztcsíkok az 1 598 153 számú Német Szövetségi Köztársaság-beli nyilvánosságra hoztali irat szerint felhasználhatók a glükóz kimutatására vérben. A színátcsapás vörösből olív színen keresztül zöldbe történik. Tekintettel arra, hogy a színek a hőmérséklettől függetlenek, a csíkok különösen alkalmasak remissziós fotométerben történő kiértékelésre, például a 2 056 232 számú Német Szövetségi Köztársaság-beli nyilvánosságra hozatali irat szerint. 10 A vizelet glükóztartalmának meghatározására analóg módon, a már ismert tesztpapír-csíkokat (Német Szövetségi Köztársaság-beli 1 546 307 számú nyilvánosságra hozatali irat) alkalmazzuk, melyeket szívóképes hordozók, például szűrőpapír, reagensekkel történő átitatásával állítunk elő. A következő II. táblázat a tesztpapír néhány elkészítési módját adja meg. II. táblázat A megadott mennyiségek 100 ml impregnáló-oldatra vonatkoznak Alkotórész Alsó határ Felső határ Előnyös mennyiség Glükóz-oxidáz Peroxidáz Puffer Nedvesítőszer Sűrítőszer Indikátor I 103 egység 1.0 5 egység 2—4-10 4 egység 102 egység 10 s egység 3—5«10 3 egység 0,01 mól 0,1 mól 0,025-0,05 mól 2 g-ig 0,1-0,2 g 5 g-ig 0,1-0,5 g 0,5 g 10 g 5-7 g Pufferként 4,5—7, előnyösen 5-6 pH-tartomány közötti, szokásos foszfát- vagy citrátpuffert alkalmazunk. Nedvesítőszerként egyformán alkalmazhatók a 35 nem ionogén nedvesítőszerek, például a poli-oxi-etilén-szorbitán-monolaurát, és az anionos nedvesítőszerek, például a dioktil-nátrium-szulfoszukcinát. Pufferként 4,5-7, előnyösen 5-6 pH-tartomány közötti, szokásos foszfát- vagy citrátpuffert alkalma- 40 zunk. Nedvesítőszerként egyformán alkalmazhatók a nem ionogén nedvesítőszerek, például a poli-oxi-etilén-szorbitán-monolaurát, és az anionos nedvesítőszerek, például a dioktil-nátrium-szulfoszukcinát, nátrium-laurilszulfát vagy ammónium-perfluor-oktanoát. 45 Sűrítőszerként a kismolekulájú poli-vinil-pirrolidon alkalmas, de az alginát, zselatin és hasonló anyagok is felhasználhatók. Az alkotórészeket megfelelő oldószerben, többnyire víz-etanol elegyben oldjuk. Ezzel az oldattal a 50 szűrőpapírt impregnáljuk és szárítjuk. A vízoldható alkotórészeket mint a puffert, enzimeket, nedvesítőszert és sűrítőszert, valamint az indikátorokat a szűrőpapírra két külön munkafolyamatban is felvihetjük. Az impregnált tesztpapírokat keskeny 55 csíkokra vágjuk és két műanyagfólia közé, vagy műanyagfólia és finomkötésű szitaszövet közé fogjuk. A testpapírt rövid időre a vizsgálandó vizeletbe merítjük és egy bizonyos idő után összehasonlító színskálával hasonlítjuk össze. Ala- 60 csony glükóz-koncentrációnál 1/2—1 perc után, magasabb koncentrációnál 3—5 perc után olvassuk le az értéket. A színértéket, mint ahogy megadtuk, remissziós fotométeren, vagy egyszerű tesztcsík-fotométeren is mérhetjük. 65 A fent leírt tesztfilmek és tesztpapírok pontossága megfelel a gyakorlati és klinikai vizsgálatok követelményeinek. A találmány szerinti új, I képletű 9-(7-amino-propÜ)-3-airino-karbazolt, valamint savakkal képezett sóit úgy állítjuk elő, hogy a) valamely II általános képletű vegyületet, mely képletben X jelentése hidrogénatom, aminocsoport vagy nitrocsoport, akrilnitrillel reagáltatunk, és abban az esetben, ha X jelentése hidrogénatom, nitrálunk, és a keletkezett vegyületet katalitikusan redukáljuk, vagy b) valamely IV általános képletű vegyületet, mely képletben Y jelentése reaktív észtercsoport és Z jelentése adott esetben acilezett aminocsoport, előnyösen acetamido-csoport, ammóniával reagáltatunk és adott esetben ezt követően a Z csoportot dezacilezzük és, kívánt esetben az előállított I képletű vegyületet valamely savval sóvá alakítjuk át. A karbazol-rendszer 3-helyzetében levő aminocsoportok alifás vagy aromás csoportokkal acilezhetők. Előnyösen alkalmazhatók a 2—6 szénatomszánú alkanoilcsoportok, különösen az acetilcsoport. 3
