165764. lajstromszámú szabadalom • Eljárás profilaktikus készítmény előállítására szarvasmarha trychophytosis megbetegedés ellen

5 165764 6 A táblázatban a TF 130 törzs tulajdonságait, morfológiai jellemzőit összehasonlítjuk két közönséges Trichophyton faviforme törzsével. A fenti törzset szilárd vagy folyékony táptalajon 26 és 28 C° közötti hőmérsékleten 12-15 5 napig tenyésztjük. A biomasszát elválasztjuk, homogenizáljuk és készítménnyé alakítjuk, amikor is a szuszpenziót fiziológiai oldattal addig hígítjuk, míg a koncentrációja 6-9 millió sejt/ml nem lesz. Idegen mikroflóra fejlődésének megaka- 10 dályozására penicillin és streptomicin antibiotikumot adagolunk a szuszpenzióba, 1 ml-re számítva 100—100 NE mennyiségben. A homogenizált biomasszát liofilizálhatjuk is. A készítmények előállítási eljárása tehát az 15 alábbi műveletekből áll: beoltás, a termelő törzs biomasszájának tenyésztése és elkülönítése, a biomassza homogenizálása, az egyes gombasejtekből álló szuszpenzió készítése, a szuszpenzió kikészítése, csomagolása, ellenőrzése. 20 Tápközegként maláta-agar vagy olyan táptalaj szolgál, amely a gombák dús, immunogén aktivitás csökkenése nélküli fejlődését biztosítja. Az oltóanyagot úgy állítjuk elő, hogy egy 10-20 napos tenyészetet fiziológiás oldattal a 25 táptalaj felületéről leöblítünk és a kapott szuszpenzióval friss táptalajt tartalmazó tálcákat oltunk be. A tenyésztést 26-28 C°-on 10-15 napon át végezzük. A biomasszát a táptalaj felületéről leszedjük, 30 homogenizáló készülékbe, előnyösen kolloidmalomba tesszük és hozzáadjuk a steril fizológiás oldatot. Homogenizálás után a szuszpenziót szűrjük, miközben fiziológiás oldattal időnként hígítjuk. Baktériumos szennyeződés megelőzésére anti- 35 biotikumot adagolunk hozzá. A szuszpenziót fiziológiás oldattal egy meghatározott koncentrációra hígítjuk, majd ampullákba töltjük. A kész készítményt hidegen mikroflóra távollétére, sejtkoncentrációra, ártalmatlanságra és akti- 40 vitásra vizsgáljuk. A készítmény sárga, enyhén opalizáló folyadék. Tárolás során csapadék keletkezik benne, amely rázásnál könnyen szétoszlik. Olyan ampullák, amelyekben nem lehet szétrázni a csapadékot, 45 valamint az olyanok, amelyeknél sérült a dugó, továbbá a nyitott, de az immunizálás napján fel nem használt ampullák használhatatlanok egy készítményt 4 és 8 C° közötti hőmérsékleten tároljuk. 50 A készítmény nem ártalmas, alkalmazása nem jár mellékhatással az állatok közérzetében. Az immunizálás után 1 hónappal az oltott állatokban természetes és kísérleti fertőzés ellen nagyfokú immunitás alakul ki, amelynek időtartama leg- 55 alább 4 év. Ha egészséges állatokat oltanak a készítménnyel, oltás következményekénti trichophytosis megbetegedés nem lép fel. Fertőzött, de az állat-trichophytosis tüneteit 60 még nem mutató (lappangási idő alatt levő) állatok immunizálása esetén a készítmény alkalmazása gyorsíthatja a kisebb trichophytosis fészkek kialakulását. Ezek általában gyógykezelés nélkül múlnak el. 65 Megelőzésre az állatoknak kétszer 5—10 ml mennyiségben adjuk be a készítményt intramuszkuláris injekcióval, mégpedig úgy, hogy az első és második oltás között 10—14 nap legyen. A második oltás után 10—15 nappal az oltáshelyen egy helyileg határolt, vékony, mintegy 15-25 mm átmérőjű pikkelyréteg képződik, amely néha egy enyhe trichophytosis fészkére hasonlít. 10—20 nap múlva a képződött kéreg magától leválik. Ha beteg állatokat a megelőzésre alkalmas mennyiség másfél- vagy kétszeresével kezeljük, az állatok 20-30 nap alatt más gyógyszerek kiegészítő alkalmazása nélkül gyógyulnak meg. Súlyos megbetegedés esetén célszerű a kezelés megismétlése. A trichophytosis fészkek felületét halolajjal vagy melegített vazelinnal kenjük be, hogy a trichophytosis okozta kérges rétegek könnyebben váljanak le. A készítmény alkalmazása a következő előnyöket nyújtja: A szarvasmarhák nem betegszenek meg trichophytosisban, a nyersbőrök betegség okozta minőségromlása nem lép fel, a súlygyarapodás nem csökken, az állatgondozó és annak családja megfertőzésének veszélye, továbbá az állatorvosi munkáért, többszörös gyógykezelésért, fertőtlenítésért fizetendő költség megszűnik. Világszerte kezelik a beteg állatokat, a találmány szerint előállított készítménnyel első ízben az egészséges állatok profilaktikus védelmére is nyílik lehetőség, ami nagy haladást jelent a fejlett állattartásban. Találmányunk részletesebb megismertetése céljából a készítmény előállítására és vizsgálatára az alábbi példákat közöljük. 1. példa A készítmény megvizsgálása és alkalmazása a) Megvizsgálás: Idegen mikroflóra távollétét úgy ellenőrizzük, hogy a palackból és szúrópróbaként az ampullákból kivett oltóanyaggal táptalajt oltunk be. Idegen baktériumos mikroflóra kimutatására tápközegként hús-pepton-agart, hús-pepton-főzetet és Kitt—Tarozzi féle táptalajt, idegen tenyészgombák kimutatására Czapek-féle agárral és maláta-agárral töltött kémcsöveket használunk. A megfigyelés 10 napig tart. A készítmény ártalmatlanságát úgy vizsgáltuk meg, hogy 3 házinyúlnak 3—3 ml-nyi adagot adtunk be intramuszkulárisan. (Egy házinyúl súlya 2,5-3 kg volt.) Idegen mikroflórával szennyezett készítmény-sorozatok elvetendők. Ha egy sorozat vizsgálatánál a 3 házinyúl közül egy elpusztul, vagy az injekció helyén szövevény (tályog) alakul ki, úgy az ártalmatlanságot még egyszer kell vizsgálni, kétszerannyi kísérleti állattal és kétszerannyi beoltott táptalajpróbával. Amennyiben egy házinyúl elpusztul, vagy idegen mikorflóra jelenléte megállapítható, úgy az illető sorozat immunizálásra alkalmatlannak minősül. 3