165659. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kanamycin származékok előállítására
13 165659 14 Ps. aeruginosa Dl 5 Ps. aeruginosa Dl 13 Adag (sc) (mg/kg) BB-K26 KM-B Adag (se) (mg/kg) BB-K26 KM-B 100 5/5 5/5 400 -25 1/5 0/5 200 3/5 6,3 1/5 0/5 50 1/5 1,6 0/5 0/5 12,5 3,1 0/5 0/5 DC50 8 50 DC50 145 (mg/kg) (mg/kg) Megjegyzés: KM-B5 ': kanamycin B 15 és munkatárs ai: J. A: A 0/5, 1/5, 5/5 stb. adatok az 5 állatra eső túlélő állatok számát jelzi, például 5/5 azt mutatja, hogy 5 állat közül 5 élte túl a mikroorganizmus halálos adagját, ha kanamycin 20 B-vel vagy a IVc képletű vegyülettel kezeltük. A találmány szerinti eljárás foganatosítására az alábbi kiviteli példákat adjuk meg. 1. példa 25 L-(-)-7-Benziloxikarbonilamino-a-hidroxivajsav előállítása 5,2 g (0,13 mól) nátriumhidroxid 50 ml vízzel 30 készített oldatához 7,4 g (0,062 mól) L<-)-7-amino-a-hidroxivaj savat adunk. Az oldathoz keverés közben fél óra alatt, 0-5 C° hőmérsékleten hozzácsepegtetünk 11,7 g (0,068 mól) karbobenzoxikloridot, és az elegyet ezen a hőmér- 35 sékleten további egy órán át keverjük. Ezután a reakcióelegyet 50 ml éterrel mossuk, pH-ját híg sósavval 2-re állítjuk be és 4x80 ml éterrel extraháljuk. Az éteres extraktumokat egyesítjük, kis mennyiségű telített nátriumklorid-oldattal 40 mossuk, vízmentes nátriumszulfáttal szárítjuk és szűrjük. A szűrletet vákuumban bepároljuk és a keletkező maradékot benzolból kristályosítjuk. így 11,6 g (74%) terméket kapunk színtelen lemezek alakjában, olvadáspont: 78,5-79,5 C°, [a]D =4,5°45 (c = 2, metanolban). IR-spektrum (KBr): i>c =0: 1740, 1690 cm" 1. NMR-spektrum (aceton-d6 ): 6 (ppm-ben TMS-tól mérve): 2,0 (2H, m), 3,29 (2H, d-d, J = 6,7 és 12 Hz), 4,16 (1H, d-d, J = 4,5 és 8 Hz), 4,99 (2H, s), 6,2 (2H, 50 széles), 7,21 (5H, s). 55 60 Elemzési eredmények C12 H, 5 N0 2 -re vonatkoztatva: számított C 56,91%, H 5,97%, N 5,53%, talált: C 56,66%, H 5,97%, N 5,47%. 2. példa L- ( - ) -7- Benziloxikarbonilamino-a-hidroxivajsav N-hidroxiszukcinimidészterének előállítása 10,6 g (0,042 mól) 1. példa szerinti termék és 4,8 g (0,042 mól) N-hidroxiszukcinimid (Anderson 65 0/5 400 Chem. Soc, 86, 1839 /1964/) 200 ml etilacetáttal készített oldatát 0C°-ra hűtjük, majd hozzáadunk 8,6 g (0,042 mól) diciklohexilkarbodiimidet. Az elegyet éjszakán át hűtőszekrényben tartjuk. A kivált diciklohexilkarbamidot kiszűrjük és a szűrletet csökkentett nyomáson körülbelül 50 ml térfogatra bepároljuk. így a terméket színtelen kristályok alakjában kapjuk, amelyeket szűréssel összegyűjtünk. Q Kitermelés: 6,4 g, olvadáspont: 121-122,5 C°. A szűrletet vákuumban szárazra pároljuk és a kristályos maradékot 20 ml benzol-n-hexán eleggyel mossuk, így további termék-mennyiséget kapunk. Összkitermelés: 13,4 g (92%). [a]D = l,5° (c = 2, kloroformban), spektrum (KBr): vr . n : 1810, 1755, 1680 cm"4 . NMR-spektrum (aceton-d6 ): 6 (ppm-ben TMS-tól mérve): 2,0(2H, m), 2,83 (4H, s), 3,37 (2H, d-d, J = 6,5 és 12,5 Hz), 4,56 (1H, m), 4,99 (2H, s), 6,3 (2H, széles), 7,23 (5H, s). Elemzési eredmények Cj6 H 18 N 2 0 7 -re vonatkoztatva: IR 1740, számított: C 54,85%, N 8,00%, H 5,18%, talált: C 54,79%, H 5,21%, 54,70%, 5,20%, N 8,14%, 8,12%, 3. példa l-(L-)-(-7^Benziloxikarbonilamino-0!-hidroxibutiril)-6'-karbobenzoxikanamycin A előállítása 2,6 g (4,2 moll) 6'-monobenziloxikanamycin A 40 ml 50%-o's, vizes etilénglikoldimetiléterrel készített oldatához keverés közben hozzáadjuk 1,6 g (4,6 mmól) 2. példa szerinti vegyület 40 ml etilénglikoldimetiléterrel készített oldatát. Az elegyet éjszakán át keverjük. Ezután a reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, így a terméket barnaszínű maradék alakjában kapjuk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel a következő reakcióhoz. 4. példa l-(L-)-(-7-Amino-a-hidroxibutiril)-kanamycin (IVb képletű vegyület) előálh'tása 7
