165659. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kanamycin származékok előállítására
21 165659 22 kevert oldathoz hozzáadunk 1 mól, 500 ml vízben oldott kénsavat. Az elegyet 30 percen át keverjük, majd az oldathoz hideg etanolt adunk, amíg csapadék nem válik le. A szilárd anyagot szűréssel összegyűjtjük, vizsgálataink szerint a kívánt monoszulfátsót kapjuk. 13. példa 10 l-(L-)-(-7-Amino-a-hidroxibutiril)-kanamycin A diszulfátsójának előállítása (BB-K8-2H2 S0 4 ) 35 g l-(I^)-(-7-amino-a-hidroxibutiril)-kanamycin A-t (mint monobikarbonát-trihidrátot) feloldunk 125 ml ionmentes vízben. A pH körül- 15 belül 9,0, 50 térfogatszázalékos kénsav hozzáadásával 7—7,5 értékre csökkentjük. Ezután hozzáadunk 8,5 g aktív szenet és az elegyet szobahőmérsékleten fél órán át állni hagyjuk. Ezután a szénét szűréssel eltávolítjuk és 20 40 ml vízzel mossuk. A mosóvizet hozzáadjuk a szűrlethez. Az egyesített szűrlet és mosóvíz pH-ját 50 térfogat %-os kénsav hozzáadásával 2-2,6 értékre állítjuk be. Nagymennyiségű széndioxid fejlődik. 25 Az oldatot 20 percen át vákuumban keverjük, hogy a széndioxid elpárologjon. A gázmentesített oldathoz 8,5 g aktív szenet adunk és fél órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután a szenet kiszűrjük és 35 ml 30 ionmentes vízzel mossuk. A vizet hozzáadjuk a szűrlethez. Az egyesített szűrlet és mosóvíz pH-ját 50 térfogat %-os kénsav hozzáadásával 1-1,3 értékre állítjuk be. Ezt az oldatot gyors keverés közben 35 10 perc alatt hozzáadjuk 600-800 ml metanolhoz. Az elegyet 5 percen át 1-1,3 pH-értéken keverjük, 100 mesh lyukátmérőjű szitán átbocsátjuk, 2 percen keresztül keverjük és 5 percen keresztül ülepedni hagyjuk. A felső réteg leg- 40 nagyobb részét dekantáljuk. A visszamaradó szuszpenziót megfelelő módon szűrjük, 200 ml metanollal mossuk és 24 órán át vákuumban, 50C°-on szárítjuk. 32-34 g amorf terméket kapunk, [á\tf = 74,75ö, bomlás: 220-230 C°-on. 45 Elemzési eredmények (szárazanyagra számítva*): 50 55 számított: C 33,5%, S 8,2 %, N 8,97%, talált: C 32,7 %, N 8,78%, 33,5 %, 8,7 %, 32,3 %, 8,2 %, 8,8 %, S 8,75%, 8,9 %, « 7,8 %, 8,85%. Hamutartalom: 0%. Megjegyzés: 60 x: Kari Fisher-féle módszerrel meghatározott víztartalom: 2,33%, 1,79%, 2,87%, (monohidrátra számítva az elméleti víztartalom: 2,25%). 65 Ez a só higroszkópikus, de nem elfolyósodó. Aliquot részét 18 órán át szobahőmérsékleten levegőn tárolva a víztartalom 9,55%-ra, illetve 9,89%-ra növekedett (a pentahidrát elméleti víztartalma 10,33%). Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás az I általános képletű vegyületek — ahol R3 hidroxil- vagy aminocsoportot jelent — vagy azok nemmérgező, gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sóinak előállítására, azzal jellemezve, hogy ai)a kanamycin A vagy B 6'-helyzetű szénatomjához kapcsolódó aminocsoportot valamely ismert Y amino-védőcsoporttal, előnyösen valamely acilezőszerrel blokkoljuk, a2 ) az így kapott XV általános képletű vegyület - ahol R3 és Y a fenti jelentésű -1-helyzetében levő amino-csoportot valamely XXII általános képletű acilezőszerrel — amely L-(—)-yamino-a-hidroxivajsavból származik és képletében W ismert amino-védőcsoportot jelent és M jelentése hidroxilcsoport vagy XXIII, XXIV, XXV, XXVI vagy XXVII képletű gyök - vagy annak funkcionális ekvivalensével mint primer aminők acilezésére alkalmas acilezőszerrel acilezzük és a3 )a kapott XXVIII általános képletű vegyületből - ahol R3, W és Y a fenti jelentésű - a W és Y amino-védőcsoportokat ismert módon eltávolítjuk, és a kapott I általános képletű vegyületet kívánt esetben nemmérgező, gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sóvá alakítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy ai) kanamycin A-t vagy kanamycin B-t VIII, vagy XIV képletű vegyülettel vagy az utóbbi vegyület karbodiimidjével, vagy VI, VII, IX, X, XI, XII, XIII általános képletű vegyülettel vagy az utóbbi vegyület karbodiimidjével - ahol R4 és Rs azonos vagy különböző jelentésű és hidrogén-, fluor-, klór-, brómatomot, nitro-, hidroxil-, (rövidszénláncú)-alkil- vagy (rövidszénláncú)-alkoxilcsoportot jelent és X klór-, bróm- vagy jódatomot .képvisel — vagy annak funkcionális ekvivalensével reagáltatunk 1 mól kanamycin A-ra vagy B-re számítva 1 mól vagy annál kevesebb amino-blokkoló szert alkalmazva, valamely oldószerben, 50 C° alatti hőmérsékleten, a2 ) a kapott XV általános képletű vegyületet — ahol R3 a fenti jelentésű, Y XVI általános képletű gyököt, vagy - ahol R4 és R s jelentése a fenti - XVII, XVIII, XIX, vagy XXI általános képletű gyököt, vagy XX általános képletű gyököt jelent — ahol X jelentése fenti — valamely XII általános képletű acilezőszerrel -amely L-(—)-7-amino-a-hidroxivajsavból származik és képletében W XVI általános képletű gyököt, vagy — ahol R4 és R 5 a fenti jelentésű - XVII, XVIII, XIX, vagy XXI képletű gyököt, vagy XX általános képletű gyököt jelent — ahol X jelentése fenti, és M XXIII, XXIV, XXV, XXVI vagy XXVII képletű gyököt képvisel, vagy annak funkcionális ekvivalensével mint primer aminők 11
