165658. lajstromszámú szabadalom • Eljárás S-etil- karbamoil- L-cisztein előállítására
3 165658 4 szulfoxid hatására nő meg jelentősen a reakciósebesség, és folyik le a reakció jó kitermeléssel. A hasonlóan dipoláris-aprotikus N-metil-pirrolidon esetében is rövid reakcióidő szükséges az S-etil-karbamoil-L-cisztein előállításához és a 5 hozam mintegy 10%-kal nagyobb, mint az ismert eljárásokkal előállított termék esetén. További előnyként jelentkezik, hogy az N-metil-pirrolidon alkalmazása esetén a cisztein oxidációjával nem kell számolni, továbbá az 10 oldószernyomok eltávolítása könnyebb, így azok jelenléte a feldolgozásnál kevésbé zavaró. Az S-etil-karbamoil-L-cisztein előállításához vákuumban szárított L-cisztein-hidrokloridot használunk, amelyet feloldunk dimetil-szulfoxidban 15 vagy N-metil-pirrolidonban és ehhez adagoljuk az etü-izocíanátot -melyet a Ber., 58, 1320 (1925) szerint állítottuk elő - jeges vízzel való hűtés közben, majd 4 órán át állni hagyjuk. A reakcióelegyet vákuumban szárazra pároljuk és 20 vízzel való felvétel után neutralizáljuk. Az oldatot vákuumban megfelelő koncentráció eléréséig bepároljuk és ehhez adagoljuk az etilalkoholt a tökéletes kristályosítás biztosítására. Az eljárással előállított termék fizikai-kémiai jellemzői azonosak 25 az irodalomban található adatokkal. Az eljárás előnyeként említjük meg, hogy az S-etil-karbamoil-L-cisztein előállítását egyszerűbben kivitelezhető reakciókörülmények között, rövidebb reakcióidő alatt (4 óra), jó hozammal állítjuk elő 30 (kb. 85%). Az S-karbamoil-L-cisztein és származékai tumorgátló hatással rendelkeznek. Az S-karbamoil-L-cisztein hatásos L-l 210 limfocitás leukémiára [Nature, 217, 752 (1968)], és az Ehrlich-aszki- 35 teszben a fehérjeszintézist gátolni képes [J. Natl. Cancer Inst., 28, 1165 (1962)]. Tanulmányozták az S-etil-karbamoil-L-cisztein citosztatikus hatását is és azt találták, hogy egéren az RC-emlő adenokarcinómát képes kivédeni [Texas Repts. 40 Biol. Med., 19, 860 (1961)]. Az S-etil-karbamoil-L-cisztein tumorgátló hatását eddig nem tanulmányozták. Az S-etil-karbamoil-L-ciszteint tartalmazó gyógyszerkészítmény felismerésünk alapján fel- 45 használható daganatos betegség kezelésére. A farmakológiai vizsgálatokat a C. Seilei, S. Eckhardt, L. Németh: Chemistry of Neoplastic Diseases (Akadémiai Kiadó, Budapest, 1970.) 14. oldalán leírt módszer szerint végeztük. 50 Az anyag kevéssé toxikus, LD50 értéke: egér i. p. 1300 mg/kg egér i.v. 1000 mg/kg patkány i. p. 800-900 mg/kg 55 nyúl i.v. 200-300 mg/kg a) Ehrlich (Klein) aszkitesz karcinómán a túlélés meghosszabbodik és gyógyulás érhető el. Dózis Átl. életHatárnapon mg/kg i.p. tartam, T/C xlOO (60. nap) nap él tumormentes 6x100 60 400 10/10 10/10 Jelentékeny a növekedésgátlás is: Dózis mg/kg i. p./24 óra % gátlás a 10. napon 9x100 6x50 6x25 56 99 93 b)NK/Ly aszkitesz tumoron 24 órával oltás után kezdtük a kezelést: Dózis Tumor- Gátlás Mortalitás mg/kg i.p. súlyg % 14 napon belül 8x100/24 óra Kontroll 0 6623 100 1/10 2/10 Az S-etil-karbamoil-L-cisztein hatása NK/Ly aszkiteszre (Növekedés-gátlás vizsgálata: kezelés kezdete 3 nappal az oltás után) Dózis mg/kg i. p. Tumor- Gátlás súly g % Testsúly max. csökk. Változás a 14. napon, g 8x100/24 óra 1,1 Kontroll 13,5 92 4,9 0,2 6,6 c)Az S-etil-karbamoil-L-cisztein hatása különféle tumorokra NK/Ly (early) ++++ NK/Ly (adv.) Ehrlich aszk. ++++ L1210 106 sejtszám 5 x 10 s sejtszám +++ Patkány myeloid leuk. ++ Yoshida aszk. ++ Walker aszk. — Szövettenyészetekben a daganatos sejteken 24 órával a kezelés után metafázis-blokkolást okoz: a kromoszóma szám emelkedik, azok teljesen szét- 60 szóródnak vagy a sejt közepén tömörülnek. Az elváltozások eléggé eltérnek más szerek okozta citomorfológjai hatástól. Kísérletes átoltható daganatokon a következő hatás figyelhető meg: 65 Jelmagyarázat: ++++ = gyógyulás +++ = nagyobb mint 100% túlélés, a kontrollhoz viszonyítva ++ = 75-99% gátlás vagy 50-99% túlélés — = kevesebb mint 50% gátlás vagy kevesebb mint 20% túlélés. 2
