165546. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás egy dekapeptidamid előállítására
5 165546 6 16,85 g (55 mmol) karbobenzoxi-prolil-glicinamidot [Op.: 119—120°; [a]20D = — 44,7° (c = 1, metanolban) és —31,1° <c = 1, dimetilformamidban)] feloldunk 110 ml dimeitilformamidban, és csontszenes palládium katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. A dekarbobenzoxilezés végén a katalizátort kiszűrjük, az oldathoz 14,65 g (55 mmól) pentaklórfenolt adunk és vákuumban bepároljuk. A maradékot vízből kristályosítjuk, szűrjük, vízzel, majd éterrel mossuk és szárítjuk. 23,1 g (96%) dipeptidamidpentaklórfenolátot kapunk. Op.: 135—137°; [<x]20D = —14,6° (c=l, metanolban); R1 / — 0,15—4),25. 2. lépés: Z-Arg(N0 2)-Pro-Gly-NH 2 10,95 g (25 mmól) dipeptidamid-pentaklórfenolátot i(l. példa, 1. lépés) és 8,85 g (25 mmól) karbobenzoxi-nitro-arginint feloldunk 50 ml dimetilformamidban, és 0°-on hozzáadunk 5,8 g (28 mmól) diciklohexil-karbodiimidat. A reakcióelegyet éjszakán át állni hagyjuk, majd a kivált diciklohexil4tarbamidot kiszűrjük és ez oldatot bepároljuk. A párlási maradékot feloldjuk 100 ml 1 n sósavban és 30 ml etilacetátban. A vizes fázist 2X30 ml etilaoetáttal, az egyesített etilacetátO'S részeket pedig 3X20 ml 1 n sósavval mossuk., A sósavas oldatokat egyesítés után pH 8-ra lúgosítjuk szilárd natrium-hidrogén-karbonáttal, majd 3X50 ml butanollal kirázzuk. A butanolos oldatokat egyesítjük és vízzel mossuk, majd bepároljuk. A párlási maradékot éterrel eldörzsöljük, szűrjük és szárítjuk. 7,74 g (61%) védett tripeptidamidot kapunk. Op.: 65—70°; [ee]20D =—31,4° (c=l, metanolban); R2/ = 0,7—0,8; R4 /= 0,15—0,25. 3. lépés: Z-Leu-Arg(N02)-Pro-Gly-NH 2 5.1 g (10 mmól) védett tripeptidamidot (1. példa, 2. lépés) feloldunk 10 ml anizol és 50 ml trifluorecetsav elegyében, majd két órán át forraljuk. Az oldatot bepároljuk, majd a maradékot éterrel eldörzsöljük, szűrjük és szárítjuk. 5,8 g terméket (R2 / = 0,05—0,15) kapunk, melyet feloldunk 20 ml dimetilformamidban és hozzáadunk 4,2 g (11 mmól) karbobenzoxi-leucin-p-nitrofenilésztert és 2,22 ml {20 mmól) N-metil-morfolint. A reakcióelegyet éjszakán át állni hagyjuk, majd bepároljuk és az olajos párlási maradékot etilacetát-butanol elegyében oldjuk. Az oldatot mossuk vízzel, nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel, 0,1 n sósavval és ismét vízzel, majd bepároljuk és éterrel eldörzsöljük. 4,8 g i(78%) védett tetrapeptidamidot kapunk. Op.: 110—115°; [w]20 D = —48,7° (c=l, metanolban); R2 / — 0,75—'0,85; R3 / = 0,35—0,45. 4. lépés: H-Leu-Arg(N02 )-P.ro-Gly-NH 2 -HOPCP 3,85 g (6,2 mmól) védett tetrapeptidamidot (1. példa, 3. lépés) feloldunk 8 ml anizol és 30 nil trifluorecetsav elegyében és két órán át forraljuk. Az oldatot vákuumban bepároljuk, majd a maradékot éterrel eldörzsöljük, szűrjük, éterrel mossuk és szárítjuk. Az így kapott 4,1 g terméket feloldjuk 10 ml metanolban, és 100 ml Amberlite IRA 410 (Rohm and Haas Co., Philadelphia, USA) gyantából (OH~ ciklus) készített oszlopra öntjük, majd az oszlopot 400 ml metanollal mossuk. A metanolos eluátumhoz 2,5 g pentaklórfenolt adunk, és az oldatot vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot éterrel eldörzsöljük, szűrjük, éterrel, majd vízzel mossuk és szárítjuk. Így 4,2 g (95%) tetrapeptidamid-pentaklórfenolátot kapunk. Op.: 163— 165°; R2/ = 0,2—0,3. [Ö]20 D = 24,4° (c = 1, metanolban). 5. lépés: Z-Ser-Tyr-Gly-OMe 10,41 g (26,9 mmól) karbobenzoxi-tirozil-glicin-metilésztert i(Beacham és munkatársai: J. Chem. Soc, 1967, 2520) feloldunk 110 ml metanolban, és 2,91 g (32,3 mmól) vízmentes oxálsav, valamint osontszenes palládium katalizátor hozzáadása után hidrogénezzük. A reakció végén a katalizátort kiszűrjük, és az oldatot vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot éterrel eldörzsöljük, szűrjük, éterrel mossuk és szárítjuk (R2 / = 0,3—0,4). A dipeptidészter-oxalátot feloldjuk 30 ml dimetilformamidban, hozzáadunk 7,16 ml (64,6 mmól) N-metil-morfolint és 14,43 g (29,6 mmól) ka:rbobe.nzoxÍJSzerin-pentaklórfenilésztert. A reakcióelegyet keverjük, és 30 perc alatt 5 részletben összesen 3,39 ml (29,6 mmól) N-metil-morfolint csepegtetünk hozzá. A dimetilformamidot éjszakai állás után vákuumban ledesztilláljuk, a maradékot feloldjuk etilacetátban és mossuk kálium-szeszkvikarboniáttal, vízzel, 1 n sósavval, majd vízzel és az oldatot szárítás után vákuumban bepároljuk. A maradékot éterrel eldörzsöljük, szűrjük, éterrel mossuk és szárítjuk. így 11,95 g (93,5%) védett tripeptidésztert kapunk. Op.: 149—154°; R5 / = 0,55—0,65. 6. lépés: H-Ser-Tyr-Gly-OMe-i(COOH)2 10,2 g (21,55 mmól) védett tripeptidésztert (1. példa, 5. lépés) és 2,91 g i(32,3 mmól) vízmentes oxálsavat feloldunk 200 ml dimetilformamidban, és csontszenes palládium katalizátor hozzáadása után hidrogénezzük. A reakció végén a katalizátort kiszűrjük, az oldatot vákuumban bepároljuk és a maradékot éter-aceton (1 : l)-eleggyel kristályosítjuk. Így 8,94 g (96,8%) tripeptidészter-oxalátot kapunk. Op.: 178° (bomlik); R2 / = 0,3—0,4. 7. lépés: Z-Trp-Ser-Tyr-Gly-OMe 6,9 g (16,7 mmól) tripeptidészter-oxalátot (1. példa, 15. lépés) feloldunk 50 ml olyan dimetilformamidban, amely 3,57 ml (32,14 mmól) N-metil-morfolint is tartalmaz. Az oldathoz adunk előbb 9,9 g i(16,9 mmól) karbobenzoxi-triptofán-pentaklórfenilésztert, majd 30 perc alatt 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3
