165339. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-/alfa-hidroxi-alfa-fenil-acetamido/-3-/1-metil-1H-tetrazol-5-il tiometil/3-cefém-4-karbonsav származékok előállítására - antibiotikum int

165339 3 ecetsavanhidridet alkalmazhatunk, amelyet nátriumformiát éa acetilklorid reakciójával állíthatunk elő. A találmány szerinti eljárásban, az N-acil-7-aminocefalosporánsavat az 1-metil-lH-tetrazol-5-tiollal reagáltatjuk, jellegzetesen ennek ammónium-, alkálifém-, vagy alkáli-földfém-sójának alakjában. Az 1-metil-lH-tetrazol-5-tiol jellegzetes sói, amelyeket itt alkalmazhatunk, ennek nátrium-, kálium-, lítium-, ammónium-, kalcium-, magnézium-sója. Az acetoxicsoport eltávolítása a metil-tetrazolü-tio-gyök segítségével általában semleges, gyengén savas vagy gyengén lúgos vizes közegben történik az 5,0—9,5 pH közötti tartományon belül. Előnyösen a reakciókeverék kiindulási pH-ja 6,5-9,0 közötti értékű, és ez a reakció időtartama alatt fokozatosan csökken kb. 5,5 és 8,5 közötti pH értékre. Az N-acil-7-ACA-t előnyösen a vizes reakcióközeghez adjuk, és a keverék kívánt pH értékét megfelelő pufferoló szer adagolásával, pl. foszfáttal, mint trinátriumfoszfát, trikáliumfoszfát, állítjuk be. A pH beállítására szolgáló egyéb reagensek a mérsékelten gyenge bázisok, mint pl. az ammóniumhidroxid, nátriumkarbonát, nátrium-hidrogénkarbonát. Mikor a reakcióközeg kívánt pH értékét elértük, a reakció a keverék 50 C° és 100 C° közötti hőmérsékletre való melegítéssel, előnyösen kb. 70 C°on megindul. A reakció 2—8 óra idő alatt, előnyösen 2—4 óra alatt végbemegy. A reakció folyamán, amely a 3-helyzetben levő csoportot eltávolítja, a reakcióközeg pH-ja általában fokozatosan csökken. A pH csökkenés a reakció folyamán nincs a teljes reakcióra káros hatással, és így nem szükséges, hogy valamilyen reagens hozzáadásával a reakciókeverék pH-ját állandó értéken tartsuk. A reakciósor következő műveletében a 7-helyzetű funkciós acilcsoportot hasítjuk le közvetlenül, hogy így a szabad amint előállíthassuk. Ha kívánatos, ezt a műveletet az előző műveletből származó metiltetrazolil-tio-származék izolálása nélkül is végrehajthatjuk. Előnyösen, ezt a származékot nem izoláljuk olyan esetben, midőn a reakciókeverék pH-ját sav hozzáadásával 1—3 közötti pH értékre csökkentjük. Előnyösen a savcsoport hasítását kb. pH-értéknél végezzük. Általában ásványi savakat alkalmazunk, mint pl. a sósav, kénsav, foszforsav. A savcsoportot ezután savas körülmények között alkohol jelenlétében lehasítjuk. Az alkalmazott alkohol általában rövidszénláncú alkanol lehet, pl. metanol, etanol, izopropilalkohol és hasonlók. Ha a kiindulási anyag és ezt követően a végtermék szabad sav formában van jelen, a 3-szubsztituált-7-aminocefalosporint a reakciókeverékből a reakciókeverék pH-jának az izoelektromos pontra való állításával (pH 3,9) izolálhatjuk. A keletkező termék ennél a pH-értéknél kicsapódik és a reakciókeverékből könnyen eltávolítható. Abban az esetben, mikor a kiindulási anyag és következésképpen végtermék a 3-szubsztituált-7-aminocefalosporin észtere, ezt a terméket a reakciókeveréktől egyszerűen egy megfelelő bázis hozzáadásával a reakcióközeg lúgossá tételével választhatjuk el. 4 A metil-tetrazolil-tio-származék 7-helyzetében levő acil funkciós csoport lehasítására egyéb módszerek is vannak. Például, a hasítást a 7-acilezett metil-tetrazolil-tio-származék reagáltatásával állíthatjuk elő fosz-5 forhalogenid, pL foszforpentaklorid jelenlétében. A cefalosporin C 3-metil-tetrazolil-tio-származéka esetén a 7-acil funkciós hasítást nitrozálószer, pl. nitrozilklorid, jelenlétében is elvégezhetjük. (Lásd a 3 549 628 és 3 188311 sz. amerikai egyesült ál-10 lamokbeli szabadalmi leírásokat.) A jelen találmány eljárásának utolsó műveletét a cefalosporánsav 7-amino funkciós csoportjának acilezése jelenti, hogy így a 7-helyzetben a-hidroxi-a-fenilacetamido-csoportot kapjunk. A találmány szerinti 15 eljárásban erre a célra különösen előnyös az anhidro-0-karboxi-mandulasav alkalmazása. A 3 167 549 számú amerikai egyesült államokbeli leírás említi az anhidro-0-karboxi-mandulasav használatának lehetőségét, a cefalosporin 7-amino- funkciós csoportjának 20 acilezésére, azonban elmulasztja, hogy ennek a 3-szubsztituált-tio-metil-7-aminocefalosporinnak acilezésére való különleges alkalmazhatóságát kihangsúlyozza. Megállapítottuk, hogy a jelen találmány eljárása szerint a 7-amino-3(l-metil-lH-tetrazol-5-il-tio-25 *netil)-3-cefem-4-karbonsav és származékainak acilezésekor jobb kitermelést és tisztább terméket kaphatunk anhidro-0-karboxi-mandulasavat alkalmazva, ellentétben a már említett acilezőszerekkel, pl. a savkloridokkal, kevert anhidridekkel. Az anhidro-0-30 karboxi-mandulasavat mandulasav és foszgén reakciójával könnyen előállíthatjuk. Ha kiindulási anyagként a 3-szubsztituált-7-aminocefalosporin szabad savformáját alkalmazzuk a jelen találmány eljárásának acilezési műveleténél, a reakciót 35 általában vizes közegben semleges vagy gyengén savas pH-nál végezzük. A pH általában 5,0 és 7,0 közötti, előnyösen a 6,5—7,0 közötti tartományon belül van. A reakciókeverék pH-ját bármilyen megfelelő reagenssel beállíthatjuk és állandó értéken tarthatjuk, például 40 egy erős bázis és gyenge sav sójával, mint pl. a nátrium-hidrogén-karbonáttal. A pH értékének beállítását és biztosítását megfelelő puffer alkalmazásával végezzük, amely a fent említettek bármelyike vagy egyéb hasonló típusú pufferoló anyag lehet. Az 45 alkalmazott pufferanyag minősége a jelen találmányban nem kritikus sajátságú. A 7-aminocefalosporint ekvimolárisan reagáltatjuk az anhidro-0-karboxi-mandulasawal, azonban szokásosan az anhidro-0-karboximandulasavat csekély, kb. 10-50%-os moláris feles-50 légben alkalmazzuk, hogy biztosítsuk a minimális veszteséget és a drágább cefalosporin vegyület maximális reagálását. A reakcióidő általában nagyon rövid és a reakció 0,5—2 órán belül lejátszódik. A szükséges reakcióidő attól a hőmérséklettől függ, amelyen a 55 reakciót végezzük, alacsonyabb reakcióhőmérsékletnél hosszabb a reakcióidő. Az acilezést általában 20 C° és 50 C° közötti hőmérsékleten végezzük, speciálisan előnyös azonban a szobahőmérséklet. A terméket szabad sav vagy a megfelelő alkálifém-, ill. 60 alkáli-földfém-sója alakjában kapjuk azon körülmé-2