164903. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek előállítására 1-hidroxi- benztriazol- származékok jelenlétében
11 164903 12 A csapadékot (a fenilalanin fölöslegét) kiszűrjük, és a szürletet bepároljuk. A maradékot 200 ml etilacetát és 220 ml 2 n citromsavoldat között megosztjuk. Az etilacetátos fázist 2 n citromsavoldattal és vizzel mossuk, nátriumszulfát fölött száritjuk és bepároljuk. A maradékot petroléterrel eldörzsöljük. 39,3 g terméket kapunk, op.: 108-111 C°. Etilacetát-petroléter elegyből végzett átkristályositás után 33,3 g terméket kapunk, op.: 112-115 C°, [<^]Q = "8,5° (c = 2, metanol). 4. H-Val-OBut .HCl előállítása N-karbobenzoxi-L-valin-tercier butilésztert metanolban, Pd katalizátor jelenlétében, automata titrálőberendezés segítségével, pH = 5 értéken (1 n metanolos sősavoldat hozzáadásával) katalitikusan hidrogénezünk. A H-Val-OBu^HCl-ot etilacetátból átkristályositjuk. Op.: 148 C°, [ŐC]^2 = +19,22° (c=2, metanol). II. példa Z-Val-Val-OCH3 előállitásadiciklohexilkarbodiimid és különféle adalékanyagok jelenlétében A. Egy reaktorban végzett szintézis (általános módszer): 2,5 g (10 mmól) Z-Val-OH, 1,7 g (10 mmól) H-Val-OMe.HCl, 1,28 ml (10 mmól) N-etil-morfolin, 10-20 mmól (1) általános képletü vegyület és 20 ml abszolút tetrahidrofurán elegyét keverés közben 0 C°-ra hűtjük. Az elegyhez 2,2 g DCC abszolút tetrahidrofuránnal készitett, 0 C°-ra hűtött oldatát adjuk, és egy órán át 0 C -on, majd 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A csapadékot kiszűrjük, a szürletet bepároljuk, és a maradékot etilacetátban oldjuk. Az oldatot telitett nátriumhidrogénkarbonát-oldattal, 2 n sósavoldattal, telitett nátriumhidrogénkarbonát-oldattal,majd vizzel mossuk, nátriumszulfát fölött száritjuk, bepároljuk, és a maradékot petroléterrel eldörzsöljük. A különböző 1-hidroxi-benztriazol-vegyUletek jelenlétében előállitott dipeptidészter mennyiségét a 3. táblázatban közöljük. B. A karboxil-komponens előzetes aktiválása (általános módszer) 2,5 g Z-Val-OH-t (10 mmól) és 10-20 mmól (I) általános képletü vegyületet 10 ml abszolút tetrahidrofuránban oldunk, és az elegyhez 0 C°-on 2,2 g DCC hideg abszolút tetrahidrofurános oldatát adjuk. Az elegyet 1 órán át 0 C°-on, majd 1 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, 1,7 g (10 mmól) H-Val-OMe.HCl-t és 1,28 ml (10 mmól) N-etil-morfolint adunk hozzá, és 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Az elegyet az A. bekezdésben leirt módon dolgozzuk fel. A különböző 1--hidroxi-benztriazol-vegyületek jelenlétében előállitott dipeptidészter mennyiségét a 3. táblázatban (1. 7. oldal) közöljük. III. példa BOC-Gln-(Bzl)-OBzl előállitása 1. El nem különitett BOC-Gln(OBT)-OBz-vel 3,4 g (10 mmól) BOC-Glu-OBz és 1,5 g (11 mmól) 1-hidroxi-benztriazol 20 ml abszolút tetrahidrofuránnal készitett, 0 C°-os oldatához 2,2 g DCC abszolút tetrahidrofuránnal készitett, 0 C°-os oldatát adjuk. Az elegyet 1 órán át 0 C°-on, majd 1 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, 1,1 ml benzilamint adunk hozzá, és további 1 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A csapadékot kiszűrjük, a szürletet bepároljuk, a maradékot etilacetátban oldjuk, és az oldatot telitett nátriumhidrogénkarbonát-oldattal, 2 n citromsav-oldattal, telitett nátriumhidrogénkarbonát-oldattal, majd vizzel mossuk, nátriumszulfát fölött száritjuk és bepároljuk. A maradékot petroléterrel eldörzsöljük. 3,6 g (84,4%)terrnéketkapunk, op.: 87-88 C°. További tisztitás céljából a terméket etilacetátban oldjuk, és körülbelül 20 g bázikus aluminiumoxidon, (Woelm, I. aktivitási fok) kromatografáljuk. Az eluátumot bepároljuk, és a maradékot petroléterrel eldörzsöljük. 2,9 g (68,1%), kromatográfiásan tiszta, 92-94 C°-on olvadó terméket kapunk, [d]p= -19,9° (c = 2, metanol). 2. Élnem különitett BOC-Glu(OSu)OBz-vel, 2 mólekvivalens N-hidroxi-szukcinimid jelenlétében A III. 1. példában leirt eljárást ismételjük meg azzal a különbséggel, hogy 1-hidroxi-benztriazol helyett 2,3 g (20 mmól) N-hidroxi-szukcinimidet használunk fel. A maradék petroléterrel nem kristályositható. Bázikus aluminiumhidroxid-oszlopon végzett tisztitás után 1,75 g (41,1%) kristályos terméket kapunk, op.: 75-77 C°. A termék kromatográfiásan nem tiszta. 3. El nem különitett BOC-Glu(OSu)OBz-val, 1 mőlekvivalens N-hidroxi-szukcinimid jelenlétében A III. 1. példában leirt eljárást ismételjük meg azzal a különbséggel, hogy 1-hidroxi-benztriazol helyett 1,15 g (10 mmól) N-hidroxi-szukcinimidet használunk fel. A maradék petroléterrel nem kristályosítható. Bázikus alumíniumoxid-oszlopon végzett tisztitás után 2,2 g (51,5%) kristályos terméket kapunk, op.: 88-90 C°. A termék vékonyrétegkromatográfiás an csaknem teljesen tiszta. IV. példa Peptidszintézisek Z-Phe-OBT-vel 1. Z-Phe-OBT 30 g (0,1 mól) Z-Phe-OH és 15 g (0,11 mól) 1-hidroxi-benztriazol 300 ml abszolút tetrahidrofuránnal készitett, 0 C°-os oldatához 22 g DCC 0 C°-os oldatát adjuk. Az elegyet 1 órán át 0 C°on, majd 1 őrán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, a csapadékot kiszűrjük, és a szürletet bepároljuk. A maradékot izopropanolból átkristályositjuk. 28,9 g (69,5%) terméket kapunk, op.: 120-122 C°. 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 6
