164870. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nukleozid- 5'-difoszfátok és észtereik előállítására
164870 6. példa Uridüi-5' -difoszfát-glukóz-nátriumsó (UDPG-Na) 15,3 g glUkóz-1 -foszfát-kalciumsót és 10 g uridin-5'-monofoszfát-piperidátot 100'ml desztillált vizben oldunk, az oldatot a 2. példában leirt módon sósavval megsavanyitjuk és a reakcióelegyet a leirt módon feldolgozzuk. A terméket a 2. példával egyező termelési hányaddal kapjuk. Ugyanilyen módon, glukózamin-foszfát illetve N-acetil-glUkózamin-foszfát kalciumső alakjában kiindulóanyagként való alkalmazásával uridinfoszfát-glUkózamint illetve uridin-difoszfát-N-acetil-glükózamint állitunk elő. CDP-kolinnátriumső: fajlagos extinkciő £,,_ 7-espH-t-fd ÍI -i A 11 *°0 nm értéknél=7,4 cmz / jumől extinkciós hányadosok: E 250nm E, 260nm E, '280nm 1260nm = 0,86; 0,98; 10 15 25 7. példa Adenozin-5'-difoszfát-dinátríumsó (ADP-Na2 ) 20 4,2 ml tömény foszforsavat 200 ml metanolban oldunk, az oldatot morfolinnal 3,0pH-értékig semlegesítjük és 60 C° hőmérsékletre melegítjük. Ezután 13 g adenozin-5'-monofoszfát-morfolidat 100 ml 60 C° hőmérsékletű metanollal készitett oldatát adjuk az elegyhez; a pH-érték a semleges adenozin-5'-monofoszfát-morfolidát-oldat hozzáadása közben a reakció folyamán kissé emelkedik. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 24 óra hosszat állni hagyjuk, majd kb. 50 ml térfogatra betörnényitjuk, a metanol eltávolítása céljából, majd a 3. példában leirt módon, egy 600 ml Dowex 1x2 anioncserélővel töltött oszlopon kromatografáljuk és a terméket a leirt módon feldolgozzuk. Hozam 9 g ADP-Na2 (az elméleti hozam kb. 50%-a). A példák szerint előállított vegyületek azonosítási adatai a következők: 30 35 40 10 UDPG-nátriumsó: fajlagos extinkciő pH-értéknél= = 9,9 cm2 /jumől £,,„ 7-es 260 nm extinkciós hányadosok: E, 260nm E, 260nm E, 280nm ^óOnm "290nm ^óOnm 0,73; 0,40; = 0,04 ADP-dinátriumsó: fajlagos extinkciő pH-értéknél= =15,0cm2 /pmól 8. példa £,,„ 7-es 260nm Citidin-5' -difoszfát-kolin-nátriumsó (CDP-kolin-Na) 81 g kolinfoszfát-kalciumklorid . 4 H2O 1 liter forró metanollal készitett oldatát tömény sósavval pH = 4 értékre állítjuk be. Ehhez az oldathoz szobahőmérsékletre való lehűlés után hozzáadjuk mintegy 47 g CMP-pirrolidinát oldatát. A kezdetben tiszta oldat megzavarosodik és rövid idő múlva erőteljes csapadékkiválás jelentkezik. A reagenskeverékhez további 24 óra után 1,6 liter izopropanolt adagolunk, összekeverjük, a csapadékot leszűrjük, vizben oldjuk, semlegesatjUk, majd 2,0 liter Dowex 1x2 anioncserélő gyantával (formiát alak, 50-100 lyukbőségben) töltött oszlopon kromatografáljuk. Az oszlopot vizzel mossuk, majd 0,02 mólos hangyasavval eluáljuk a CDP-kolint. A CDP-kolin-tartalmu frakciókat betöményitjUk, nátriumhidroxid-oldattal semlegesítjük és eta-45 nol hozzáadásával kristályosítjuk. A CDP-kolin-nátriumsót - mely 4 molekula kristályvizet tartalmaz - leszivatjuk, etanollal mossuk és szárítjuk. Kitermelés: 61-65 g (az elméleti érték 85-89 50 %-a,a kiindulóanyagként alkalmazott CMP-pirrolldinátra vonatkoztatva). J290nm E, 0,34; 260nm 55 9. példa CDP-etanolamin-nátriumsó: fajlagos extinkciő £„,„ 7-esöHILA? 'i n A 2 / 260nm v értéknel=7,4 cnv 4/ jumől ADP-galaktóznátriumső: fajlagos extinkciő L. 7-es pHÍ-^XI -1 1= n 2 / 260nm értéknel=15,0cm / jumől Citidin-5' -difoszfát-kolin-nátriumsó (CDP-kolln-Na) 60 A 8. példában ismertetettekkel teljesen azonos módon járunk el, csupán CMP-pirrolidinát-oldat helyett CMP-imidazolidátot alkalmazunk. A kapott termék kitermelése megfelel a 8. pél-65 dában ismertetetteknek. 5
