164639. lajstromszámú szabadalom • Eljárás többszálú, interferon- indukáló hatású poliriboinozinsav-poliribocitidilsav komplexek előállítására

7 164639 3. táblázat 8 Nyúl vérszérumának PVM elleni védőhatás Frakció Mért átlag-Dózis Nyúl vérszérumának sejttenyészeten száma molekulajug/ interferon1. frakcióhoz súly nyúl faktora viszonyított %-os aktivitás 1 106 2 80, 160 100 2 6,4-10

s 2 640, 160 — 3 4,4« 10

s 2 320, <5 200 4 2,8-10

s 2 20, 80 100 5 2,0-10

s 2 20, 20 100 6 1,2-10

s 2 <5, 160 — 7 1,0- 10

s — — 50 8 7,0-10

4 2,8 <5, <5 — 9 Kontroll 6,0-10

4 — <5, <5 12,5 4. példa Poliribocitidilsav homopolinuklectiu (rCn, Sw

20=9,2) oldatát 5, illetve 15 percen át az 1. példában ismertetett körülmények között hangbesugárzással kezeljük. A kezeletlen, illetve a csökkentett átlagmolekulasúlyú rCn

polinukleotidet 20 komplexképződés közben rln

polinukleotiddal (Sw,20=9,2) reagáltatjuk. Megvizsgáljuk a kapott rIn

íC

n

komplexek relatív viszkozitását, nyúlon kifejtett interferon-indukáló hatását és sejttenyé-25 szeten szájnyálkahártya gyulladás vírusfertőzés ellen kifejtett védőhatását. Az eredményeket a 4. táblázatban foglaljuk össze. 30 4. táblázat rí TC Besugárzás P , n

Dózis Nyúlvérszéideje r^\

V

V&l

rumának interperc yi^.

°" nyúl feron-faktora VSV elleni védőhatás sejttenyészetben Legkisebb hatásos dózis Mg/ml 0 15 Kontroll (polimer nélkül) 3,0 1,7 1,5 5 1 5 1 20,320 10, 40 320, 640 5,160 320,640 160, 640 <5 <5 0,002-0,004 0,001-0,002 0,002-0,004 50 5. példa 1 mg/ml koncentrációjú rCn

-oldatot (S

w

,20=9,2) 0-30 percig hasnyálmirigyből elkülönített ribo- 55 nukleázzal kezelünk. A ribonukleázt 0,01 jug/ml koncentrációban alkalmazzuk. A ribonukleázzal lebontott rCn

frakciókat ekvimoláris koncentrációban komplexképzés közben kezeletlen rln polimerrel (SWj

20=9,2) reagáltatjuk. Az rl

n

oldat 60 hozzáadására az rCn

lebomlási folyamata azonnal leáll. A kapott rIn

iC

n

komplexek relatív viszkozitását, ultraibolya abszorpciós spektrumát, hipokromicitását és biológiai hatásuk adatait az 5. táblázatban közöljük. 65 Megyjegyzések az 5. táblázathoz: XA kezelt egerek legalább 40%-ában PVM vírusfertőzés ellen védőhatást kiváltó legkisebb intranazális dózis jug/ml-ben. Az egereket pusztulást okozó, 30 LD5 o

mennyiségű PVM vírussal fertőztük meg. XXA kezeletlen minta adataival (a táblázat első sora) összehasonlítva. A táblázatból kitűnik, hogy az rIn

:rC

n komplex aktivitása 2,5-5 perces besugárzás után a legkedvezőbb. 4