164476. lajstromszámú szabadalom • Kompozició és eszköz mikroorganizmusok szállítására, tárolására és felhasználására

164476 3 4 között észlelhető növekedésének és szaporodásának mértékét összehasonlítjuk a tényleges értékkel. Ezzel a módszerrel ellenőrizzük a vizsgált táptalajok minőségét és állapotát. Ha a vizsgált táptalajon kifejlődő telepek száma gyakorlatilag megegyezik a kompozícióiban ténylegesen jelenlevő mikroorganizmusok számával, a táptalaj mikrobiológiai célokra felhasználható minőségű és állapotú, ellenkező esetben a táptalaj mikrobiológiai használatra alkalmatlan. A találmány egyik előnyös változata olyan eszközre vonatkozik, amely a mikroorganizmusok áthatolását megakadályozó porozitási fokú membránból vagy szűrőből (amelyen a mikroorganizmusok lerakódnak), meghatározott koncentrációban egy vagy több specifikus vagy ismert mikroorganizmus száraz előtenyészetéből és mikrobiológiai szempontból közömbös kolloid szuszpendálószerből áll. A következőkben a csatolt ábrákat ismertetjük. Az 1. ábra a találmány szerinti eszköz távlati képét mutatja be az ahhoz csatlakozó kezelőeszközökkel együtt. A 2. ábra egy korongos eszköz távlati kénét mutatja be, amely egy mikroporózus membránszűrőből és egy arra erősített tápanyag-korongból áll. A 3. ábra a 2. ábra 3—3 vonal menti függőleges metszete. A 4. ábra a találmány szerinti eszköz felülnézeti képe, amely az eszközön kifejlődött mikroorganizmusok, ill. mikroorganizmus-telepek elhelyezkedését mutatja be. A találmány szerint lényegében úgy járunk el, hogy a készítményt, reagenst, táptalajt, agar-gélt, vizsgálati lemezt, oldatot stb, a találmány szerinti mikroorganizmus-kompozícióval oltjuk be, ill. hozzuk érintkezésibe. Ez a kompozíció — lényegében egy ismert mikroorganizmus-törzs stabilizált előtenyészete, .amelyet kolloid szuszpendálószerrel stabilizálunk. A mikrobiológiai reagenst vagy közeget beoltjuk a fenti kompozícióval, egy adott inkuhálási időszak elteltével meghatározzuk a tényleges teleuszámot, és összehasonlítjuk azt a várt értékkel. A kompozíció előállításának első lépésében az adott mikroorganizmus alaptenyészetéből előtenyészet-sorozatot készítünk annak érdekében, hogy a mikroorganizmust a stabilizált táptalajhoz adaptáljuk, és meghatározzuk az egyes mikroorganizmusok növekedési feltételeit a közegekben. Az előtenyészét előállításának minden egyes lépésében a következő közeg beoltásálhoz az előző tenyészetből származó, pontosan meghatározott térfogatot vagy alikvot részt használunk fel. Ezt az alikvot részt az ún. logaritmikus szakaszban különítjük el, azaz akkor, amikor a mikroorganizmus életképessége és szaporodási sebessége a maximális. Miután meghatároztuk a növekedési körülményeket és megbizonyosodtunk arról, hogy a felhasznált törzs nem mutáns vagy változat, a tenyészet előre meghatározott tértfogatrészét mért térfogatú szuszpendáló közegbe visszük át, majd a kapott szuszpenzióból precíziós mikropipetta segítségével mikro-alikvot részt különítünk el, és ezt tároljuk, csomagoljuk, vagy közvetlenül a vizs-5 gálandó készítményre visszük át. A mikro-alikvotok előállítási módját a későbbiekben részletesen ismertetjük. A találmány bármilyen ismert mikroorgánizmus^fajra alkalmazható. így pl. mikroorganiz-10 musként Staphylococcus aureust (ATCC—25923), Streptococcus pyogenest i(ATCC—9342), Streptococcus faecalist (ATCC—14507), Diplococcus pneumoniaet i(ATCC—11733), Haemophilus influenzáét (ATCC—19418), Klebsiella pneumo-15 niaet (ATCC—10031), Escherichia colit (ATCC— 25922), Proteus miralbilist (ATCC—14153), Salmonella törzseket, „O" jelű coli-törzseket, élesztőféleségeket, gombákat és hasonlókat alkalmazhatunk. Szuszpendálószerként bármilyen, mikrobiológiai szempontból közömbös kolloid anyagot felhasználhatunk. A „mikrolbiológiai szempontból közömbös" kifejezésen azt értjük, hogy a szer a felhasznált mikroorganizmusra semmiféle káros hatást nem fejt ki. A pontos bemérés megkönnyítése érdekében előnyösen olyan szuszpendálószert használunk fel, illetve a szuszpendálószer koncentrációját úgy választjuk meg, hogy elkerüljük a gélképződést. A találmány szerint pl. a következő közömhös kolloid anyagokat használhatjuk fel: szabad vagy észterezett karboxil-csoportot tartalmazó savanyú poliszacharidok, pl. pektinek, pektin-aralbán és -galaktán, tengeri növényekből elkülöníthető poliszaCharidok, pl. karragenátok és alginátok. A felsoroltakon kívül kolloid anyagként zselatint és egyéb fehérje-lebomlási termékeket, természetes gumikat, cellulóz^gumikat (pl. metilcellulózt) és kol,. lóid szilikonokat is felhasználhatunk. A szuszpendálószer koncentrációja az anyag gélképző vagy sűrítő sajátságaitól függően változik. Vizes szuszpenzió esetén általában 0.1— 1,0 súly% mennyiségű szuszpendálószer haszna-45 lata elegendőnek bizonyult. Azt találtuk, hogy a találmány szerint szuszpendálószerként különösen előnyösen használhatók fel a vízben oldódó alginátok. Ezek az anyagok a természetben előforduló szénhidrátok, 50 amelyek tengeri fűfélékből különíthetők el. Az alginsav legfontosabb származéka a megfelelő nátriumsó algin —, amely a találmány szempontjából igen jelentős. A találmány szerint szuszpendálószerként előnyösen kb. 0,1— 55 0,5 súly% nátrium-alginátot használhatunk. Ez az anyag a mikroorganizmus-kompozíciók előállításában nemcsak kolloid szuszpendálószerként hat, hanem a fagyasztva szárítás során a kristályképződést is a minimumra csökkenti. 60 Amint már a korábbiakban közöltük, a találmány szerinti kompozíciókat különféleképpen használhatjuk fel. így pl. eljárhatunk úgy, hogy a mikroorganizmus-tenyészet végső imikro-alikvotját steril edénybe töltjük, fagyasztva szárít-65 juk, majd az edényt lezárjuk. Egy másik fel-2