164262. lajstromszámú szabadalom • Eljárás alfa-karboxi-benzilpenicillin előállítására
3 164262 4 majd a kapott III általános képletű a-karbamil-benzilpenicülint - ahol Rt, R 2 és X jelentése a fenti —. alkalikus hidrolízisnek vetjük alá és a kapott I általános képletű a-karboxi-benzilpenicillint - ahol X jelentése a fenti - adott esetben 5 savakkal vagy bázisokkal kezelve a megfelelő fiziológiailag elfogadható savaddiciós-, fém vagy ammóniumsóivá alakítjuk vagy adott esetben az I általános képletű a-karboxi-benzilpenicillint sóiból savval vagy bázissal végzett kezeléssel szabaddá 10 tesszük. A kondenzációt szerves vagy vizes-oldószeres közegben hajtjuk végre, előnyösen vizes-acetonos közegben. Valamely N-szubsztituált vagy szubsztituálatlan fenil-malonsav-monoamid reakcióképes 15 származékaként annak klórhangyasav-alkilészterrel alkotott vegyes anhidridjét alkalmazzuk. Savamidok alkalikus közegben viszonylag könnyen hidrolizálhatók. Az a-karbamil-benzilpenicillin (III általános képlet) esetében valóban fenn 20 áll a /-laktam gyűrű hidrolízisének és egyben a penicillin-molekula bomlásának veszélye. Nem várt módon úgy találtuk, hogy az NH2 -csoportok biztonságosan eltávolíthatók a penicillin jelentős lebomlása nélkül, ha az oldat pH-ja 25 8,5-nél nem nagyobb. Ezek a reakciókörülmények biztosíthatók, ha bórax, nátrium-hidrogénkarbonát vagy dinátriumhidrogénfoszfát telített vizes oldatait alkalmazzuk a pH fenntartására. A hidrolízis ideje és az alkalmazott hőmérséklet 30 az amid jellegétől függ. A hidrolízist a 20-50 C°, előnyösen 30-40 C° hőmérséklet tartományban 1—12 óra, előnyösen 4-8 óra alatt hajtjuk végre. Az a-karboxi-benzilpenicillin amid-származéka 35 (III általános képlet) elhidrolizálható közvetlenül a kondenzáció és a szerves oldószer elpárologtatása után a kiindulási reakcióelegyben, vagy a reakcióelegyből történő izolálása után. 40 A találmány szerinti eljárás lehetővé teszi nagy tisztaságú (50% felett) a-karboxi-benzilpenicilŰn preparátumok előállítását jó kitermeléssel. A következő példákkal világítjuk meg a találmányt közelebbről, anélkül, hogy az oltalmi 45 kört a példákra korlátoznánk. 1. példa 50 3,5 g (0,018 mól) fenil-malonsavamid-nátriumsó 75 ml vízmentes acetonnái készült oldatához állandó keverés közben 0C°-on 1,9 ml (0,018 mól) klórhangyasav-etilésztert adagolunk. A reakcióelegyet ezen a hőmérsékleten további 15 percig 55 keverjük. Ezután -50C°-ra hűtjük, és állandó keverés közben 3,9 g (0,018 mól) 6-amino-penicillánsav 60 ml vízzel, 54 ml 1 Nátrium-hidrogénkarbonát oldattal és 75 ml acetonnal készült hideg (0 C°) oldatához adagoljuk. Ezután a hűtőfürdőt 60 eltávolítjuk, és a reakcióelegyet további 90 percig keverjük. A következő lépésben az acetont redukált nyomáson szobahőmérsékleten elpárologtatjuk és a visszamaradt vizes oldatot etiléterrel (3 X 20 ml) 65 extraháljuk. Ezután a vizes oldat pH-ját 6 N sósavval 2-re állítjuk be. A terméket a savanyú vizes oldatból etiléterrel történő alapos extrahálással izoláljuk. Az egyesített extraktumokat hideg vízzel (3 X 25 ml) mossuk és vízmentes nátriumszulfát felett szárítjuk. Az a-karbamil-benzilpenicillin (III általános képlet) nátrium sóját etilkapronsav-nátriumsó éteres oldatábal csapjuk ki, majd szárítjuk és így 6,5 g finom kristályos terméket kapunk, 86,5%-os kitermeléssel. A termék a jodometriás analízis alapján 73,5%-os tisztaságúnak bizonyult. Az infravörös spektroszkópiás vizsgálatok abszorpciós sávokat mutatnak 1595, 1700 és 1760 cm. 1 maximumokkal. A termék olvadáspontja 125-130 C° (bomlik). 2. példa 3 g, az 1. példában leírt módon kapott a-karbamU-benzüpenicillin-nátriumsót 50 ml vízben oldunk és az oldathoz 5 g boraxot adunk. A reakcióelegyet ezután 35 C°-on 6 órán át keverjük. A hidrolízis folyamatát vékonyréteg-kromatográfiával ellenőrizzük. A kromatográfiánál G típusú szilikagélt használunk, a futtatást butanol-etanol-aceton-víz 4:1:4:1 arányú elegyével végezzük, majd az előhívás keményítő- és jód oldattal történik. A hidrolízis után a keveréket lehűtjük, és az a-karboxi-benzilpenicillin dinátriumsóját az 1. példában leírt módon izoláljuk, és így 2,5 g (79,1%) finom kristályos terméket kapunk. A termék 50% tisztaságú, infravörös spektruma és Rf értékei megyegyeznek az a-karboxi-benzilpenicillin standard értékeivel. Olvadáspontja 150-156 C° (bomlik). 3. példa A 2. példában leírt hidrolízist hajtjuk végre borax helyett nátrium-hidrogénkarbonát telített vizes oldatával. 6 órás hidrolízis után vékonyréteg-kromatográfiásan analizálva a reakcióelegyet, megállapítható, hogy az amid-csoportok 90%-a elhidrolizált. 4. példa A 2. példában leírt hidrolízist borax helyett dinátrium-hidrogénfoszfát telített vizes oldatával hajtjuk végre. 5. példa Az 1. példában leírt módon a kondenzálást nátriumsója helyett 1,5 g szabad fenil-malonsav-monoamiddal és sztöchiometrikus mennyiségű trietilaminnal, illetve 1,6 g 6-amino-penicillánsawal játszatjuk le. 0,8 g (27,2%) a-karbamin-benzilpeniciÜin-nátriumsót kapunk 72,9%-os tisztasággal 2
