163922. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ehető proteinanyagok előállítására
163922 10 szalagos szárítón 75 C°-os hőmérsékletű levegővel 3. példa: szárítottuk. Ä szárított termék összetétel a következő volt: összes nitrogén 8,0 % hamu 5,3 % lipid 2,7 % fehérjehasznosítási tényező az ossz nitrogén alapján 52 2. példa: 10 liter alábbi összetételű táptalajt készítettünk és sterilizáltunk a már leírt módon 14 literes New Brunswick, Microferm fermentorban. Végső % 15 oldat oldat oldat PH = 3,0 4. oldat 5. oldat 6. oldat PH PH 5,0 '2,5 3,0 0,7 1,0 0,001 0,0005 0,0001 0,025 0,0001 0,0001 0,0015 0,1 i) A 7. oldat nélkül (minimális táptalaj) ii) Olyan összetételű 7. oldattal, hogy a táptalajban a végső biotinkoncentráció 50 /ug/1 legyen iii) Olyan összetételű 7. oldattal, hogy a táptalajban a biotin végső koncentrációja 50 jug/1, a kolinkloridé 30 mg/l és a metioniné 300 mg/l legyen 0,2 20 25 30 szőlőcukor ammóniumszulfát kálium dihidrogénfoszfát FeS04 -7H 2 0 MnS04 -4H 2 0 CuS04 -5H 2 0 MgS04 -7H 2 0 Na2 Mo0 4 -2H 2 0 CoCl2 -6H 2 0 CaCl2 -2H 2 0 NaOH Valamennyi fenti oldatot 15 percig és 1,05 att nyomáson hővel sterilizáltuk. 7. oldat vitaminok és/vagy aminosavak az alábbiakban leírtak szerint és szűréssel sterilezve. Az oldatokat aszeptikus körülmények között adtuk be a készülékbe. Az 1. példában ismertetett módon inokulumot tenyésztettünk és adtunk a rendszerhez, azzal az eltéréssel azonban, hogy a fermentorban a végső koncentrációt úgy állítottuk be, hogy az a micélium száraz súlyára számítva 0,5 g/l legyen. A növekedési feltételek a következők voltak: 30 40 C° hőmérséklet: 1 tf./perc levegőztetés: a keverő fordulatszámát úgy állítottuk be, hogy a táptalajban az oldott oxigén szintje New Brunswick Ins. DO szondával mérve 25%-kal a telítettségnek megfelelő érték fölött legyen. A habzás visszaszorí- 45 tására steril 2000-es polipropilénglikol habzásgátlót adtunk a rendszerhez. A pjj-t steril káliumhidroxid oldat adagolásával 6,0 és 6,3 között tartottuk. Növekedési 50 sebességek (óra"1 ) 35 igen kicsi 55 0,25 60 65 A táptalaj összetétele és a feltételek megegyeztek a 2. példában leírtakkal, a glükózt azonban maltózzal helyettesítettük. 0,18 10 0 7. oldat a 2. példa ii) pontja szerint Ü) 7. oldat a 2. példa iii) pontja szerint 0,21 4. példa: A leírt módon 100 liter alábbi összetételű táptalajt készítettünk és sterilizáltunk 130 literes savállóacél fermentorban. %-os végkoncentráció glükóz 4,0 kukoricalekvár (50% szilárd anyag-tartalommal) 0,8 ammóniumszulfát 0,2 kálium dihidrogénfoszfát 0,2 MgS04 -7H 2 0 0,025 ZnS04 -7H 2 0 0,0005 FeS04 -7H 2 0 0,0005 MnS04 -4H 2 0 0,0001 A táptalajt pH = 3,0-nál 30 percig sterilizáltuk 1,05 att nyomáson, majd Pfj-ját, 30 C°-ra való lehűlés után steril ammónia adagolással 5,0-ra állítottuk be. Aszeptikus körülmények között annyi szűréssel sterilezett biotint adtunk a táptalajhoz, hogy annak végkoncentrációja 40 jugA legyen. A 10 liter, keverővel ellátott készülékben 30 C°-on 18 órán át szaporított tenyészetet az alábbi összetételű táptalajra oltottuk: glükóz 2%: tripton (Oxoid) 0,4%: élesztőkivonat (Oxoid) 0,1%: ammóniumszulfát 0,15%: kálium dihidrogénfoszfát 1%: nátriumhidroxid 0,1%: magnéziumszulfát 0,025%: ferroszulfát 0,001%: cinkszulfát 0,001%: mangánszulfát 0,0005%: rézszulfát 0,001%: 2000-es polipropilénglikol habzásgátló 0,05%. A rendszert 45 percig 1,05 att nyomáson sterilizáltuk, majd az általunk kitenyésztett Fusarium graminearum Schwabe I. M. I. 145 425 spóraszuszpenziójával beoltottuk. A növekedési viszonyok a következők voltak: 30 C° hőmérséklet: oly módon szabályozott levegőztetés, hogy a táptalajban az oldott oxigén koncentrációja 10%-kal a telítettségi érték fölött legyen. A habzás visszaszorítására steril 2000-es polipropilénglikol habzásgátlót adagoltunk és a pH -t steril ammónia adagolással 5,0 értéken tartottuk. A növekedés időszakában kivett micélium minták elemzése száraz súlyra vonatkoztatva a következő eredményeket adta: össznitrogéntartalom 8,0—8,6%: a-aminonitrogén 6,4—6,6%. A szakaszos tenyészetből és az inokulumból leszár-5
