163922. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ehető proteinanyagok előállítására
5 163922 6 Táptalaj 2. oldat MnS04 -4H 2 0 FeS04 -7H 2 0 ZnS04 -7H 2 0 CoCl2 -6H 2 0 CuS<V5H2 0 Na2 MoO • 2H 2 0 15 percig 1,05 att (15 p. s. i. g.) nyomáson sterilezve 3. oldat Biotin Kolin Metionin Szűréssel külön sterilizálva. 0,0005 0,0005 0,0005 0,0001 0,0001 0,0001 20 Mg/l 2 mg/l 0 vagy 600 mg/l 0,10 vagy 0,1 vagy Valamennyi oldatot szükség szerint steril körülmények között vittük be a táptalaj tartályba, majd a literes kemosztátba, amelyben a növekedési feltételek a következők voltak: Hőmérséklet: 30 C°: levegőztetés: 1 térf./perc: keverés: 800 ford./perc, egyetlen, 6-lapátos tárcsás turbinás keverővel, 0,5 m átmérőjű, terelőkkel végig ellátott fermentorban. A fermentorban a pn értékét önműködő steril ammónia adagolással 5,0-n tartottuk. A 3. oldat összetételét különböző időkben változtattuk a különböző adalékok szükséges legnagyobb mennyiségének megállapítása céljából (például biotin önmagában vagy biotin plusz kolin). A növekedési sebesség 0,1-0,15 óra"1 volt. Az öt izolátum morfológiai jellemzői a következők voltak: Táptalaj Burgonya-Szaccharóz-Agar-agar Czapek-Dox-Agar-agar (Oxoid) 250 g mosott és kockára vágott burgonyát 15 percre 1,05 att nyomású (15 p. s. i.) gyorsfőzőedénybe helyeztünk. A főzetet ezután két réteg muszlinon nyomtuk át. A zavaros szűrlethez 2% szőlőcukrot és 2% agaragart adtunk, majd a táptalajt autoklávban sterileztük és szétosztottuk. Növekedési viszonyok: 25 C° A növekedés jellege: I—7-es izolátum táptalajon 30 C°-on három nap után 1,5 cm. A pelyhes, légmicélium mennyisége telepről telepre változó ugyan, azonban kevesebb mint az 1-8 variánsnál. Az idősebb tenyészetek esetében a 5 micélium barnásán elszíneződött. A hátoldalon a sárgásbarnától a szürkés rózsaszínig változó színű szektorok találhatók kismérvű pigment diffúzióval. I-8-as izolátum 10 Igen intenzív fehér, pelyhes légmicélium képződés. A telepátmérő itt is kisebb mint az A3/5 szülő-törzsnél, nevezetesen Czapek-Dox-agar táptalajon, 30 C°-on, három nap alatt 2,0 cm. A 15 hátoldalon a lazacvöröstől a szürkés rózsaszínűig terjedő színű szegmensek találhatók. I—9-es izolátum 2o Makroszkópos külalakja közel áll az I-8-as variánséhoz, a hátoldal azonban itt világosabb, színe a lazacvöröstől az üvegesen átlátszóig terjed. I—15-ös izolátum 25 Kis, korlátozott, kupola alakú telepek. A micélium rövid, összegabalyodott és hajlamos az összecsavarodásra. Sok sporodochium-szerű szerkezet képződik, amely a leoltás helyén rózsaszínű. A 30 kerületen rózsaszínű elszíneződés észlelhető. A telepátmérő 3 nap után, 30 C°-on és Czapek-Doxagar táptalajon mindössze 0,4 cm. l-l6-os izolátum 35 Az I—15-ös izolátum igen kevéssé állandó és abból folyamatosan az 1-16 keletkezik. Ez az izolátum külső megjelenésében hasonló az 1-7 izolátumhoz, habár telepeinek átmérője valamivel 40 nagyobb, nevezetesen 3 nap alatt 2,4 cm és ennél is több. Az l-l 6-os variáns állandóbb az I-15-ösnél. 45 Konidiumok I-7-es izolátum A makrokonidium képződés az A3/5 szülő-törzshöz hasonló módon bőséges. Az idősebb 50 tenyészetekben sporodochiumok keletkeznek. Az egyedi makrokonidiumok alakra és méretre hasonlóak az A3/5 szülő-törzs makrokonidiumaihoz. Méretük: 25-50 ßX3,0-5,0 ß. Idősebb tenyészetekben sok sporodochium képződik. A chlamydos-55 pórák ugyancsak bőségesen fordulnak elő ennek az izolátumnak a micéliumában, interkalárisan és a micélium végén. Ezek a spórák gömb alakúak és simák. Méretük 10-12 ju. Némelykor egy makrokonidium egyetlen sejtje chlamydospórát 60 alkot. I-8-as izolátum A telep morfológiája hasonló az A3/5 szülőtörzs telepének morfológiájához, kivéve, hogy a telepát- A makrokonodiumok száma kevesebb mint az mérő itt kisebb, nevezetesen a Czapek-Dox-agar 65 I-7-es variánsoknál és a jelenlevők is zömmel 3
