163484. lajstromszámú szabadalom • Eljárás imidazol-származékok előállítására
11 163484 12 elegy lassan elhalványul, 3 óra múlva már csaknem teljesen színtelen. A kivált terméket elkülönítjük, vízzel mossuk, majd vákuumban, foszforpentoxid felett szárítjuk. 10,40 g 4-karbetoxi-5-(3,3-dimetil-triazeno)-2--fenil-imidazol-monohidrátot kapunk, amelynek nedvességtartalma a foszforpentoxid felett történő szárítás során is csak igen lassan távolítható el. Az így kapott monohidrát-terméket infravörös spektroszkópiai úton összehasonlítottuk a megfelelő vízmentes vegyülettel. Nujolban az alábbi jellemző csúcsértékeket kaptuk (cm-1 -ben): (C=0) (triazén) vízmentes monohidrát 3250 1710 1650 1130 1080 1080 A termék olvadáspontját, valamint a magmágneses rezonancia-színképet a monohidráttá történt átalakulás nem befolyásolta. 53. példa A vegyületek farmakológiai vizsgálata. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek egéren tumorgátló hatást mutattak Rl lymphoma ellen. Az Rl lymphoma antimetabolita szerekre normálisan érzékeny. Az 1,5 x 106 tumor-sejt transzplantálása után az egerek általában 9—II nap alatt hullanak el az áttételeket képző tumor következtében. A vizsgálandó vegyületeket az alábbi táblázatban megadott adagokban (az egerek testsúlyára számítva), 10% acetont tartalmazó földidíó-olajban, intraperitoneális úton adtuk be az egereknek, a tumor-transzplantációt követő 3. naptól a 7. napig, naponta. A kísérlet értékeléseképpen mértük az egerek túlélési idejét a hatóanyaggal nem kezelt kontroli-állatokhoz viszonyítva: Vizsgált vegyület, Adag Túlélési idő átlagos példa sz. mg/kg növekedése %-ban Kontroll 0 . '39. 50 80 , . .33. 16 400 13. 32 300 •". V'.'. . .41, ., 128 50 47, 100 .40 19. 33 50 22. 128 150 24. 10 100 25. 33 200 »• •• 32. 128 170 29. 33 200 •.ti---- 48 " 32 170 metgtrexát (4-amino-iÓ-rnetíl-folsaY) •'. 2 100 54. példa A találmány szerinti eljárássla előállított vegyületek tumor-ellenes hatás-spektrumának szélességét szemléltetik az egereken, ADJ/PC6 plazmasejt-tumor elleni gátlóhatásra vonatkozólag lefolytatott kísérleteink eredményei. Ez a tumor a legtöbb alkilezőszerre érzékeny, azonban ritkán tapasztalható jó aktivitás e tumor és az Rl lymphoma ellen. Kísérleteinkben a tumor súlynövekedésének gátlási %-arányát a kezeletlen kontrollállatok hasonló adataival hasonlítottuk össze; az eredményeket az alábbi táblázatban adtuk meg. A táblázatban ugyancsak megadott terápiás index a 90%-os gátlás elérésére alkalmas adagnak (ID90) az állatok 50%-át megölő adaghoz (LD50 ) viszonyított arányát mutatja. Vizsgált vegyület LD„. ID.. Terápélda sz. ötszöri beadással, i. p. index 39. 240 mg/kg 16,0 mg/kg 15 13. 310 mg/kg 3,5 mg/kg 88 14. 200 mg/kg 20 mg/kg 10 metotrexát — inaktív — 55. példa A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek aktivitását vizsgáltuk Friend-leukémia ellen is. A Friend-30 leukémia vírusa tartós fertőzést okoz egereken és splenomegáliát (lépmegnagyobbodást) idéz elő. A 13. példa szerint előállított vegyület napi 250 mg/kg szubkután adagban, a fertőzés előtti napon, majd a fertőzés utáni 1., 2. és 3. napon beadva teljesen meggátolta a splenome-35 gália kialakulását. 56. példa A találmány szerint előállított új vegyületek általában M kevésbé toxikusak, mint az eddig ismert hasonló aktivitású szerek. így pl. a 13. példa szerint előállított vegyületet az ismert dimetil-triazeno-imidazol-karboxamiddal (D.I.C.) hasonlítottuk össze; mindkét vegyületet mind orálisan, mind intravénás úton adagoltuk kifejlett hím 4S és nőstény kopó-kutyáknak. A kísérlet kezdeti napján 20 mg/kg adagot, a 4. napon 45 mg/kg adagot, a 9. napon pedig egy végső 90 mg/kg adagot adtunk az állatoknak. A 13. példa szerinti vegyület ilyen adagolásban — akár orális, akár intravénás beadás esetén — cn semmilyen káros klinikai tünetet nem okozott, az állatok jó egészségi állapotot mutattak. A D.I.C. ugyanilyen adagjaival — bármelyik beadási móddal — kezelt állatokon a vérkeringésben a teljes fehérvérsejt-szám, valamint a thrombocyta-számigen erős csökkenést mutatott. ., A D.I.C. vegyülettel orális úton kezelt állatok egyikénél már a második adag beadása után meg kellett szüntetni a kezelést a toxikus tünetek miatt. A 13. példa szerint előállított új hatóanyaggal ugyanilyen adagolásban kezelt állatokon semmilyen hasonló toxikus tünet nem fí0 volt tapasztalható. 57. példa A találmány szerinti eljárással előállított új vegyületek baktériumellenes hatást is mutatnak. így a 13. példa 65 szerint előállított vegyület DST-agaron, 5% lizált lóvér 3
