163453. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-amino-3-metil-delta3-cefem-4-karbonsav előállítására
3 163453 4 Méret: 1,0— 1,2[JLX 1,5—2,0|x Alak: ovális Helyzet: centrális — paracentrális A sporangiumok enyhén duzzadnak II. Különböző táptalajokon észlelt növekedési jellemzők: (1) Húsleves-agar réteges ferde tenyészeten (30 °C, 24 óra): Jó növekedés, körkörös, konvex, nem szétterjedő, fehér-halványsárga színű, csillogó, puha, nedves, átlátszó növekmény. A közeg színe nem változik meg. (2) Húsleves-agar ferde tenyészeten (30 °C, 24 óra): Jó növekedés, sima felületű, nem szétterjedő, csillogó, nedves növekmény. Tejfehér, átlátszó telepek. A közeg színe nem változik. (3) Húsleves (30 °C, 2 nap): Jó növekedés, egyenletes zavarosodás üledékképződéssel; sejthártya nem észlelhető. (4) Húsleves-zselatin szúrt tenyészet (30 °C, 20 nap): Felületi növekedés a centrum felé a szúrás mentén. A zselatin nem folyósodik el. (5) Lakmusz tej (30 °C, 20 nap): Peptonizálás nem észlelhető; a lakmusz pigmentje redukálódik; a táptalaj folyadékfázisa sárgásbarnává válik. (6) Szójabab-agar ferde tenyészet (30 °C, 24 óra): Jó növekedés, fehér-sárgásfehér színű, sima felületű, puha növekmény. Jó spóraképződés. (7) Glükóz-nitrát-agar ferde tenyészet (30 °C, 3 nap): Csekély növekedés. (8) Tirozin-agar ferde tenyészet (30 °C, 3 nap): Jó növekedés; a táptalaj megbarnul. (9) Burgonya (30 °C, 5 nap): Jó növekedés; rózsaszín-barna telepek; sima felületű, nedves, konvex, csillogó növekmény; a táptalaj kb. a harmadik napon megbarnul. III. Fiziológiai sajátságok: (1) Optimális növekedési körülmények: Aerob, pH =7,0—8,0 értéken, 28—35 °C-on. (2) Növekedési körülmények: Aerob, pH = 5—10 értéken, 7—45 °C-on. (3) Savállóság: Csekély, pH = 5,0 érték alatt nincs növekedés. (4) Oxigénigény: Aerob; glükóz-húsleves táptalajon, anaerob körülmények között nem növekedik. (5) Nem termel indolt. (6) Hidrogénszulfidot termel. (7) Denitrifikálási reakció: nincs gázképződés. (8) A nitrátokat redukálja. (9) Kataláz-képzés: pozitív. {10) Ureáz-képzés: pozitív. (11) A keményítőt elhidrolizálja. (12) A citrátokat hasznosítja (Kóser és Christensenközegben). (13) A lakmusz pigmentjét redukálja. (14) A metilénkéket redukálja. (15) Burgonya táptalajon vízben oldódó pigmentet termel. IV. Szénhidrát-fermentáló képesség: Szénhidrát Savképződés Gázképződés Arabinóz Xilóz — — Glükóz + — Mannóz + — Fruktóz + — Galaktóz — • — Ribóz + — Ramnóz — — Maltóz + — Szacharóz — — Laktóz — — Trehalóz + — Raffinóz — — Cellobióz + — Szorbit — — Mannit + — Inozit — — Glicerin + — Glucit — — Szalicin — —. Inulin — — Keményítő + — A fenti mikrobiológiai sajátságokkal rendelkező 30 B—400 törzs rendszertani helyét a Bergey's Manual of Determinative Bacteriology (7. kiadás) szakkönyv alapján határoztuk meg. E meghatározás szerint a törzs a Bacillus megaterium nemzetségbe tartozik. A B—400 törzs mikrobiológiai jellemzőit ezért az American Type 35 Culture Collection gyűjteményben ATCC 14945 szám alatt letétbe helyezett Bacillus megaterium var. penicillalyticum törzs jellemzőivel hasonlítottuk össze. A két törzs mikrobiológiai szempontból nagymértékben hasonló egymáshoz, azonban a következő eltérések ész-40 lelhetők: Sajátság Bacillus megaterium B—400 Bacillus megaterium var. penicillalyticum ATCC 14945 Zselatin elfolyósítása Lakmusz tej Burgonya-agar ferde tenyészet Savképzés mannózból Kismértékű elfolyósodás A pigment redukálódik Vízben oldódó barna pigment képződik Sav képződik Fokozatos elfolyósodás A pigment lúgossá válik és nem redukálódik Nem képződik pigment Nem képződik sav A fentiek alapján megállapítottuk, hogy a B—400 jelű törzs a Bacillus megaterium nemzetségbe tartozó új törzs. A B—400 jelű FERM—P No. 748 szám alatt a Re-65 search Institute of Microorganism Industry, Agency of 2