163224. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7[D-(alfa-amino-alfa-fenil-acetamido)]-3[S-(1,2,3-triazol-5-IL)-tiometil]- EFF-3-EM-4-karbonsav előállítására
163224 10 gyítésével készítettünk. Az elegyet 45 percen át 0° hőmérsékleten tartjuk, majd 15 perc alatt sóval (kivéve nátriumklorid) telítjük. A szerves (felső) fázist elkülönítjük, és 40 ml vizet adunk hozzá, majd az elegyet csökkentett nyomáson, 20° hőmérsékleten 50 ml térfogatúra töményítjük. Ehhez az oldathoz 70 ml metilizobutilketon (MIBK) és 8 ml 90%-os hangyasav elegyét adjuk. Az elegyet összerázzuk, majd 0° hőmérsékleten, 3 órán át keverjük. Ezután elkülönítjük a vizes fázist és újabb 70 ml MIBK-t adva hozzá, 0° hőmérsékleten 30 percen át kevertetjük. A vizes fázist ismét elkülönítjük, majd csökkentett nyomáson, ,20° alatti hőmérsékleten közel szárazra pároljuk. A visszamaradó olajos terméket acetonitrillel kezeljük, amikor szilárd termékhez jutunk. Ezt szűréssel elkülönítjük, levegővel szárítjuk, majd csökkentett nyomáson, foszforpentjxiddal, 14 órán át szárítjuk. 2,45 g 7-(D-a-amino-a-f enilacetamido)-3- [S-(l y 2,3-triazol-5-il)-tiometil]-cef-3-em-4-karbonsavhoz jutunk. Az infravörös spektrum-analízis szerint ez szennyeződésként fenilglicint és a megfelelő II általános képletű kiindulási anyagot (lásd fent) tartalmazza. Ezeket eltávolítjuk oly módon, hogy a terméket 25 ml vízben oldjuk, az oldatot szűrjük, a szűrlet pH-ját 40%-os foszforsavval 1,5-re állítjuk, majd 1 g „Darko KB" aktív szenet (színtelenítés) adunk hozzá és 10 percen át kevertetjük. Ezután diatomaföldön („Dicalite") szűrjük az oldatot, és a szűrlet pH-j át szilárd nát-10 15 20 25 30 riumhidrogénkarbonáttal 3,5-re állítjuk. A világos, fehér színű oldatot 15 ml térfogatúra koncentráljuk, és a keletkező csapadékot szűréssel elkülönítjük, levegővel, majd foszforpentoxiddal csökkentett nyomáson szárítjuk. Az amorf, vízoldható termék, a 7-(D-a-amino-a~fenilacetamido)-3-[S-(l,2,3-triazol-5-il)-tiometil]-cef-3-em-4-karbonsav, súlya 500 mg, infravörös és mágneses rezonancia-spektruma megfelelő, jelentős mennyiségű szennyező anyagokat nem tartalmaz. Az elemanalízis szerint víztartalma 6,15% (Kari Fischer-módszer) és nátriumtartalma 1,61%. Megjegyezzük, hogy a benzamido-tiadiazol a IX egyenlet szerinti átalakítása 5-amino-l,2,3~ -tiadiazolon keresztül triazol-tiollá ismert eljárás [Goerdler és Gnad, Chem. Berg. 99, 1618 (1966)]. Az 5-amino-l,2,3-tiadiazolt a X egyenlet szerint diazometán nélkül állíthatjuk elő [Pain és Slack, J. Chem. Soc. 5166 (1965)]. A találmány szerinti eljárással előállított 7-[D-(a-amino-a-fenilacetamido)]-3-[S-(l,2,3-triazol-5-il)-tiometil]-cef-3-em-4-karbonsavval (új vegyület) 2 mg/ml-es vizes oldatot, majd megfelelő táptalajjal hígítási sort készítünk 37° hőmérsékleten, egy éjszakán át történő inkubáció után a felsorolt mikroorganizmusokkal szemben a következő ,t«g/ml-ben megadott legalacsonyabb növekedésgátló koncentrációkat határoztuk meg. Megadjuk a két ismert, orálisan adagolható cefalosporinnal végzett kísérlet eredményeit is. í. táblázat Mikroorganizmus Legalacsonyabb gátló koncentráció /«g/ml Űj vegyület Cefalexin Cefaloglicin Diplococcus pneumoniae A 9585 + 5% szérum+ Streptomyces pyogenes A 9604 + 5% szérum-[-Staphylococcus aureus Smith A 9637 S. aureus Smith A 9537 + 50% szérum S. aureus BX1633—2 A 9606 lO"3 hígítás S. aureus BX1633—2 A 9606 10~2 hígítás S. aureus A 15097 meticillin rezisztens Salmonella enteritidis A 9531 Escherichia coli Juhi A 15119 E. coli A 9675 Klebsiella pneumoniae A 9977 K. pneumoniae A 15130 Proteus mirabilis A 9900 Pr. morganii A 15153 Pseudomonas aeruginosa A 9(843 A Serratia marcescens A 20019 -f- 50% táptalaj + 45P/0 antibiotikumot tartalmazó táptalaj. Orális adagolás után meghatároztuk az egerek képletű vegyülettel a következő eredményeket vérének antibiotikumtartalmát. A XI általános kaptuk: 0,08 0,16 0,04 0,04 0,16 0,04 0,3 0,6 0,6 0,25 1,3 1,3 0,6 2 1,3 1 4 2,5 2 32 4 <0£5 2 0,3 0,5 8 1 2 16 4 <0,2 8 0,6 1 16 1 <0,2 8 0,6 16 >125 63 >125 >125 >125 125 >125 >125 A XI általános képletű vegyület Az antibiotikum koncentrációja Adagolás a vérben (,wg/ml) adagolás után mg/kg 0,5 1 2 3,5 órával ahol R a XII általános képletű gyök ahol R hidrogénatom (cefalexin-monohidrát) 100 6,6 100 4,1 5,47 2,8 2,1 100 49,9 100 3)3,2 18 5 1,73
