163157. lajstromszámú szabadalom • Eljárás egy polipeptid előállítására
163157 13 rázás után a reakcióikeveréket bepároljuk, és a maradékot etilacetátban felvesszük. Ecetsavval, majd ammóniával mossuk, nátriumszulfáton szárítjuk, és bepárolva a cím szerinti vegyületet 20 kapjuk 143° olvadásponttal; [a]D = +16° (c=l, dimetilformamidban). e) E peptidfragmens 30 g Trt-Ser-Ala-Tyr-Try-OMe-t 300 ml metanolban oldunk, és hozzáadunk 30 ml hidrazinhidrátot. Az oldatot 24 órán át 20°-on állni hagyjuk, majd bepároljuk. A maradékot dietiléterrel és vízzel kezeljük. Az így kapott E peptidfrag-20 mens 196°-on olvad; [a]D = +10° (c=l, dimetilformamidban). F 1 peptidfragmens: H-Thr-Cys(Bzl)-Val-Leu-OH a) H-Cys(Bzl)-Val-Leu-OMe . HBr 21,0 g Z-Cys(Bzl)-OCP-t és 12,3 g H-Val-Leu-OMe . HCl-t feloldunk 120 ml dimetilformamidban. Az oldathoz 5,9 ml trietilamint adunk, 16 óra, hosszat 25°-on állni hagyjuk, etilaoetátot adunk hozzá, híg sósavval mossuk, nátriumszulfáton szárítjuk, bepároljuk, és a száraz maradékot etilacetát és dietiléter elegyéből átkristályosítjuk, így Z-Cys(Bzl)-Val-Leu-OMe-t kapunk. 20 Olvadáspontja 160°; [«]D =—28° (c=l, dimetilformamidban). Ezt a vegyületet feloldjuk 210 ml 40%-os eoetsavas hidrogénbromid-oldatban. Az oldatot 1 óra hosszat 25°-on állni hagyjuk, bepároljuk, és a száraz maradékot izopropanol és dietiléter elegyéből átkristályosítjuk. A cím szerinti vegyületet kapjuk. Olvadáspontja 168°; 20 MD = +14° (c=l, dimetilformamidban). b) H-Thr-Cys(Bzl)-Val-Leu-OMe . l,3HBr 20 g Z-Thr-NHNH2 -t 350 ml dimetilformamidban oldunk, az oldatot —20°-ra hűtjük, hozzáadunk 100 ml 2 n dioxános hidrogénklorid-oldatot, majd 10 ml terc-Jbutilnitritet. Tíz perc múlva —20°-on hozzáadunk 45 ml trietilamint és 25,5 g H-Cys(Bzl)-Val-Leu-OMe. HBr-ot, és az így kapott keveréket 16 óra hosszat 0°-on rázzuk. Ezután bepároljuk, a száraz maradékot etilacetát és víz elegyében oldjuk, a szerves fázist híg sósavval mossuk, nátriumszulfáton szárítjuk, bepároljuk, és a maradékot etilacetátból átkristályosítjuk. Z-Thr-Cys(Bzl)-Val-Leu-OMe-t ka-20 punk. Olvadáspontja 208°. [a]D =_27° (c=l, dimietilformamidban). Az így kapott tetrapeptidV ből 20 g-ot feloldunk 200 ml 1:1 arányú trifluorecetsav-etilacetát elegyben, az oldatba 1 óra hosszat 0°-on gáznemű hidrogénbromidot vezetünk, utána az oldatot bepároljuk, és a maradékot metanol és dietiléter elegyéből átkristályo-14 25 sítjuk. A cím szerinti vegyületet kapjuk. Olva-20 dáspontja 202°; [a]D =—10° (c=l, dimetilformamidban). 5 c) FI peptidfragmens: 372 g H-Thr-Cys(Bzl)-Val-Leu-OMe.l,3HBr-t 1800 ml metanolban oldunk, hozzáadunk 900 ml M 2 n nátriumhidroxid-oldatot, 1 óra hosszat 25°on állni hagyjuk, hozzáadunk 240 ml jégecetet, és 2 óra hosszat 0°-on állni hagyjuk. A kivált kristályos tömeget szűrőre visszük, előbb n ecetsavval, majd vízzel mossuk, és 50°-on nagyvá-15 kuumban megszárítjuk. Az F 1 peptidfragmenst 20 kapjuk. Olvadáspontja 219°; [a]D =—53° (c=l, n ammóniaoldatban). 20 F 2 peptidfragmens: BOC-Cys(Bzl)-Ser-Asp(NH2 )-Leu-SeT-NHNH 2 a) H-Asp(NH2)-Leu-Ser-OMe. HCl 43 g H-Leu-Ser-OMe. HCl-t és 53 g BOC-Asp(NH2 )-ONP-t 400 ml dimetilformamidban oldunk, 22 ml trietilamint adunk hozzá, 16 óra hosszat 25°-on állni hagyjuk, szárazra pároljuk, és a maradékot metanolból átkristályosítjuk. 30 51,6 g BOC-Asp(NH 2 )-Leu-Ser-OMe-t kapunk. 20 Olvadáspontja 190°; HD =—24° (c=l, dimetilformamidban). Ezt a vegyületet 500 ml 4 n metanolos hidrogénklorid-oldatban oldjuk, az ol-35 datot 1 óra hosszat 25°-on állni hagyjuk, szárazra pároljuk, a maradékot metanolban oldjuk, és dietiléterrel kicsapjuk. A címben megnevezett 20 vegyületet kapjuk. Olvadáspontja 180°; [a]r-j = 40 = —23° (c=l, dimetilformamidban). b) H-Ser-Asp(NH2)-Leu-Ser-OMe . HCl 39,5 g BOC-Ser-NHNH2 -t 500 ml dimetilform-45 amidban oldunk, az oldatot —20°-ra hűtjük, és hozzáadunk 200 ml 2 n dioxános hidrogéniklorid-oldatot, majd 20 ml terc-butilnitritet. Tíz perc múlva —20°-on a reakciókeverékhez 40 ml trietilamint és 38,0 g H-Asp(NH2 )-Leu-Ser-OMe. HCl-t adunk, majd 16 óra hosszat 0°-on keverjük, szárazra pároljuk, és a maradékot kloroform és dietiléter elegyéből átkristályosítjuk. BOC-Ser-Asp(NH2 )-Leu-Ser-OMe-t kapunk. Ol-55 , 20 vadáspontja 135°; [>]D =—22° (c=l, dimetilformamidban). Ezt a terméket 420 ml 4 n metanolos hidrogénklorid-oldatban oldjuk, az oldatot 1 óra hosszat 25°-on állni hagyjuk, szárazra pároljuk, és a maradékot metanol és etilacetát elegyéből átkristályosítjuk. A cím szerinti vegyületet kapjuk. Olvadáspontja 155° (bomlik); r T20 65 L a J D =—15° (c=l, dimetilformamidban). 50 60
