163148. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az aminocsoportok megvédésére piridil-metoxikarbonil-csoporttal, főképp a peptidszintézis során
163148 b) 3 ízben 10 ml etanollal és c) 3 ízben 10 ml metilénkloriddal mossuk, minden hozzáadás után 3 percig keverve és centrifugálva. 6. Ezután hozzáadjuk sorban a védett aminocsoportot vagy aminocsoportokat tartalmazó aminosavat 10 ml metilénkloridban oldva, és 10 percig keverjük, majd diciklohexilkarbodiimidet 5 ml metilénkloridban oldva, és 17 percig keverjük, majd centrifugáljuk. 7. A kapott terméket sorban 10 10 a) 3 ízben 10 ml metilénkloriddal, és b) 3 ízben 10 ml etanollal mossuk, 3 percig keverve minden hozzáadás után és centrifugálva. Ezt a műveletsort megismételjük minden egyes aminosav kondenzálására. Az utolsó aminosav kondenzálása után (6. művelet) végrehajtjuk a 7a és 7b műveletet. összefoglalva minden egyes aminosav kondenzálására végrehajtunk a következő táblázatban felsorolt minden műveletet: vf tff Művelet Reagens 0J g C m CD fí Keveré perc Cél 1 ecetsav 3 10 3 mosás 2 n HCl ecetsavban 1 10 30 védőcsoportok eltávolítása 3a ecetsav 3 10 3 mosás 3b etanol 3 10 3 mosás 3c kloroform 3 10 3 mosás 4 CHCI3 + (C2 H 5 ) 3 N, 9:1 térfogatarány 1 10 20 közömbösítés 5a kloroform 3 10 3 mosás 5b etanol 3 10 3 mosás 5c metilénklorid 3 10 3 mosás 6a védett aminosav metilénkloridban 1 10 10 keverék 6b diciklohexil-karbodiimid metilénkloridban 1 5 17 óra kondenzáció 7a metilénklorid 3 10 3 mosás 7b etanol 3 10 3 mosás Minden művelet között centrifugálunk, kivéve a 6a és 6b jelűek közöttit. Minden műveletet kb. 20°-on hajtunk végre. N-terc-Butoxikarb(mil-gücil-Ny-3-piridü-metoxikarbonil-L-a,y-diaminobwtiril-NE --benziloxikarbonü-L-lizil-hidrazid Keverővel és a fenekén zsugorított üvegszűrővel ellátott reaktorba beviszünk 1,67 g a fent leírt módon készült és 0,25 mmól védett lizint tartalmazó Na -terc-butoxikarbonil-N £ -benziloxikarbonil-L-lizil-„polimer"-t. Az 1—5. műveletek végrehajtása után hozzáadunk a 18. példa szerint készült 413 mg Na -terc-butoxikarbonil-Nj, -3-piridil-metoxikarbonil-L-a,j'-diaminovajsav-acetátot 10 ml metilénkloridban oldva. 10 perc keverés után hozzáadunk 206 mg N,N'-diciklohexil-karbodiimidet 5 ml metilénkloridban 50 55 60 65 oldva. Végrehajtjuk a fent említett 6b műveletet, majd sorban a 7. és az 1—5. műveleteket. A 2. művelet során szelektíven eltávolítjuk az «,j'-diaminovajsav a-aminocsoportját védő terc-butoxikarbonil-csoportot anélkül, hogy érintenénk ugyanannak a savnak a r-aminocsoportját védő 3-piridil-metoxikarbonil-csoportot. Ekkor a reakciókeverékhez hozzáadjuk 175 mg N-terc-butoxikarbonil-glicinnek 10 ml metilénkloriddal készült oldatát. 10 percig keverjük, majd hozzáadjuk 206 mg N,N'-diciklohexil-karbodiimidnek 5 ml metilénkloriddal készült oldatát. Végrehajtjuk a fenti 6b műveletet, majd sorban a 7a és 7b műveleteket. Így N-terc-butoxikarbonil-glicil-Nj, -3-piridil-metiloxikarbonil-L-a,7-diaminobutiril-Nfi -benziloxikarbonil-L-lizil-„polimer"-t kapunk. Ezt a termieket 3 ízben 10 ml dimetiilíormamiddal mossuk, majd 20 ml 22% hidrazinhidrá-
