163148. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az aminocsoportok megvédésére piridil-metoxikarbonil-csoporttal, főképp a peptidszintézis során
163148 11 12 tot tartalmazó dimetilformamidban szuszpendáljuk. A reakciókeveréket 20 óra hosszat 20°-on keverjük. Megszűrjük, és 10 ml dimetilformamiddal mossuk. 0,3 torr nyomáson 50°-on szárazra pároljuk. így N-terc-butoxikarbonil-glicil-Nj, -S-piridil-metoxikarbonil-L-a^-diamino-butiril-N£ -benziloxikarbonil-L-lizil-hidrazidot kapunk. Rf = 0,61 (kovasavgélen, metanolban). Teljes hidrolízis után a Technicon automatikus elemzőkészülék a következő aminosavakat mutatja ki: Lys = 1,14 (elméleti 1), Dab = 1,0 (elméleti 1), Gly = 1,0 (elméleti 1). 11. példa 12 g kolisztinnek 900 ml dimetilformamiddal készült szuszpenziójához hozzáadunk 30 g vegyes (N-oxido-3-piridil-metil)-(p-nitrofenil)-karbonátot (készült az 5. példa szerint). 20°-on való 64 órai keverés után az oldhatatlan részt szűréssel elválasztjuk. A szüredéket 0,3 torr nyomáson 50°-on térfogata 2/3 részére koncentráljuk. A koncentrátumhoz 500 ml étert adunk. A különváló olajat elkülönítjük, és 500 ml metanolban oldjuk. A kapott oldathoz 500 ml étert adunk. Olaj válik ki, majd kikristályosodik. 20°-on való 15 órai állás után a kristályokat szűréssel elválasztjuk, 100 ml étenrel mossuk, és 0,3 torr nyomáson 20°-on megszárítjuk. így 16,8 g penta-N-(N-oxido-3-piridil-metoxikarbonil)-kolisztint kapunk. Rf = 0,32 (kovasavgélen, 50:20:6:24 térfogatarányú n-butanol-piridin-ecetsav-víz rendszerben). Összetétel: számított: N -> 0: 7,79%; talált: N-^O: 7,60%. 12. példa 3,51 g kolisztinnek 140 ml dimetilformamiddal készült oldatához hozzáadunk 16,5 g az 1. vagy 2. példa szerint készült vegyes (3-piridil-metil)-(p-nitrofenil)-karbonátot. 20°-on való 48 órai keverés után az oldhatatlan részt szűréssel elválasztjuk, és a szüredéket 0,3 torr nyomáson 55°on szárazra pároljuk. Az üveges maradékot feloldjuk 180 ml forró nitrometánban, a kevés oldhatatlan részt szűréssel eltávolítjuk. Ezután a szüredéket 2 1 / 2 óra hosszat 0°-on állni hagyjuk, majd a kivált csapadékot szűréssel elválasztjuk, 10 ml jéghideg nitrometánnal mossuk, és 0,3 torr nyomáson 50°-on 16 óra hosszat szárítjuk. Ily módon 3,85 g penta-N-(3-piridil-metoxikarbonil)-kolisztint kapunk. R{ = 0,74 (kovasavgélen, 50:20:6:24 térfogatarányú n-butanol-piridin-ecetsav-víz rendszerben). Összetétel: számított: C=57,28%; H=6,82%; N=15,94%; talált: C=57,70%; H=6,67%; N=15,78%. 13. példa 1,3 g penta-N-(3-piridil-metoxikarbonil)-kolisztinnek (készült a 11. példa szerint) 150 ml meta-5 nollal készült oldatához hozzáadunk 1,3 g p-nitroperoxibenzoesavat. A reakciókeveréket 20°on 16 óra hosszat keverjük, majd 20 torr nyomáson 50°-on szárazra pároljuk. A maradékot 3 ízben 20 ml acetonnal mossuk, majd 3 ízben 50°-on 10 20 ml acetonnal mossuk. 0,3 torr nyomáson 20°on megszárítva 959 mg penta-N-(N-oxido-3-piridil-metoxikarbonil)-kolisztint kapunk. A termék azonos a 11. példa termékével. Rf = 0,32 (kovasavgélen, 50:20:6:24 térfogatarányú n-butanol-piridih-ecetsav-víz rendszerben). 15 20 14. példa 1,169 g kolisztinnek 80 ml dimetilformamiddal készült szuszpenziójához hozzáadunk 2,1 g a 8. példa szerint készült vegyes (N-oxido-3-piridil-metil)-(2,4,5-triklórfenü)-karbonátot. 50°-on való 44 órai keverés után az oldhatatlan részt 25 szűréssel elválasztjuk. A szüredéket 0,3 torr nyomáson 60°-on szárazra pároljuk. Az olajos maradékhoz 60 ml étert adunk. A kikristályosodott terméket szűrőre visszük, 20 ml éterrel mossuk, és 0,3 torr nyomáson 20°-on megszárítjuk. Ily 30 módon 1,5 g penta-N-(N-oxido-3-piridil-metoxikarbonil)-kolisztint kapunk. Ez azonos a 11. és 13. példa termékével. R, = 0,32 (kovasavgélen, 50:20:6:24 térfogatarányú n-butanol-piridin-ecetsav-víz rendszerben). 35 Összetétel: számított: C=54,90%; H=6,54%; N=15,28%; talált: C=55,31%; H=6,8 %; N=14,90%. 40 15. példa 200 ml kolisztinnek 10 ml dimetilformamiddal készült szuszpenziójához hozzáadunk 400 mg a 6. 45 példa szerint készült vegyes (N-oxido-6-metil-2--piridil-metil)-(p-nitrofenil)-karbonátot. 20°-on való 48 órai keverés után az oldatot 0,3 torr nyomáson 50°-on bepároljuk. Az üvegszerű maradék 10 ml éter hozzáíadásárta kikristályosodik. A kris-50 tályokat szűrőre visszük, és 2 ízben 3 ml éterrel mossuk. 0,3 torr nyomáson 20°-on megszárítva 220 mg penta-N-[2-(N-oxido-6-metil-piridil)-metoxikarbonilj-kolisztint kapunk. Rf = 0,53 (kovasavgélen, 50:20:6:24 térfogatarányú n-butanol-piridin-ecetsav-víz rendszerben). 16. példa 60 150 mg glioint feloldunk 4 ml desztillált vízből, 6 ml terc-butanolból és 0,7 ml trietilaminból álló oldatban. Hozzáadunk 630 mg az 1. vagy 2. példa szerint készült vegyes (3-piridil-metil)-(p-nitrofenil)-karbonátot, és a reakciókeveréket 60°-on 65 2 óra hosszat keverjük. 20 torr nyomáson 55°-on
