163148. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az aminocsoportok megvédésére piridil-metoxikarbonil-csoporttal, főképp a peptidszintézis során
163148 8 metil-6-metil-piridin-N-oxidot kapunk. Olvadáspontja Kofler-blokkon 114°. összetétel: számított: N-+0: 11,5%; talált: N->0: 11,2%. 7. példa 1,25 g 4-hidroximetil-piridin-N-oxidnak 20 ml piridinnel készült 0°-ra hűtött oldatához hozzáadunk 2,02 g p-nitrofenil-klórhangyasavésztert. A hozzáadás befejeztével a reakciókeverék keverését kb. 20°-on 17 óra hosszat folytatjuk. A csapadékot szűréssel elválasztjuk, 2 ízben 4 ml piridinnel mossuk, és 0,3 torr nyomáson 20°-on megszárítjuk. Ily módon 0,67 g vegyes (N-oxido-4-piridil-metü)-(p-nitrofenil)-karbonátot kapunk, összetétel: számított: C=53,80%; talált: C=52,90%; H==3,47%; N=9,65%; N=6,98%. H=3,70%; A kiindulási anyag előállítására az 5. példában leírt módon járunk el, de 2,72 g 4-hidroximetil-piridinből és 5,49 g p-nitroperoxibenzoesavból kiindulva. Ily módon 1,74 g 4-hidroximetil-piridin-N-oxidot kapunk. Olvadáspontja Kofler-blokkon 125°. összetétel: számított: N -> O: talált: N-^O: 8. példa 12,8%; 13,0%. 5 g vegyes (3-piridil-metil)-(2,4,5-triklórfenil)-karbonátnak (készült a 4. példa szerint) 80 ml kloroformmal készült oldatához hozzáadunk 3,3 g p-nitroperoxibenzoesavat. 20°-on való 16 órai keverés után a kivált csapadékot szűrőre viszszük, 20 ml kloroformmal mossuk. Az egyesített szerves oldatokat 13 torr nyomáson 50°-on 50 ml-re koncentráljuk, a koncentrátumot 10 percig 15%-os nátriumkarbonát-oldattal keverjük, a vizes fázist elválasztjuk, 20 ml kloroformmal mossuk, a szerves fázisokat egyesítjük, és sor-6an 20 ml 15%-os vizes nátriumkarbonát-oldattal, 20 ml desztillált vízzel és 20 ml telített nátriumklorid-oldattal mossuk. A szerves oldatot nátriumszulfáton megszárítjuk, majd 13 torr nyomáson 50°-on szárazra pároljuk. Így 4,2 g vegyes (N-oxido-3-piridil-metil)-(2,4,5-triklórfenil)-karbonátot kapunk. Olvadáspontja Kofler-blokkon 169°. Metanolból átkristályosított mintája 171°-on olvad, összetétel: számított: C=44,79%; talált: C=44,9 %; H=2,31%; N=4,02%; Cl=30,51%; H=2,6 %; N=3,75%; Cl=30,6 %. 9. példa Az 1. vagy 2. példában leírt módon készült 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 15,1 g vegyes (3-piridil-metil)-(p-nitrofenil)-karbonátnak 400 ml kloroformmal készült oldatához hozzáadunk 12,1 g p-nitroperbenzoesavat. 20°-on való 16 órai keverés után a keletkezett csapadékot szűréssel elválasztjuk, és 2 ízben 100 ml kloroformmal mossuk. A szüredéket és a mosófolyadékot egyesítjük, és 17 torr nyomáson 30°-on szárazra pároljuk. A szilárd maradékot 600 ml éterben szuszpendáljuk, és a szuszpenziót 10 percig élénken keverjük. Az oldhatatlan részt szűréssel elválasztjuk, és ismét szuszpendáljuk 600 ml éterben. 10 perc keverés után az oldhatatlan részt szűréssel elválasztjuk, 100 ml éterrel mossuk, és 0,3 torr nyomáson 20°-on megszárítjuk. Ily módon 14,9 g vegyes (N-oxido-3--piridil-metil)-(p-nitrofenil)-karbonátot kapunk. Rf = 0,4 (kovasavgélen, 2:8 arányú metanol-1,2--diklóretán rendszerben). 10. példa 25 g Na -terc-butoxikarbonil-N g -benziloxikarbonil-L-lizinnek 250 ml etanollal készült oldatához hozzáadunk 9,2 ml trietilamint. Három percig 20°-on keverjük, majd 20 torr nyomáson 50°on szárazra pároljuk. A kapott olajat 220 ml etanolban oldjuk. Az oldathoz 150 g előzetesen klórmetilezett sztirol-divinilbenzol műgyantát adunk, amely grammonként 0,70 milliegyenérték klórt tartalmaz. A reakciókeveréket 48 óra hosszat 78°-on keverjük. A ipolimert szűrőre visszük, sorban 4 ízben 250 ml etanollal, 4 ízben 250 ml desztillált vízzel és 4 ízben .250 ml metanollal roqssuk, majd 0,3 tora- nyomáson 20°-on megszárítjuk. 161 g Na -terc-butoxikiarbonil-N £ -'-toenziloxikarbonil-L-lizü-ipolimert kapunk. A polimert N-lizin-lJartalimia 0,15 mmól/g. Két aminosavat, az Na -terc-butoxikarbonil_3-N7 -piridü-metoxikarbonil-L-a,y-diaminovajsavat és az N-terc-butoxikarbonil-glicint, egymás után kapcsolunk az Na -terc-butoxikarbonil-Ns -benziloxikarbonil-L-lizil-„polimer" első közbülső termékkel a következő műveletek végrehajtása útján: 1. A „védett aminosav-polimer" közbenső terméket 3 ízben 10—10 ml jégecettel mossuk. A sav hozzáadása után minden alkalommal 3 percig keverjük, majd centrifugáljuk. 2. Az aminosav a-aminocsoportjának védőcsoportját jégecettel készült 10 ml ecetsavas n hidrogénklorid-oldat hozzáadásával, 30 perc keveréssel és centrifugálással eltávolítjuk. 3. Az így kapott terméket sorban a) 3 ízben 10 ml jégecettel, b) 3 ízben 10 ml etanollal és c) 3 ízben 10 ml kloroformmal mossuk, minden hozzáadás után 3 percig keverve, majd centrifugálva. 4. A kapott terméket 10 ml 9:1 arányú kloroform-trietilamin eleggyel közömbösítjük, 20 percig keverjük, majd centrifugáljuk. 5. Az így kapott terméket sorban a) 3 ízben 10 ml kloroformmal,
