162830. lajstromszámú szabadalom • Eljárás (-)-(cisz-1,2-epoxipropil)-foszfonsav-amidok előállítására
7 mosunk, a gyantát metanolban szuszpendáljuk és a szuszpenziót 0 C°-ra hűtjük. A metanolos sóoldatot és a gyantaszuszpenziót egyesítjük, az elegyet 60 másodpercen keresztül erélyesen rázzuk, majd 2 ekvivalens piridint tartalmazó 20 5 ml metanolba szűrjük. A szűrés befejeztével az oldathoz fölös mennyiségű piridint adunk és az oldatot szárazra pároljuk. A maradékhoz piridint adunk, és a bepárlást még kétszer megismételjük. A piridines oldatot ezután jégfürdőn 10 0 C°-ra hűtjük, és 2 ekvivalens + 10% fölösleg tionilkloridot adunk hozzá keverés közben. A beadagolás után a jégfürdőt eltávolítjuk és az oldatot 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A di-savklorid piridines oldatát jégfürdőn is- 15 mét lehűtjük, és az oldathoz lassan 4 ekvivalens frissen desztillált morfolint adunk. A beadagolás után az elegyet 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Az elegyet szűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékhoz" toluolt adunk, 20 és a piridin nyomainak eltávolítása céljából a bepárlást többször megismételjük, majd a maradékot éterrel kezeljük. Körülbelül 10 g maradékot kapunk. A kapott maradékot 5X2 g-os részletekre osztjuk, és a reakciót mind az öt 25 részlettel megismételjük. Körülbelül 25 g nyers terméket kapunk, amelyet 750 g szilikagélen kromatografálunk. Eluálószerként 10% metanolt tartalmazó kloroformot használunk. 200 mg viszkózus, lassan kristályosodó olajat kapunk. 30 A kromatográfia során kapott elő- és utófrakciókat egyesítjük és bepároljuk, s ekkor újabb 50 mg terméket kapunk. Az egyesített 250 mg vöröses színű szilárd anyagot meleg éterrel kezeljük. Az éter lepárlása után halványsárga 35 szilárd termék formájában 230 mg (—)-(cisz-l,2--epoxipropil)-foszfonsavdimorfolidot kapunk, amelyet vékonyrétegkromatográfia és NMR spektrum alapján azonosítunk. 40 Vékonyrétegkromatogram: R/: 0,6 (10% CH3OH/CHCI3). NMR-spektrum (D2 0-ban): legerősebb sávok: 6,16 T 45 6,23 6,63 (morfolin, 6,72 —CH2 —) 6,78 6,87 50 8,28 T <C—CH3 ) 8,39 T 4. példa: 55 Metil-P-(—)-(cisz-l,2-epoxipropil)-N,N-dimetil-foszfonamidát 18,8 g (1 ekvivalens) nátriumhidrogénkarbo- 60 nátot tartalmazó 390 ml vízbe 62 g fenetilammőnium-(—)^(cisz-l,2-epoxipropil)-fosztfonátot mérünk be, és a kapott oldathoz keverés közben 76,16 g (2 ekvivalens) ezüstnitrát vizes oldatát csepegtetjük. A beadagolás után a kapott 65 8 Rázmán — 6457 — XI 27 elegyet 30 percig szobahőmérsékleten keverjük, majd szűrjük és a szűrletet vízzel, acetonnal és éterrel mossuk. A kapott 74 g di-ezüstsót 500 ml dimetoxietánban szuszpendáljuk és a szuszpenzióhoz 64 g (2 ekvivalens) metiljodidöt adunk. Az elegyet éjszakán át 50—60 C°-on keverjük, majd szűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A dimetilésztert tartalmazó 32 g maradékot 90 g szilikagélen kromatografáijuk, eluálószerként kloroformot alkalmazunk. A kromatográfia után kapott 18 g dimetilésztert 50 ml vízben oldjuk, és az oldathoz keverés közben, lassan 0,9 g ekvivalens 2,6 n nátriumhidroxid oldatot adunk. Az elegyet ' éjszakán át keverjük, majd szárazra pároljuk. A maradék 15,7 g félészter-félsót és 1,3 g diésztert tartalmaz. 3 g félészter-félsót 100 ml benzolban szuszpendálunk keverés közben, és a szuszpenziót jégfürdőn lehűtjük. A szuszpenzióhoz 1 ekvivalens + lOP/o fölösleg tionilkloridot adunk, és az adagolás után az elegyet 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Az elegyet ezután jégfürdőn hűtjük és az elegybe nagy fölöslegben vett dimetilamint buborékoltatunk. A beadagolás után az elegyet 1,5 órán át hűtés közben, majd 1,5 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd szűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A kapott 12 g halványsárga olajat 360 g szilikagélen kromatografáijuk és kloroformmal eluáljuk. A 7—14. frakciókat (2,2 g) egyesítjük és desztilláljuk. Halványsárga olaj alakjában metil-P-(—)-(cisz-l,2-epoxipropil)-N,N-dimetilfoszfonamidátot kapunk. Vékonyrétegkromatogram: R/: 0,7 (10% CH3OH/CHCI3). NMR-spektrum (D2 0-ban): legerősebb sávok: 6,20 T (-OCH3) 6,38 7,20 T (—NME2 ) 7,35 8,47 T (-C-CH3) -8,56 6—7,05 T (oxid—H) Az alábbiakban a kiindulási anyagként felhasznált (—)-(cisz-l,2-^poxipropil)-foszfonsav előállítását ismertetjük. A) 250 ml-es ledugaszolt Erlenmeyer-lombikban levő steril közeget liofilizált Streptomyces fradiae MA—2913 (ATCC 21099) tenyészettel oltunk be. A közeg összetétele a következő: g/liter őrölt zabliszt 10 Élesztőhidrolizátum 10 MgS04 -7H 2 0 0,05 Foszfátpuff er* 2 ml Víz q.s. végtérfogatig 4
