162704. lajstromszámú szabadalom • Eljárás rezisztens baktériumok ellen hatásos 3',4'-didezoxi-kanamicin-B előállítására
3 162704 4 <CHy„ csoportot (ahol n • 4, 5 vagy 6), I táblázat A 3,4'didezoxi-kanamicin-B és a kanamicin-B antibaktenális spektruma hidrogénatomot, acil-. alkil-. araikil-, aril-, alkil-, szulfonil-, aralkilszulfonil-, vagy arilszulfonil-csoportot képvisel. Az így előállított (III) vagy (Illa) általános képf-tű szárma7.ékot azután a megfelelő (IV) általános képletű vegyületté (ahol W - H) alakítjuk át. amelyben a 3' es 4 helyzetű hidroxilesoportok szabad állapotban vannak, majd ezt egy oly (IV) általános képletű származékká alakítjuk át. amely W helyén hidrogénatomot, alkilszulfonil-, aralkilszulfonil- vagy anlszulfoml-esoportot tartalmaz, míg R, R', Y és Z mind az előbb említett (IV) általános képletű vegyületekben, mind pedig ez utóbbiakban a (111) illetve (lila) általános képlet alatt megadottal egyező jelentésűek. Igy tehát a .V-és 4'-helyzetű hidroxilcsoporton szulfonilezett származékokhoz jutunk; ezeket azután valamely jodid-iont szolgáltató vegyülettel és egy redukáló hatású fémporral, pl einkporral kezeljük valamely erre alkalmas oldószerben, és igy a megfelelő, de a 3'.4"-helyzetben egy telítetlen kötést tartalmazó vegyülethez jutunk. Ezt a telítetlen kötést azután hidrogénezzük, majd az így kapott származékból a vedőcsoportokat lehasítjuk erre alkalmas ismert módszerekkel, és igy a kívánt végtermékhez, a .V.4'-didezoxi- kanamiem-B vegyülethez jutunk. Az ily módon szintetikusan előállított .V.4 -didezoxi-kanamiein-B gátolja számos különféle bakiérium -tor/s fejlődését, e gátló hatás mértéke hasonló nagyságrendű a kanamicin-B gátló hatásához (amint ezt az alábbi I. táblázal adatai mutatják), emellett ez a didezoxi-származék gátolja a kanamicin és kanamicm-B antibiotikumokkal szemben rezisztens Staphylococcus, Ksserichia coli és Pseudomonas aeruginosa törzsek fejlődését is. A 3',4'-didezo\>-kanamicm-B egéren, a Staphylococcus, Klebsiella pneumoniae. Salmonella uiphosa és Pseudomonas aeruginosa által okozott fertőzésekkel szemben jó terápiás hatást mutat, loxikussága csekély (LL>:0 egéren i. v. 180 mg/kg), az injekció utján történt beadás után rövid idővel magas vérszintet biztosít. így ez a származék igen értékes kemoterápiás szer sokféle gram-negatív és gram-pozitív baktériumok, beleértve a reziszlens törzseket is, fertőző hatásával szemben. A találmány szerint előállított 3',4'-didezo\i-kanamicin-B különféle patogén mikroorganizmusokkal szembeni gátló hatásának meghatározására vonatkozó kísérleteink eredményeit az alább) !. táblázatban foglaltuk össze; összehasonlításul megadtuk a kanamicin-B antibiotikumnak ugyanezen mikroorganizmusokkal szemben mutatott minimális gátló koncentrációját is. A táblázatban felsorolt kísérleti mikroorganizmusokat ágár-táptalajon. 37 C° hőmérsékleten tenyésztettük és az ágárlemezre oltott kultúrát a beoitás után 18 óra hosszat inkubáltaítuk 37 CJ hőmérsékleten. Az !. táblázat adataiból látható, hogy a találmány szerint előállított 3'.4'-didezoxi- kanamicin-B különféle patogén baktériumokkal szembeni gátló hatása általában eléri, de a legtöbb esetben messze felülmúlja a kanamicin-B ugyanilyen kísérleti körülmények között mutatott gátló hatását. Kísérleti mikroorganizmus tO 15 20 25 30 35 40 46 50 55 60 65 Minimális gátló koncentráció, mcg/ml 3,4'didezoxi-kanamictn- Kana-B micin- B 1. minta 2. minta Staphylococcus aureus FDA 209 P 1,25 0,78 0,78 Escherichia coli NIHJ 2,5 1,56 1,56 K-12 CS-2 2,5 1,56 0,78 K-12 ML 1629 2,5 1,56 •50 K-12 ML 1630 2,5 3,12 •50 K-1? ML 1410 1,56 0,78 Pseudomonas aei uyinosd A3 2,5 3,12 50 11. sz. 3,12 50 12. sz. 6.25 50 39. sz. 6.25 .50 45. sz. 1,25 0,78 25 67. sz. 6,25 ,50 Proteus rettgen GN 311 12,5 3,12 GM 466 2,5 3,12 1,56 A 3'.4- didezoM-kanamicin-B előállítását közelebbről az alábbi példák szemléltetik. Meg kell azonban jegyezni, hogy a találmány köre nincsen az alábbi példákban konkrétan ismertetett eljárásmódokra és eljárási körülményekre korlátozva, hanem az előállítási eljárásnak e találmány keretében számos különféle, a szakértő számára kézenfekvő változata is lehetséges. / példa Penta-N-etoxikarbonil- kanamicin-B előállítása 1,0 g kanamicin-B (szabad bázis) es 0,9 g vízmentes nátriumkarbonat elegyehez 1 ml víz es 1.20 ml aceton elegyében. keverés közben hozzáadunk 1,05 ml etoxikarbonil-kloridot, majd ezt az elegyet szobahőmérsékleten még 5 óra hosszat keverjük. A reakeióelegybcn képződött csapadékot szűréssel elkülönítjük, vízzel mossuk és megszárítjuk: ily módon 1,46 g penta- N-etoxikarbonil- kanamicin-B terméket kapunk szilárd alakban: ez a termék 305 ("-on bomlás közben olvad: lu|k~ " '88" (c ; 0,5. dimetiltormamidban). Penta-N- etoxikarbonilkanamicin-B előállítása (III) általános képlet, 2. példa 3'.4'; 4",f>" -di- O-izopropilidén-OC2 H 5 , X =Y=CH(CHa),,Z = H) 2
