162690. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tárgylemezes reakciók céljaira alkalmas, táolható, liofilizálás nélkül szárított antigén-antitest rendszereknek, mint kész szerolígiai diagnasztikumoknak az előállítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja 1969. V. 24. (VA-1309) Közzététel napja 1972. VII. 28. Megjelent 1975.11.10. 162690 Nemzetközi outéiyozii: G 01 n 33/16, A 61 b 10/00 dr. Valló Dezső orvos, dr. Perkedi János orvos, Merkly Istvánná asszisztensnő, Budapest. Eljárás tárgylemezes reakciók céljaira alkalmas, tárolható, liofilizálás nélkül szárított antigén-antitest rendszereknek, mint kész szerológiai diag— nosztikumoknak az előállítására 1 Ismeretesek ma már olyan antigén-antitest reakciókon alapuló szerológiai eljárások, amelyek lehetővé teszik különböző fehérjék, illetve normális vagy kóros antitestek kimutatását. Példaként említenénk a növekedési hormonnak (P. Weiser: Eine Methodik der Bestimmung hypophysärer Gona- 5 dotropine nittels Hammaglutinations-Hemmungsreaktion. Zbl. Gynak. 87. (1965). H. 46. S. 1569-1573); a terhesség alatt a vizeletben megjelenő choriongonadotrop hormonnak (Joyce L. Bell: Comparative study of immunological tests for pregnancy diagnosis. Journal of Clinical Pathology Volume 10 22, page 79, (1969)); bizonyos pajzsmirigy betegségek esetében a kóros ellenanyagoknak (Martti Oka, Pentti Seppala and Leena Mikkonen: Latex Slide Test in Thyroid Deseases. - Acta Medica Scandinavica. Vol. 179. fasc.2, (1966)); rheumás betegségekben a beteg vérsavójában lévő 15 kóros fehérjének (Singer, J.M., Plotz, Ch.M.: Am. J. Med. 21. 888, (1956), Tonder, O.: Studies on the mechanism of the Waaler- Rose test. Norwegian University Press, Bergen, Oslo 1962.); fertőzéses mirigy lázban a kóros ellenanyagnak (Beatrice Saemann-Naville: Mononucleose-Schnelltest. Objekttra- 20 ger- Agglutination formolisierter Pferdeerythrocyten. -Schweiz, med. Wschr. 96. Nr. 49, 1649-1651 (1960), Hoff. G. and Bauer S.: A New Rapid Slide Test for infectious Mononucleosis. J. Amer. med. Ass. JAMA 194, 351 (1965)) stb. szerológiai diagnosztikumokkal történő kimutatását. 25 A felsorolt eljárások egy részében a vizsgálatokhoz szükséges antigént illetve antitestet liofilizált birkavörösvértestekhez, más részében pedig műanyagokhoz pl. polistirollatex részecskékhez kötik. Az említett szerológiai eljárások sok esetben terjedelmes laboratóriumi felszerelés alkalmazását 30 teszik szükségessé, de az egyszerű módszereket is komplikálja az a tény, hogy kivitelezésükhöz nem csupán a vizsgálandó vérsavóra vagy vizeletre van szükség hanem a - liofilizált vagy folyékony állapotú konzervált reagensekre is. A reagensek feloldása, illetve kimérése a megfelelő tároló edényzetbó'l 35 körülményessé teszi az egyébként egyszerű módszereket, ezért kivitelük sok esetben laboratóriumi szakembert igényel. Találmányunk célja az ismert - vörösvértest, illetve latex agglutination alapuló - immunológiai módszerek felsorolt hátrányainak megszüntetése és olyan eljárás kidolgozása, amely lehetővé teszi a szükséges reagenseknek - vizsgálatra kész állapotban - a vizsgálati lemezre történő beszárítását. Ezzel a módszerrel egyrészt elérhető, hogy a különböző szerológiai diagnosztikai tesztekhez csupán a vizsgálandó vérsavóra vagy vizeletre van szükség, másrészt e szerológiai módszerek - eljárásunk alkalmazásával - rendkívüli módon egyszerűsíthetek. Kísérleteink során azt tapasztaltuk, hogy ha - az egyébként ismert módon - előkezelt birkavörösvértest vagy latex antigén és antitest komplexumokat valamely száradás után védőréteget képező vegyület híg merthiolat (o-(etilmerkuritio)-benzoésav-Na) oldatával elkeverjük és a keverék 1 cseppjét tárgylemezre cseppentjük, a kapott cseppet infravörös lámpa és ventillátor alkalmazásával 5 perc alatt beszárítjuk, úgy az aktivitás csökkenése nélkül is több - legalább 6 hónapig tárolható kész reagenshez jutunk. Beszáradás után a reagenseket védőréteg vonja be, amely a reagensek lepergését, leoldódását és bomlását meggátolja és így konzerválja. A védőréteget képező és merthiolatban oldódó vegyület az alábbiak valamelyike lehet: polivinilalkohol, zselatin, enyv, polivinilpirrolidon, karboximetilcellulóz, metilcellulóz, karbamid-formaldehid gyanta, melamin-formaldehid gyanta, polivinilmetiléter, kazein-formaldehid gyanta. Vizsgálati lap vagy tárgylemezként alkalmazhatunk nitrolakk vagy szilikonlakk réteggel bevont üveg-, tükör-, műanyag- vagy célszerűen vákuumban öntött, nagy tisztaságú, kis gáztartalmú, lágyított, nikkelezett, mágnesezett, alábbi összetételű fémlapot: C = 0,06% Si= 0,04% 162690