162690. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tárgylemezes reakciók céljaira alkalmas, táolható, liofilizálás nélkül szárított antigén-antitest rendszereknek, mint kész szerolígiai diagnasztikumoknak az előállítására

3 162690 4 P = 0,22% S = 0,02% Mn= 0,25% Cu= 0,03% Al= 0,03% Fe= 99,35% A tárgylemezeket lakk-bevonásuk után 24 órát szárítjuk és az antigén és antitest komplexumok polivinilalkoholos vagy más eló'bb említett keverékét csak ezután cseppentjük a lakkozott, szárított tárgy lemezfelületre. A találmány szerint előállított beszárított készítmény kiválóan alkalmas - a direkt és passzív haemagglutináción alapuló - diagnosztikai eljárások kivitelezésére, lemezen beszárított és hosszú ideig tárolható mikromennyiségek alkalmazásával, így a találmány szerinti eljárás - a diagnosztikai reagensek igen számottevő mértékű megtakarításának lehetővé tétele mellett - módot nyújt a reagenseknek az eddig ismerteknél lényegesen egyszerűbb, felhasználásra kész állapotra történő beszárítására, valamint laboratóriumi berendezés nélkül az orvosi rendelőben vagy a betegágy mellett minden eddiginél egyszerűbb és gyorsabb kivitelezésére. A teszt kivitelezése egyébként még azzal az előnnyel is jár, hogy a reakció (diagnosztikus • vérsavó vagy vizelet) lezajlása után a leolvasásra kész vizsgálati anyagon újból kialakul a védőréteg és ílymódon az eredmény a tárgylemezen rögzíthető és tárolható. A fentiek szerinti kezeléssel kapott kész reagenssel a diagnosztikai tesztet végzőnek nem kell egyebet tennie, mint rácseppenteni 1 csepp vizsgálandó anyagot, melynek víztartalma feloldja a védőréteget és lehetővé teszi a kívánt reakció lejátszódását. A találmány szerinti eljárást az alábbi példák szemléltetik, anélkül azonban, hogy szabadalmi igényünket az ezekben foglaltakra korlátoznánk: 1. példa: Thyreoidea-antigén szerológiai diagnosztikum előállítása. Az ismert módon előállított polistirol-latex részecskékhez kötött thyreoidea-antigénhez a szuszpenzió fele-mennyiségének megfelelő térfogatú polivinilalkohol oldatot adunk. Az alkalmazott polivinilalkohol koncentrációja 1:5000 hígítású merthiolátfiziológiás konyhasó oldatban 2,5%. Az így elkészített szuszpenzióból lakkozott fémlemezre 0,05 ml-t cseppentünk, majd a cseppet infravörös lámpa és ventillátor alatt beszárítjuk. A beszárítás alkalmával a cseppen - csakis megfelelő mennyiségű vízben oldódó - védőhártya képződik, amely a reagenst több, legalább 6 hónapig felhasználásra kész állapotban konzerválja. A vizsgálat kivitelezése: A találmány szerinti módon előállított polistirol-latex készítménnyel a pajzsmirigy-ellenanyag vizsgálat a következőképpen folytatódhat le: A lakkozott fémlemezen beszárított antigénre 0,05 ml vizsgálandó savót cseppentünk, amelynek hatására a reagenst bevonó polivinilalkohol réteg feloldódik. 30 mp várakozási idő után a cseppet elkeverjük. Elkeverés után a lemezt finoman döntögetjük és így az agglutinációs próba eredménye 5 perc múlva szokásosan értékelhető. 2. példa: Gammaglobulin-antigén szerológiai diagnosztikum előállítása. Az ismert módon előállított polistirol-latexhez kötött gammaglobulin-antigénhez a szuszpenzió fele mennyiségének megfelelő térfogatú polivinilalkohol oldatot mérünk. Az alkalmazott polivinilalkohol koncentrációja azonos az 1. példában megadottal. Az így elkészített szuszpenziót az 1. példában említett módon lakkozott fémlemezre cseppentjük és szárítjuk. A vizsgálat kivitelezése: A találmány szerinti módon előállított gammaglobulinantigén készítménnyel a rheumafaktor vizsgálata az 1. példában leírt módon történik, azzal a különbséggel, hogy a vizsgálandó vérsavót előzőleg pH8,2 borátpufferrel tízszeresére hígítjuk. 5 3. példa Gammaglobulin-antigén szerológiai diagnosztikum előállítása. ' 0 Az ismert módon előállított 3%-os formaldehidoldattal tartósított birkavörösvértestekhez kötött gammaglobulin-antigénhez a szuszpenzió fele-mennyiségének megfelelő térfogatú polivinilalkohol oldatot mérünk. Az alkalmazott polivinilalkohol, koncentrációja azonos az 1. példában megadottal. Az így elkészített szuszpenziót az 1. példában említett módon lakkozott fémlemezre cseppentjük és szántjuk. A vizsgálat kivitelezése: 20 . . . A találmány szerinti módon előállított gammaglobulin -antigén készítménnyel a rheumafaktor vizsgálata a 2. példában leírtak szerint történik. 4. példa: Choriongonadotrop hormon antigén és antitest szerológiai diagnosztikum előállítása. 3Q Az ismert módon előállított polistirol-latex részecskékhez kötött choriongonadotrop hormon antigénhez a szuszpenzió fele mennyiségének megfelelő térfogatú, az 1. példában megadott koncentrációjú polivinilalkohol oldatot mérünk. Az említett antigénnel egyidőben a fenti polivinilalkohol oldattal 35 anti-choriongonadotrop hormon ellenanyagot tartalmazó immunsavóból olyan hígítású oldatot készítünk, amelynek a reakcióban alkalmazott mennyiségét 2,5-3 E HCG/ml vizelet semlegesíti. Az előbbiek szerint előkészített antigén-szuszpenzió és 40 immunsavó oldat 0,05-0,05 ml-ét külön-külön, ugyanarra a lakkozott fémlemezre cseppentjük és az 1. példában megadott módon szárítjuk. A vizsgálat kivitelezése: A találmány szerinti módon előállított, többek között a 4g terhesség megállapítására szolgáló készítménnyel a terhesség vizsgálata a következő módon folytatható le: A lakkozott fémlemezen beszárított antigénre és immunsavóra 0,2-0,2 ml vizsgálandó vizeletet cseppentünk, amelynek hatására a reagenseket bevonó polivinilalkoholréteg 50 feloldódik. 30 mp várakozási idő után a cseppeket összekeverjük, majd további 4 percet várunk, ezen idő eltelte után a fémlemezt finoman döntögetjük és így az agglutinációs próba eredménye 1 perc múlva értékelhető. SB 5. példa: Choriongonadotrop hormon antigén és antitest szerológiai diagnosztikum előállítása. 60 Az ismert módon előállítót, 3%-os formalinoldattal tartósított birkavörösvértestekhez kötött choriongonadotrop antigénhez a szuszpenzió fele mennyiségének megfelelő, az 1. példában megadott koncentrációjú polivinilalkohol oldatot adunk. A továbbiakban a 4. példa szerint járunk el. gg A vizsgálat kivitelezése: A találmány szerinti módon előállított, többek között terhesség megállapítására szolgáló készítménnyel a terhesség vizsgálatát a 4. példa szerint végezzük. 70 6. példa: Antitesteket tartalmazó vércsoport-meghatározó savó szerológiai diagnosztikum előállítása. •75 _ 1;

64 titerű fajlagos antitesteket tartalmazó vércsoport 2