162027. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vérnyomáscsökkentő hatású vegyület előállítására

162027 spektrofotometriás módszerrel, vagy' a tirozinhidroxiláz működését gátló aktivitással mutatható ki. Az udenont, mint új vegyületet, a jelen találmány feltalálói fedezték fel. Az udenont 5 termelő oirg&nizmust először ugyanezek a feltalálók találták meg; Gumma kerületben Kirizumiyama-nál, tűlevelű fák alól gyűjtötték be. Ez egy gomba-szerű organizmus, melyet a feltalálók intézetében (Institute of Mic- 10 robial Chemistry, iShinagawa-lku, Tokió) tenyésztettek és ÍOF törzsnek jelöltek. A törzset a Chiba kerületben, a iKogyo Gijiutsuin Hakko Kenkyujo-mál' helyezték letétbe és 503 szám alatt az állandó gyűjteménybe sorolták. 15 Ez a gomba termőtestet képez, ha fűrészporos, táptalajon 27 °C-on termesztjük (10 g fűrészport, 60 ml 2,0% glükózt és 0,5P/0

száraz élesztőt tartalmazó tápoldattal keverve és 20 500 ml-es lombikba öntve 20 percen át 120 °C-on sterilizáljuk). ^Az így képződött tarmőtest-rész Collybia típusú. A gomba feje 4—11 cm átmérőjű,mely kezdetben domború, majd kinyílik és lapos lesz, imiközben a gomba-fej 25 középső irésze nyálkás és világosbarna vagy világos szürkés-barna. Sugárirányú vagy hálószerű erezet figyelhető meg. A .lamellák lazák, színük fehértől sárgásfehérig változó és a törzshöz közvetlenül kapcsolódnak. A törzs 30 belseje üreges és a spóra lenyomata fehér. Ha • a 10F jelzésű törzset az ismert gombákkal összehasonlítjuk, akkor a gombafajtának az Oudemansiella-val rvamnak közös tulaj donságai és az Oudemiansdella ismert három fajtája kö- 35 zül az Oudemansiella radicata-ihoz áll legközelebb. A gombákat termőtestük morfológiája alapján osztályozzuk, azonban nem teljesen bizonyos, hogy, a mesterséges . táptalajon termesz- 40 tett termőtest a természetben előforduló fajtákkal teljesen megegyezik. A ÍOF törzs fűrészporos táptalajon korái növekedési istádiurriában vizsgálva Pseudohiatula ohshiimaa-hoz {Hongo és MatSiUda) hasonlít. A gomba telje- 45 sen kifejlődött állapotban — mint ahogy azt már az előbbiekben írtuk — Oudemansiella radicata-nak (ATCC 20295) osztályozható. Ismeretes, hogy eltérő penészek és gombák mesterségesen termesztett 'anyagában gyakran 50 ugyanazt a vegyületet. találjuk. A jelen találmány oltalmi köre kiterjed a termesztett mikroorganizmus anyagában könnyen kimutatható udenon spektrofotometriás mtódiszerrel végzett meghatározására is. 55 A találmány oltalmi köne kiterjed továbbá az udenon elkülönítési és tisztítási eljárására is. Az udenon spektrofotometriás módszerrel végzett meghatározása alkalmas az extrakciós 60 és tisztítási műveletek hatásosságának megállapítására ds. lA találmány szerint az „udenont termelő törzs" kifejezés magában foglalja a ÍOF törzs minden variánsát és mutánsát. A találmány 65 kiterjed minden olyan organizmusra, mely udeudenont termel és amelyet a 10F törzstől, variánsaitól és mutánsaitól határozottan nem lehet megkülönböztetni. A találmány szerint az udenon az udenont termelő törzs aerob körülményeik között végzett termesztésével állítható elő. Az udenon előállítása történhet szilárd táptalajon végzett termesztéssel is, azonban nagyobb mennyiségű anyag ele Ulítására előnyösebb a folyékony közegben végzett termesztés. Például a 10F törzset 2,0% glükózt, 0,5% szárított élesztőt és 1,5% agárt tartalmazó ferdenagar táptalajon tenyésztjük i(melye't előzőleg 20 percein át 120 °C-on sterilizáltunk és a sterilizálás után a pH-t kb. 5,6-ra állítottuk be). A ferde-agáron képződött miicélium^teleppel beoltjuk azt a tápoldatot, melyben az udenon termelhető. A .beoltás másik hatásos módja: az udenont termelő törzset az előbbi módon fűrészporos táptalajon, 27 °C^on, 10—20 napon át tenyésztjük, majd a táptalajt — a micéliummal együtt — friss tápoldatban szuszpendáljuk :(pl. mély 2% glükózt és 0,15% szárított élesztőt tártai-. maz) és a szuszpenzióval azt a tápoldatot oltjuk be, melyben az ludenont termeljük. Lehetséges tehát rázákultúrával, vagy mélyen levegőztetett fermentációval kapott kultúrával beoltani egy olyan tápoldatot, melyben udenon termelhető. Az udenont termelő törzs 20—35 °C-on szaporítható, de az udenon termesztését előnyösebb 25—130 °lC-on végezni. Az udenont termelő törzs termesztésénél a mikroorganizmusok táptalajaként ismert anyagok használhatók fel. iSzénforrásként például glükóz, maltóz, dextrin, keményítő, lak-, tóz, szacharóz, glicerin vagy ecetsav alkalmazható. A 0,5% peptont, 0,3% iszárított élesztőt, 0,3%, kiálium-dihidrogénfoszfátot, 0,1% MgSC-4 • 7H2

0-t, 0A% nátriumikloridot tartalmá'zó tápoldathoz különböző szénfoirrásokat adva, rázókultúinával, 27 °C*on, 14 mapon keresztül, vizsgáltuk az udenon termelését.. Fűrészporos táptalajon, 14 napon át, 27 °C-on termesztett udenont termelő törzset olyan táptalajba szuszpendáltunk, mely .2% glükózt és 0,5%. szárított élesztőt tartalmaz. Ennek a szuszipenziónak 10—lö" miHláteróvel beoltunk több, 500 ml-es lombikba helyezett 120 ml tápoldatot. Tápoldatban az udenon termelése (mcg/ml) és a szaporodás a következő (bőséges növekedés.«—|—f—|—|-, közepes növekedés ++, gyenge növekedés +): glükóz: a hetedik napon 59 imcg/nil, a tizedik napon 300 mcg/iml és +•+'•+; maltóz: a hetedik napon 7 .mcg/ml, a tizedig napon kevesebb, mint 5 mcg/ml és + +; dextrin: a hetedik napon 12,5 mog/ml, a tizedik napon kevesebb, miint 5 meg/hú és + +; keményítő: a hetedik napon 5 mcg/ml, a tizedik napon kevesebb, mint 5 mcg/ml és '++•; laktóz: a hetedik napon 25 mcg/ml. a tizedik napon 100 mcg/ml és •+•;