161900. lajstromszámú szabadalom • Eljárás anti-alfa1-fetoglobulin tartalmú, elsődleges rákos májdaganat diagnosztizálására alkalmas szer előállítására
13 161900 14 Minta Eredmény hordozóval Sávszélesség, mm tartóközeges módszer Higítás szérum + 4,0 eredeti szérum szérum + 4,2 eredeti szérum szérum ++ 6,2 8 X szérum + 4,0 eredeti szérum szerűm szérum hasvíz hasvíz normális emberi szérum ++ +++ +4-7,3 6,0 12,3 7,5 0,0 8 X 8 X 8 X 8 X Az eredmények jelzése: — negatív, + enyhén pozitív, ++ pozitív, H—|—f- erősen pozitív. A következő példák szemléltetik a találmányt korlátozás szándéka nélkül. 1. példa: Tartóközeges diagnosztizálószer készítése Trisz-hidrokloridos puff érhez (7,2 pH) 1,5% tisztított immunológiai minőségű agart adunk, 10 és felmelegítjük az agar teljes feloldására, majd 55 °C -on tártjuk. Külön 0,35 rész normális emberi szérumot adunk 1 rész házinyúl antiszérumhoz,' beállítjuk 3 tf/tf % koncentrációra, és 3 a fent leírt módon készült agar tartóközeghez keverjük. Ezután Tween 80-at, patentkék színezéket és nátriumazidot adunk a keverékhez 0,001%, illetve 0,1% koncentrációig. Az adalékok elkeveredése után a rendszert előmelegített tartályba öntjük 1 mm vastagságban. Megdermedése után 3 mm átmérőjű lyukakat fúrunk előre meghatározott távolságban a megdermedt anyagba, és azt immunológiai agarlemezként alkalmazzuk. 15 2. példa: 8,2 pH-jú nátriumklorid-glicin puffert adunk 20 immunológiai tisztaságú agárhoz 1,0 s/tfl% koncentrációig, majd 50 °C-ra melegítjük. Külön lóantiszérumot adunk ugyanilyen pufferhoz 4 s/tf% mennyiségben, majd felmelegítjük 50 °C-ra. A két oldatot összekeverjük és nátrium-25 taurokolátot adunk hozzá 0,3%i végső koncentrációig. Azután triptánkéket és klórbutanolt adunk a rendszerhez 0,002%, illetve 0,3%i végső koncentrációig. Az adalékok elkeveredése után a rendszert edénybe öntjük. Megdermedése után 30 lyukakat fúrunk a megdermedt anyagba immunológiai agarlemez előállítására. Trisz- vagy aminosavpufferhez (6,5—8,5 pH) nátriumkloridot adva izotónikus oldatot állítunk 35 elő, és a következő táblázatban megadott anyagokat adjuk hozzá a kívánt végső koncentrációig : Példa Tartóanyag % Felületaktív anyag %, Színezék % Tartósítószer % 3. poliakrilamid gél 1,5 nátriumoleát 4. pektin 5. dextrin 1,3 alkiltrimetil-ammóniumbromid 0,05 1,5 polioxietilén-szorbitánmonolaurát 0,1 0,1 brillant zöld patentkék alciánkék 0,002 timol 0,1 0,001 fenilmerkuriacetát 0,02 0,003 nátriumnitrid 0,1 6. keményítő 7. agar 1,0 szaponin 0,03 tripánkék 1,2 nátriummirisztilbrillant kék Szulfát 0,15 nátriumetilmerkuritioszalicilát 0,001 fenilmerkuriborát 0,01 0,004 Thimerosál+ 0,01 8. példa: 60 méretű tisztított Amberlite IR45 műgyantát, majd hozzáadunk optimális mennyiségű anti-Hordozós diagnosztizálószer előállítása -«zi-fetoglobulin szérumot. A rendszert 4 °C-on 2 óra hosszat rázzuk, miközben az anti-<cri-feto-10 ml nátriumklorid-glicin pufferoldatban globuMn adszorbeálódik a hordozón, majd ceaitri(8,2 pH) diszpergálunk 1,5 g porított, 1—3 n 65 fugán elválasztjuk. Az anti-^-fetoglobulinnal 7
