161849. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A16886 antibiotikumok előállítására
161849 23 24 Spórás Streptomyces clavuligerus NRRL té-Spórás Streptomyces elavuMgerus NRRL 3585 tenyészetet állítunk elő az organizmust az alábbi Dextrin Élesztőextraktum Hidroüzált kazein („N—Z Amine-Type A", Sheffield Chemical Company) Marhahús-extraktum 1.0 2 10 Meer-agar (háromszor mosott) Ionmentesített víz A táptalaj pH-értékét nátriumhidroxiddal 7,0-re állítjuk be. 15 Az agaros csövet Streptonnyoes cliavuligeirus NRRL 3585 spórákkal oltjuk be és 4—6 napig 30 °C-on inkubáljuk. Az agaros lemezre steril desztillált vizet irétegezünik, és enyhén kaparva a spórákat és sejteket vizes szuszpenzióként 20 lemossuk. A kapott szuszpenzió egy ml-ével 100 ml, következő összetételű vegetatív táptalajt inokulálunk: 10",0 g 1,0 g 2,0 g 1,0 g 20,0 g 1 liter. Glükóz szójaliszt kukoricalekvár kalciumkarbonát nátriumklorid ionmentesített víz 15,00 15,00 5,00 2,00 5,00 1 liter. A vegetatív táptalaj pH-ját nátriumhidroxiddal 6,7 értékre állítjuk be. A vegetatív inokulumot 24—48 óráig 30c -on rázatjuk, reciprok rázógépen, 5,1 cm lökettel, percenként 108 fordulattal. Az így keletkezett inokulumot használtuk az A16886 antibiotikum következőkben leírt előállítására. A termelő táptalaj összetétele a következő: Szójaliszt IT Q r7^1 TI 15,00 g. 1 a nátriumnitrát glükózszirup (50% glükóz) csapvíz 1 g 3,00 g 20,00 g 1 liter. 11. példa: AÍ6886 antibiotikumot állítunk elő a 10. példában leírt módszerrel, csak a termelő táptalaj a következő összetételű: Distiller's Solubles (Nadrisol) 5,00 g szójaliszt (Nutrisoy 200D) 5,00 g földimogyoróliszt 5,00 g „black strap" melasz 5,00 g zabliszt '5,00 g glicerin 10,00 g csapvíz 1 liter és a forgó rázó helyett reciprok rázót használunk 108 percenkénti rázassál. 12. példa: A16886 antibiotikumot állítunk elő a 10. példa szerint, de a következő összetételű termelő táptalajjal: Zabliszt glicerin csapvíz 13. példa: 20,00 g 10,00 g 1 liter 25 30 35 40 45 A16886 antibiotikumot termelünk a 10. példa szerinti eljárással, de a következő összetételű termelő táptalajt használva: Gyapotmagliszt glicerin glükóz csapvíz 20,00 g 10,00 g 5,00 g 1 liter 14. példa: A 10. példa szerinti eljárással A16886 antibiotikumot állítunk elő, azzal a különbséggel, hogy a következő összetételű termelő táptalajt használjuk: A termelőtáptalajt 100 ml-ként 500 ml-es Erlenmeyer lombikokba öntjük és 120 °C-on 30 percig sterilezzük. Lehűlés után a lombikokat egyenként 5% vegetatív inokulummal oltjuk 50 be. A lombikokat 48—72 órán át 25—30 °C-on forgó rázógépen, percenként 250 fordulattal rá-" zatjuk. A fermentáció során a táptalajt steril levegővel 0,4 tf/tf/pérc mértékben levegőztetjük. Az izolálást lényegében az alábbi 18. pél- 53 dábán leírtak szerint végezzük. Glükóz 20,00 g oldható keményítő 10,00 g pepton (Wilson's) 30,00 g kazeinhidrolizátum („N-Z--amine-type A", gyártja Sheffield Chemical Company) 4,00 g magnéziumszulfát heptahidrát 5,00 g „black strap" melasz 5,00 g kalciumkarbonát 2,00 g csapvíz 1100 ml 15. példa: A16886 antibiotikumot állítunk elő a 10. példában leírt módszerrel, azonban a következő összetételű termelő táptalajban: 60 65 Glicerin szójaliszt kalciumnitrát nátriumklorid Nadrisol csapvíz 20,00 g 5,00 g 2,00 g 0,50 g 3,00 g 1 liter 12
