161475. lajstromszámú szabadalom • Eljárás bradikinin szintézisére
161475 NO, NO., Ari 1 Pro 2 Pro 3 Gly 4 Phe-Ser 5 6 Pro 7 Phe Arg' 8 9 BOC—OPCP H—ONB il I •OMe VI BOCIII -ONB Z—ONP H—OH XI XII BOC—OH H OMe BOC—OPCP VII IV H-ONB -OH BOCXIII VIII •OMe BOCONB Z—OPCP XV Z Z H OH XIV BOC . N.,H, HIX XVI XVII -OH BOC• OPCP H -X X' -ONB -ONB ONB -ONB XVIII <-H< HH + •OH XIX (A táblázatban használt rövidítések azonosak az A és B1 —B- képletekben már alkalmazott rövidítésekkel, továbbá OPCP = pentaklórfenoxi.) BOC-Phe-Arg(N02 )ONB (III) előállítása 35 Kalcium-kloridos-csővel ellátott 500 ml-es lombikban 17,1 g (35 mmól) Z-Arg(N02 )-ONB-t [I, R. A. Boissonnas et al.: Helv. Chim. Acta 43, 1349 (I960)] leöntünk 50 ml 4 N jégecetes brómhidrogénnel és 20 percig rázogatjuk. Ezután az 40 észter-hidrogén-bromidot kb. 200 ml éterrel kicsapjuk. A gyantaszerű csapadékról az étert dekantáljuk, majd kb. 100 ml vízben feloldjuk. A vizes oldatot 3x30 ml éterrel mossuk és ezután 10%-os nátrium-karbonát-oldattal lúgosítjuk 45 pH kb. 11). A kivált észter-bázis hűtésre, kapargatásra megszilárdul. A csapadékot szűrjük, 10%-os nátrium-karbonát-oldattal, vízzel mossuk és szárítjuk. 7,1 g (20 mmól) észter-bázist kapunk. Az anyagot feloldjuk 40 ml dimetilfor- 50 mamidban és egy keverővel, kalcium-kloridoscsővel ellátott 100 ml-es lombikba öntjük, majd hozzáadunk 10,3 g (20 mmól) BOC-Phe-OPCP-t (II) és 2,8 ml (20 mmól) trietilamint. A reakcióelegyet 12 óráig keverjük, majd az oldatot vá- 55 kuumban bepároljuk. A maradékot 100 ml etilacetátban oldjuk és mossuk 30 ml 1 N citromsav-oldattal, vízzel, 30 ml 0,25 mólos káliumkarbonát-oldat és 0,25 mólos kálium-bikarbonát-oldat 1:1 elegyével, s végül ismét vízzel. 60 Szárítás után (magnézium-szulfát) az etilacetátos oldatot vákuumban (fürdőhőmérséklet max. 40°) bepároljuk és a maradékot éterrel eldörzsöljük. 12 g (96%) védett dipeptidésztert kapunk. R2 0,9. BOC-Pro-OPCP (IV) előállítása Keverővel és kalcium-kloridos-csővel ellátott 100 ml-es lombikban 10,75 g (50 mmól) BOC-Pro-OH-t leöntünk 20 ml dimetilformamiddal, majd hozzáadunk 50 ml etilacetátot és 14,6 g (55 mmól) pentaklórfenolt, valamint 0°-ra való hűtés után 11,3 g (55 mmól) DCC-t. Egy órán át hűtés mellett, két órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd a kivált DCU-t kiszűrjük, alaposan mossuk etilacetáttal (4x10 ml), majd az etilacetát-oldatot vákuumban bepároljuk. A párlási maradékot 20 ml forró etanolból kristályosítjuk. 19,5 g (82%) aktív észtert kapunk. R; I,O. BOC-Pro-Phe-Arg(N02 )ONB (V) előállítása Kalcium-kloridos-csővel ellátott 100 ml-es lombikban 6,2 g (10 mmól) BOC-Phe-Arg(N02 )-ONB-t (III) leöntünk 25 ml trifluorecetsavval. Az anyag pezsgés és melegedés közben feloldódik. Tíz perc után (ha a pezsgés befejeződött!) a szabad peptid-sót kb. 50 ml éterrel kicsapjuk, szűrjük, 3x20 ml éterrel mossuk és vákuumban szárítjuk (kálium-hidroxid és foszfor-pentoxid, illetve kénsav mellett). A dipeptid-trifluoracetátot (R? 0,5) 10 ml dimetilformamidban feloldjuk egy keverővel és kalciumkloridos-csővel ellátott 100 ml-es lombikban. Hozzáadunk 6 g (13 mmól) BOC-Pro-OPCP-t (IV) és 1,54 ml (13 3
