161213. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pregnán- vagy androsztán sorbeli 3 béta-hidroxi-5,6-epoxiszteroidok mikrobiológiai átalakítására

161213 razra pároljuk. A maradékot kevés hideg hexánnal mossuk és megszárítjuk. 3,2 g 6a,13a~dihidroxi-3-oxo-13,17-szeko-l,4-androsztadién-17-sav laktont kapunk, amely metanolból átkristályosítva 297—299 °C-on olvad. £24

i=15 820. 5 2. példa Az 1. példa szerinti módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy Arthrobacter simplex helyett 10 Bacillus lentus liofilizált kultúráját használjuk, és a mikroorganizmusokat élesztőkivonat-kukoricalekvár-keményítőcukor tápoldat helyett 1,5% peptont, 1,2% kukoricalekvárt és 0,2% MgS04-ot tartalmazó, pH 7-re beállított vizes közegben 15 tenyésztjük. Az előfermentációhoz és a főfermentációhoz az 1. példában ismertetett összetételű tápoldatot használjuk. 6 A reakció 28 óra alatt végbemegy. A kapott 3.1 g nyersterméket metanolból átkristályosítva 2.2 g 6a,13ct-dihidroxi-5a,6ct-epoxi-13,17-szeko-l,4-androsztadién-17-sav laktonhoz jutunk, amely 293—295 °C-on olvad. A spektrumok összehasonlítása, valamint a keverék-olvadáspont alapján a termék azonos az 1. példa szerint előállított vegyülettel. 3. példa 5. példa 30 3,75 g 3/?-hidroxi-5a,6a-epoxi-androsztán-17--onból 80 ml dimetilformamiddal oldatot készítünk, és a vegyületet Bacillus lentus fajjal fermentáljuk a 2. példában leírthoz hasonló módon. 33 28 óra alatt a kiindulási vegyület teljesen átalakul. A kapott 3,4 g nyersterméket metanolból átkristályosítjuk. 2,4 g 6a-hidroxi-l,4~androsztadién-3,17-diont kapunk. Olvadáspontja 255—258 ""C. 6242=15100. 40 4. példa 2,7 g 3/?,15/?-dihidroxi-5a,6a-epoxi-16a-metil-pregnán-ll,20-diont 30 ml dimetilformamidban 45 oldunk és a 2. példában megadott körülmények között Bacillus lentus fajjal fermentáljuk, A kiindulási anyag 27 óra alatt átalakul. A reakcióelegy feldolgozása után 2,2 g Öajlöß-dihidroxi-16a-metil-l,4-pregnadién-3,ll,20-triont kapunk, 50 amely etilacetátból átkristályosítva 263—267 °C-on olvad. £239=14100. A termékből egy mintát piridin-ecetsavanhidrid keverékkel szobahőmérsékleten acetilezve a 55 megfelelő 6a,15/?-diacetátot kapjuk. Olvadáspontja: 202—204 °C. £235=14 800. 60 3,75 g 3/9-hidroxi-21-acetoxi-5a,6a-epoxi-16a-metil-pregnán-20-ont a 2. példában megadott körülmények között Bacillus lentus fajjal 27 órán át fermentálunk és a fermentlevet feldolgozzuk. Oszlopkromatográfiás úton és aceton- 65 -diizopropiléter elegyből történő átkristályosítással tisztítva 207—209 °C olvadáspontú 6a,21--dihidroxi-16a-metil-l ,4-pregnadién-3,20-diont kapunk. £241=15 400. 6. példa 3,0 g 3/?-hidroxi-21-acetoxi-5ct,6a-epoxi-preg-nán-20-ont a 2. példában megadott körülmények között 30 órán át fermentálunk 12 liter Bacillus lentus kultúrával, majd feldolgozzuk a fermentlevet. Oszlopkromatográfiával és aceton-diizopropiléter elegyből történő átkristályosítással tisztítva 187—189 °C olvadáspontú 6a,21--dihidroxi-l,4-pregnadién-3,20-diont kapunk. £243 = 15 700. 7. példa 20 3,75 g 3/?-hidroxi-5a,6a-epoxi-16-metil-pregnán-20-ont Bacillus lentus fajjal 28 órán át fermentálunk és a fermentlevet feldolgozzuk, az említett műveleteket a 2. példa szerinti módon végezve. Oszlopkromatográfiás és aceton-hexán 25 elegyből való átkristályosítás útján történő tisztítás után 178—180 °C olvadáspontú 6a-hidroxi-16ot-metil-l,4-pregnadién-3,20-diont kapunk. £241 = 14100. 8. példa 2 literes rázólombikba egyenként 500 ml tápoldatot és 125 mg 3/?,17a-dihidroxi-5ct,6a-epoxi-pregnán-20-ont töltünk be, és a 2. példában megadott körülmények között végezzük a fermentációt Bacillus lentus fajjal. Az átalakulás 30 óra alatt befejeződik. A szokásos feldolgozás és aceton-hexán elegyből történő átkristályosítás után 6a,17-dihidroxi-l,4-pregnadién-3,20--diont kapunk. e24i=l4 000. 9. példa 1,87 g 3/?,ll/?,21-trihidroxi-5a,6a-epoxi-pregnán-20-ont 15 liter Arthrobacter simplex kultúrával 20 órán át fermentálunk az 1. példában megadott körülmények között, majd feldolgozzuk a fermentlevet. A nyersterméket oszlopkromatográfiával és etilacetát-diizopropiléter elegyből történő átkristályosítással tisztítjuk. 210/211—212 °C olvadáspontú 6a,ll/?,21-trihidroxi-1,4-pregnadién-3,20-diont kapunk. £240=14 200. 10. példa Az 1. példa szerinti módon eljárva 1,87 g 3/J-ll/?,21-trihidroxi-5a,6a-epoxi-16ct-metil-pregnán-20-ont fermentálunk 15 liter Arthrobacter simplex kultúrával 27 órán át, azután feldolgozzuk a fermentlevet. A nyersterméket oszlopkromatográfiás úton különítjük el és tisztítjuk. 3