161211. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3 béta 11béta -dihidroxi-5 alfa 6alfa-epoxi-szterodiok előállítására

7 9. példa Az 1. példa szerinti módon 3,5 g 3^-hidroxi-5a,6a-epoxi-pregnán-20-ont 120 ml metilcelloszolvban oldva fermentálunk 7 liter tenyészol- 5 datban. 21 óra tenyésztési idő (9 óra érintkeztetési idő) után a kiindulási anyag 6%-a alakult át. Vékonyréteg-kromatográfia szerint a nyerstermék kb. 60% főtermékből(RF

:0,45)és3—5% mennyiségben két melléktermékből (RF

: 0,25, ill. 10 0,17) áll. A szokásos feldolgozás után kapott nyersterméket (2,18 g) etilacetát és metanol elegyéből átkristályosítjuk. így 890 mg 3^,11^-dihidroxi-5a,6cc-epoxi-pregnán-20-ont kapunk, 232—233 °C olvadásponttal; RF: 0,42. 15 10. példa Az 1. példa szerinti módon fermentáljuk 7,5 g 3/

ö,17

/

Ö-dihidroxi-5a,6a-epoxi-17a-metil-and- 20 rosztán 120 mg metilcelloszolvos oldatát 15 liter tenyészoldatban. 50 óra fermentációs idő (38 óra érintkeztetési idő) után a kiindulási anyagnak már csak 1%-a változatlan, és 50% mennyiségben 11^-hidroxi-vegyület (RF

: 0,27) 25 képződött. A szokásos feldolgozási móddal kapott nyersterméket (3,8 g) etilacetátból átkristályosítjuk. Ilyen módon 1,65 g 3ß,ll^Uß-trihidroxi-17a'metil-5a,6a-epoxi-androsztánt kapunk, 275/278—280 °C olvadásponttal; RF: 0,24. 30 11. példa Az 1. példa szerinti módon fermentáljuk 6,8 g 3/?,17/?-dihidroxi-5a,6a-epoxi-androsztán 120 ml 35 metilcelloszolvos oldatát 13,5 1 tápoldatban. 32 óra fermentációs idő (20 óra érintkeztetési idő) után a kiindulási anyag teljesen átalakult, és eközben kb. 60% ll/?-hidroxi-vegyület (RF

: 0,23) képződött. A szokásos feldolgozási módszerrel 40 kapott nyersterméket (6,2 g) metanolból átkristályosítjuk. Ilyen módon 1,9 g 3/?,ll/?,17/?-trihidroxi-5a,6a-epoxi-androsztánt kapunk, 223/ 225—228 °C olvadásponttal; RF

: 0,23. 45 12. példa Az 1. példa szerinti módon 7,5 g 3$,17ot-dihidroxi-5a,6a-epoxi-pregnán-20-ont 210 ml metilcelloszolvban oldva fermentálunk Curvularia 50 lunata 15 liter tenyészoldatában. 54 óra fermentációs idő (42 óra érintkeztetési idő) után a kiindulási anyagnak kb. 60%-a alakult át. Vékonyréteg-kromatográfiás elemzés szerint 60— 70% 11/9-hidroxi-vegyület (RF

: 0,3) képződött. 55 A szokásos feldolgozási módon kapott nyersterméket etilacetát és metanol elegyéből átkristályosítjuk. Ilyen módon 1,59 g 3,0,1 l/S,17eM:rihidroxi-5a,6ö-epoxi-pregnán-20-ont kapunk, 238/ 243—246 °C olvadásponttal; RF

: 0,35. 60 13. példa Az 1. példa szerinti módon fermentálunk 7,5 g 3/?-hidroxi-5a,6a,16a,17a-diepoxi-pregnán-20- 65 8 -ont 120 ml metilcelloszolvban oldva, 15 liter tápoldatban. 96 óra fermentációs idő (84 óra érintkeztetési idő) után a reakcióelegy már csak 12% átalakulatlan kiindulási anyagot tartalmaz. A szokásos módon végzett feldolgozás után kapott nyersterméket (5 g) szilíkagél-oszlopon kromatografáljuk és 1:1 arányú hexán:aceton elegygyel lineáris gradienssel eluáljuk. Ilyen módon Zß, 11 /?-dihidroxi-5ct,6a, 16a, 17«-diepoxi-pregnän-20-ont kapunk, 248/252—254 °C olvadásponttal; RF: 0,83. 14. példa Az 1. példa szerinti módon fermentálunk 4g 3^,17/

g-dihidroxi-5a,6a-epoxi-17a-acetil-androsztánt 130 ml metilcelloszolvban oldva, 8 liter tápoldatban. 38 óra eltelte után a kiindulási anyagnak csak nyomnyi mennyiségei maradnak átalakulatlanul. A szokásos módon végzett feldolgozással kapott nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk és 1:1 arányú aceton :hexán eleggyel eluáljuk. Az elkülönített nyersterméket (1,7 g) izopropiléter és aceton elegyéből átkristályosítjuk. Ilyen módon 1,3 g Zß,llß,llß-trihidroxi-5a,6a-epoxi-17a-acetil-androsztänt kapunk, 252—253 °C olvadásponttal; RF: 0,3. 15. példa Az 1. példa szerinti módon,fermentálunk 5g 3/?,20/?-díhidroxi-5a,6a-epoxi-pregnánt 100 ml metilcelloszolvban oldva, 10 liter tápoldatban. 22 óra fermentációs idő eltelte után a kiindulási anyag teljesen átalakult, és vékonyréteg-kromatográfiás elemzés szerint csak egy reakciótermék (RF

: 0,23) keletkezett. A szokásos feldolgozási módszerrel kapott nyersterméket szilikagél-oszlopon kromatografáljuk, és hexán és aceton 1:1 elegyével eluáljuk. Ilyen módon 3,2 g kristályos nyersterméket kapunk, amelyet izopropiléter és aceton elegyével átkristályosítunk. Az így kapott 2,7 g 3/?,ll/?,20/?-trihidroxi-5ct,-6a-epoxi-pregnán 234—236 °C-on olvad; RF

: 0,23. 16. példa Az 1. példa szerinti módon fermentálunk 5,0 g 3/?,21 -díhidroxi-5a,6a, 17 «,20a-diepoxi-pregnánt 100 ml metilcelloszlvban oldva, 10 liter tápoldatban. 27 óra hosszat tartó fermentálási idő (15 óra érintkeztetési idő) után a kiindulási anyag teljesen átalakult, és eközben mintegy 50% menynyiségben képződött egy olyan vegyület, amelynek RF

-értéke 0,33 (kloroform:metanol 9:1). A szokásos módon végzett feldolgozással kapott nyersterméket (2,6 g) metanol és etilacetát elegyéből átkristályosítjuk. Ilyen módon 1,48 g Zß,ll/?,21-trihidroxi-5a,6a,17a,20-diepoxi-pregnánt kapunk, 181—182 °C olvadásponttal; RF: 0,53. 4