160606. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 8-izo- prosztaglandin-F1-analógok előállítására

160606 21 22 adott jelentésű. A fentiekben leírt alkalmazási módok egyike-másika esetén előnyös, ha ezek a VIP. és IX'. általános képletű vegyületek szabad sav formájában vagy só formájában vannak, utóbbihoz a szabad savak, mint kiindulási anyagok szükségesek. Ezeket a VII'. és IX'. általános képletű észtereket nehéz hidrolizálni vagy elszappanosátani a sav nem kívánt szerkezeti változása nélkül. Három különféle módszer használatos a szabad sav formájában levő VII. és IX. általános képletű termékek előállítására. Ezen eljárások közül az egyik aszabad savaknak főleg a megfelelő alkilészterekből történő előállítására alkalmazható, ahol az alkilcsoport í—8 szénatomot tartalmaz. Ez az eljárás abból áll, hogy a VII'. vagy a IX'. általános képletnek megfelelő alkilésztert a III. törzs (Phylum) 2. osztályába (Subpihylum) tartozó valamilyen mikroorganizmus-fajta által produkált aciláz enzimrendszer hatásának tesszük ki, majd a savat elkülönítjük. Különösen előnyös speciesek (fajták) erre a célra a Mueorales, Hypocreales, Moniliaes és Actinomycetales rendhez tartozók. Ugyancsak 'különösen előnyösek erre a célra a Mucoraceae, Cunninghamellaceae. Nectreaceae, Moniliaceae, Demetiaoeae, Tuberculariaeeae, Actinomyeetaceae és Streptomycetaceae családihoz tartozó fajták. Különösen előnyösek mégtovábbá az Absidia, Circinella, Gongronella, Rhizopus, Cunninghamella, Calonectria, Aspergillus, Penicillium, Sporotrichum, Cladosporium, Fusarium, Nocardia és Streptomyces nemekbe tartozó fajták erre a célra. Az előnyösnek említett rendek, családok és nemek körébe tartozó mikroorganizmusokra példákat a 3 2-90 236 számú USA szabadalomban találunk. Ezt az enzimatikus észter-hidrolízist úgy valósítjuk meg, hogy a VII'. vagy IX'. általános képletű alkilésztert vizes szuszpenzióban valamelyik fentebb említett mikroorganizmus enzimtartalmú tenyészetével addig rázzuk, amig az észtert hidrolizálódik. Rendes körülmények között a 20—30 °C közötti reakcióshőmérséklet megfelelő. Rendszerint 1—20 óra reakcióidő elegendő ahhoz, hogy a kívánt hidrolízis végbemenjen. Többnyire kívánatos a reakcióelegynek levegőtől való elzárása, például argonnal vagy nitrogénnel. Az enzimet úgy kapjuk meg, hogy a tenyészetből a sejteket „levágjuk", ezt követően mossuk, majd újra szuszpendáljuk a sejteket vízben és azokat felaprítjuk például üveggyöngyökkel végzett keveréssel, vagy szónikus vagy ultraszónikus rezgésekkel A teljes vizes aprítási keveréket enzim-forrásként használjuk. Más módszer szerint előnyös módon centrifugálással vagy szűréssel eltávolítjuk a roncsolt sejteket. és a vizes szupernatáns folyadékot vagy a szűredéket használjuk. Bizonyos esetekben előnyös, ha a mikroorganizmus-kultúra tenyésztését valamilyen alifás sav alkilészterének jelenlétében végezzük — az említett sav 10—20 szénatomot tartalmazhat míg az alkilgyök 1—8 szénatomos lehet — vagy pedig a tenyészethez ilyen észtert adunk, és a tenyészetet további növekedés nélkül tartjuk 1—24 órán át a sejtek „levágása" előtt. Ezáltal a termelt enzim néha hatásosabb a VII'. vagy IX'. általános képletű észtemek szabad savvá történő átalakítására. Az erre a célra alkalmas alkilészterek közül példaképpen a metiloleátot említjük meg. Ez az enzimatikus hidrolízis általánosságban alkalmas a prosztaglandin-alkilésztereknek szabad savakká történő átalakítására; így nemcsak a VII'. és IX'. általános képletű alkilésztereknek megfelelő szabad savak előállítására (használható, hanem egyéb ismert prosztaglandin-alkilészterek és analógjainak átalakítására, pl. a VIII. általános képletű észterek, továbbá prosztaglandin-észterek, mint pl. PGE2, PGE3, PGA2, PGA3 és hasonlók átalakítására is megfelelő. Lásd: Bergstrom és szerzőtársai korábban említett közleményét és az abban idézett referátumokat, az ilyen enzimatikus eljárással hidrolizált más ismert prosztaglandin-alkilészterek tekintetében. Noha a VII'. és IX'. általános képlet alá tartozó észterek — ahogy azt az előbbiekben már említettük — nem lehet könnyen hidrolizálni vagy elszappanosítani a megfelelő VII. és IX. általános képletű szabad savakká, bizonyos észterek mégis átalakíthatók szabad savakká, más módszerek segítségével. Ezen észterek a halogénetilészterek, melyekben az Rt szubsztituens '//-helyzetben 3 klóratommal, 2 vagy 3 brómatommal, illetve 1, 2 vagy 3 jódatommal helyettesített etilgyök. Az ilyen észterekket, így például melyekben Rí —OH2—CC13

, fémcinkkel és egy 2—fi szénatomos alkánsawal — előnyösen ecetsavval — végzett kezeléssel alakítjuk át a szabad savakká. A cinknek előnyös fizikai formája a cinkpor. Amennyiben a halogénetilésztert kb. 25 °C-on néhány órán át keverjük a cinkporral, úgy ez rendesen a VII'. vagy IX'. általános képletű észter halogénetil-gyökének csaknek teljes mértékben hidrogénatommal való helyettesítését eredményezi. A szabad savat azután ismert módszerekkel elkülönítjük a reakcióelegyből. Visszatérve mármost újból az A reakcióábrára, ezeket a VII'. és IX'. általános képletű halogénetilésztereket a megfelelő XXVII. általános képletű bisz-szulfonsavészterekből állítjuk elő, ahol R7 '^-helyzetben 3 klóratommal, 2 vagy 3 brómatommal, illetve 1, 2 vagy 3 jódatommal — előnyösen 3 klóratommal — helyettesített etilgyök. Ezeket a reakciókat úgy végezzük, ahogy azt az előbbiekben már más XXVII. általános képletű vegyületeknek VII". általános képletű vegyületekké, illetőleg más XXVII. általános képletű vegyületeknek IX'. általános képletű vegyületekké történő átalakítására leírtuk. 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 II