160532. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szőlő és bogyós gyümölcsök léhozamának növelésére alkalmas poligalakturonáz enzimkészítmények előállítására
100532 6 Ezután a szűrt fermentlevet 4-es pH-értéken gyorsbepárlón 40—45 C°-on a kívánt mértékben besűrítjük, 0,1% benzoesawal tartósítjuk. Szilárd preparátum előállítása esetén a 80 liter fermentlevet +5 C° hőmérsékletre hűtjük, majd hozzáadjuk 250 ford/perc sebességgel kevert 240 liter metilalkoholhoz. A beadagolás után egy órával a keverőt leállítjuk és az oldatot 14 órán át +5 C° hőmérsékleten tartjuk. Az oldatból kivált enzimet keretes szűrőprésen leszűrjük és acetonnal szárítjuk. A nyert enzimpor menynyisóge 119,5 g, aktivitása (SPA?5 W ): 466—600 1/ kg, a kitermelés, a fermentlé össz-aktivitásához viszonyítva, 67%. Btilalkoholos kicsapás esetén a fenti ákvitású szűrt fermentléből SPA^W 909 900 aktivitással és 72,7%-os kitermeléssel nyerünk enzimport. Izopropilalkoholos kicsapás esetén a fenti aktivitású szűrt fermentléből SPA?5 bi : 716 000 aktivitású enzimport nyerünk a fermentlé össz-aktivitására számolva 57,4%-os kitermeléssel. 2. példa A 100 liter csapvízben elkészített tápközeget (kukoricaliszt hidrolizátum: 7%, ammóniumszulfát: 4%, káliumdihidrogénfoszfát: 0,2%, kukoricalekvár: 1%, pH: 3,5) 0,5 att nyomáson 50 percen át sterilizáljuk. A 28 C°-ra lehűtött táptalajt Aspergillus awamori gomba 24 órás vegetatív tenyészetével oltjuk be. A tenyészeten óránként 4200 liter levegőt áramoltatunk át. A készülékben levő nyomás 0,4— 0,5 att, a keverési sebesség 300 ford/perc. 72 órás tenyésztés után a micéliumot centrifugálással elválasztjuk a fermentlétől. A fermentlé poligalakturonáz-aktivitása SPA^01 : 5254 liter/ liter. A fermentlevet szűrőpréssel tükrösre szűrjük, pH-értékét 30%-os NaOH adagolásával 4,0-re beállítjuk és konzerválószerként hozzáadunk 0,1% nátriumbenzoátot. A folyékony készítmény 60-hetes szobahőmérsékletein történt tárolása után az aktivitásveszteség 11%. A szűrt fermentlevet az 1. példa szerinti módon dolgozzuk fel. 3. példa 1000 liter csapvízben elkészített tápközeget (szaharóz: 7%, amóniumszulfát: 4%, káliumdihidrogénfoszfát: 0,2%, kukoricalekvár: 1%, magnéziumszulfát 7H2 0: 0,3%, kobaltnitrát 6H 2 0: 0,005%, pH: 3,5) 0,5 att gőznyomáson 50 percig sterilizálunk. A 28 C°-ra lehűtött táptalajt Aspergillus awamori gomba 24 órás vegetatív tenyészetével oltjuk be. A tenyészeten óránként 60 m3 levegőt áramoltatunk át. A keverési sebesség 200 ford/perc, a készülékben levő nyomás 0,4 att. 72 órás tenyésztés után a mycéliumot centrifugálással elválasztjuk a fermentlétől. A szűrlet poligalakturonáz-aktivitása SPA^bl : 6760 liter/ liter. 5 A szűrőpréssel tükrösre szűrt fermentlé folyékony preparátumként alkalmazható a borászatban. A preparátum tárolhatóságának biztosítására pH-értékét 30% NaOH adagolásával 4,0 értékre 10 állítjuk be és konzerválószerként hozzáadunk 0,1% nátriumbenzoátot. A preparátum aktivitásvesztesége 40-hetes szobahőmérsékleten történt tárolás után 14%. A szűrt fermentlevet az 1. példa szerinti mó-15 don dolgozzuk fel. 4. példa 20 Az 1000 liter csapvízben elkészített tápközeget (keményítő: 7%, amóniumszulfát: 4%, káliumdihidrogénfoszfát: 0,2%, kukoricalekvár: 1%, magnéziumszulfát; 7 H2O: 0,3%, kóbaltnitrát; 6 H2 0: 0,005%, pH: 3,5/0,5 att gőznyomáson 25 50 percen át sterilizáljuk. A 28 C°-ra lehűtött táptalajt Aspergillus awamori gomba 24 órás vegetatív tenyészetével oltjuk be. A tenyészeten óránként 60 m3 levegőt áramol-30 tatunk át. A keverési sebesség 200 ford/perc, a készülékben levő nyomás 0,4 att. 72 órás tenyésztés után a micéliumot centrifugáiással elválasztjuk a fermentlétől. A szűrlet 35 poligalakturonáz-aktivitása SPA^ bi : 7,025 liter/ liter. A szűrőpréssel tükrösre szűrt fermentlé folyékony preparátumként alkalmazható a borászatban. 4Q A preparátum tartósítását, valamint további feldolgozását az 1. példa szerinti módon végezzük. 45 5. példa Az 1000 liter csapvízben elkészített tápközeget (kukorcialiszt hidrolizátum: 7%, ammóniumszulfát: 4%, káliumdihidrogénfoszfát: 0,2%, kukoricalekvár: 1%, magnéziumszulfát 7 H2 0: 0,3%, 50 kóbaltnitrát 6 H 2 0: 0,005%, pH: 3,5) 0,5 att gőznyomáson 50 percen át sterilizáljuk. A 28 C°-ra lehűtött táptalajt Aspergillus awamori gomba 24 órás vegetatív /tenyészetével oltjuk be. 55 A tenyészeten óránként 60 m 3 levegőt áramoltatunk át. A keverési sebesség 200 ford/perc, a készülékben levő nyomás 0,4 att. 72 órás tenyésztés után a micéliumot centrifugálással elválasztjuk a fermentlétől. A szűrlet 60 poligalakturonáz-aktivitása SPAra bi : 8,100 liter/ liter. A szűrőpréssel tükrösre szűrt fermentlé folyékony preparátumként alkalmazható a borászat-05 ban. 3
