160258. lajstromszámú szabadalom • Eljárás alfa-guanidinotenilpenicillinek előállítására
7 A pH-rt visszaállítjuk 6 értékre 6-n sósavval és kb. 3°-ria hűtjük jégfürdőn egy órán át. A terméket ezután leszűrjük, háromszor 50 ml jeges vízzel és háromszor 100 ml acetonnal mossuk és levegőn szárítjuk. A termelés 20 g, 215°-on bomlik. [a]29° =+180° (c=l%, 1-n. HCl) zavaros oldat). A fenti anyag 16 g-ját átkristályosítjuk 200 ml vízben szuszpendálva és keverés közben 40 %-os H3 P04-et adva hozzá, míg oldat keletikezik (ikb. 60 ml). A keletkezett, enyhén zavaros oldatot 5 g aktívszénnel 5 percig keverjük és .,dicalite"-on .szűrjük keresztül szívás közben. Háromszoir 25 ml vízzel mossuk és a mosólevetoet egyesítjük a szűrletitel. A sárga oldalt pH-jáít 6-ra állítjuk be szilárd NaHCÓ3 -tal (pH 3-ra) és 20%-os NaOH-dal (pH 6-ra). A termieket kdkristályosítjuk jégfürdőn 90 percig. A penicillint ezután leszűrjük, háromszor 50 ml jeges vízzel és háromszor 100 ml acetonnal mossuk és levegőn szárítjuk. A terméket tovább szárítjuk vákuumban P2O5 felett 10 órán át. A termelés 11,5 g, a termék 217°-on bomlik, kb. 200°-on sötételve. i[a]22 D = +204° (C = = 1%, 0,1—n. HCl) (99,71 mg 10 ml vízben). 3. példa: A. D(—)-a-guanidino^-3^tienilaicetilklorid-jhidiroíklordd 7,27 g (0,0224 mól) D(—)-a-,guanidiino-3-tiemilecetsav-hidroklorid (dioxán szolvát) 200 mlszáraz metilénkloridiois kevert szuszpenziójához ke^ verés közben 5,14 g (0,0247 mól) foszfoirpentakloridot adunk. Az elegyet 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük és a savkloridot szűréssel elválasztjuk, metilénkloriddal moissük és levegőn szárítjuk. A termelés 5,26 g (92%), az infraspektrum (Nujol mull) 1790 cm-1 -nél karbanil abszorpciót mutat. B. 6-[D(—)-a-Hguanidino-3-itieniÍ!laeetamido]-penicillánsav 4,48 g (0,0207 mól) 6-aminopenieillánsav 50 ml vizes oldatához (pH 7,2) 300 ml acetont adunk. A keletkezett keveréket —10°-ra hűtjük, és a pH-t 6—n. sósavval 3 értékre állítjuk be. Összesen 5,26 g (0,0207 mól) fentiekben leírt savkloridot adunk hozzá részletemként keverés közben olyan mértékbein, hogy a hőmérsékletet —10 és 0° (között tartsuk GS 'CL pH-t 10 %-os mátriumhidroxidoldat hozzáadásával 2,5 és 3,2 között tartjuk. Miután a hozzáadás befejeződött, az elegyet 0°-on 20 percig pH = 3 érteiken, majd 10 percig pH = 2,5 értéken, és végül 10 percig 500 ml metilizobutilketonnal keverjük. A fázisokat szétválasztjuk és a szerves fázi»t 25 ml vízzel mossuk. A vizes fázisokat egyesítjük és a pH-t 5,6-ca állítjuk, be, ahol zselatinszerű szilárd anyag válik ki. Ezt szűréssel elválasztjuk és a gélt aoetoin-2-propanol 8 eleggyel triturálva szilárdítjuk. A szilárd anyagot 40 ml vízzel feliszapoljuk, melynek pH-ját 40%-os foszforsawal 1,0-re állítattuk be. Az oldhatatlan anyag egy részét leszűrjük, ós a 5 szűrlelt pH-ját 5,8-ra állítjuk be 10%-os nátriumhidroxid oldattal. A kicsapódott kristályos penicillint szűréssel elválasztjuk, vízzel és acetonnal mossuk és vákuumban szárítjuk. Termelés 0,44 g. A szűrletet kis térfogatra bepárol-10 va további 1,72 g, az előző termékkel azonos (infra spektrum) termék keletkezik. Az infra (KBr szűrő) és NMR spektrum teljesen megegyezik a szerkezettel. Op.: 225—227° (bomlás közben); [a]22D = +187.4° (C = 1,0%, 0,1—-n. i5 HCl). Analízis C15 H 19 N 5 04S 2 Számított: C: 45,36% H: 4,83% N: 17,64%, Talált: C: 45,16% H: 5,11%, N: 17,61% In vitiro aktivitás A D(—)-a-guanidmo-2-tienilpenicillii,n (az alábbiakban „2—Cpd"), D(—)-a-guanidino-3-^tenilpeniciliiin (az alábbialkban „3—Cpd") és aHaminoibenzilpenicillin (az alábbiakban „Ampi") minimális gátló koncentrációját (M.I.C. mcg/ml) határoztuk meg 24 órás 37°-o,n történő inkubációval Nutrient agar lemezeiken. Mind a három vegyület M.I.C. értéke azonos nagyságrendű volt, azaz kb. ± 100% eltérésem belül, számos Grarn-pozitív és Gram-negatív organizmusira, így benzilpemicilluHérziékeny Staph, aureusra, Straip. pyogenese-re, D. pneumoniae-re, Pr. mirabilis-ra, Sh. somnei-re, Sal. enteritidis-re, Sal. typhosa-ra; a, M.I.C. érték minden esetben kisebb volt 1,0 mog/ml-nél, ami azért jelentős, mert rendes körülményeik között az ember véráramaiban a legmagasabb elérhető koncentráció 10 mcg/ml. Azonban az első két vegyületnek jelentősen kisebb M.I.C.mértékei voltak, mint az amipicillinnefc, a benzilpenicillin-reziszltens Staph, aureus-sal és bizonyos Gram-jnegatív organizmus okkal szembein, amelyeket a következő táblázat szemléltet: Bristol.— M.I.C. meg/ml-ben Törzs Myers ,,2— „3— ..Am-50 torz siszáma Cpd" Cpd" pi" Benzil-penicillin rezisztens 55 (azaz penicillináz termelő) Staph, aureus AI 5034 2 2 63 Staph, aureus AI 5092 2 2 63 6t) Staph, aureus A15094 2 2 63 Staph, aureus BX—-1633—2 A9606 0,06 0,3 2 Ser. 65 maroetnisoenis A20019 63 32 250 4
