160173. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pasztillázott analitikai és immunológiai reagensek előállítására

160173 kező reagens-előállítási módot javasolja: az egymással adott esetben inkompatibilis reagenseket nedvesség jelenlétében érintkezésbe hozzák egymással, megfelelő tárolóban rétegesen fagyasztják, majd a fagyasztott rétegeket fagyaszt- 5 va szárítják. Ez az eljárás azonban speciális berendezést és kezelőszemélyzetet igényel, végrehajtása pedig időtrabló és költséges. A találmány tárgya meghatározott mennyisé- K, gű reagenst tartalmazó, szilárd, stabil, pasztillázott analitikai reagens-kompozíció. A pasztillák előállítása során a reagens vizes oldatának vagy szuszpenziójának cseppjeit fagyasztjuk, majd fagyasztva szárítjuk. 15 A találmány szerint továbbá meghatározott, pontosan ^lemért mennyiségű reagenst tartalmazó, szemcsés vagy gömb alakú új, száraz, szilárd, stabil pasztillázott analitikai, diagnosztikai és immunológiai reagenseket állítunk elő. An- 20 nak ellenére, hogy a pasztillákban levő reagensek reakcióképesek, és esetleg kölcsönösen inkompatibilisak, a pasztillák maguk stabilak, és többféle reagens-pasztilla tárolható egy közös tartályban hosszú ideig anélkül, hogy köztük 25 bármilyen reakció menne végbe. A pasztillákban levő reagensek azonban könnyen felszabadulnak, amint a vizsgálandó folyadékkal érintkeznek, és így analitikai, immunológiai vagy diagnosztikai vizsgálatokra alkalmassá válnak. 30 A pasztillázott reagensek összetételét, előállítását és alkalmazását az emberi chorionikus gonadotropin (HCG) vizeletből történő kimutatásával kapcsolatban ismertetjük. Ezt a vizsgála- 35 tot a terhesség megállapítására alkalmazzák. Szakember számára nyilvánvaló, hogy a találmány oltalmi körét nem korlátozzuk az előbb említett esetre, hanem a találmány oltalmi köre számos egyéb pasztillázott analitikai, immunoló- 40 giai és diagnosztikai reagensekre is kiterjed. A találmány szerinti reagenseket olyan vizsgálatokban is alkalmazhatjuk, amelyek egynél több reagenst igényelnek. A találmány szerinti eljárással továbbá segédanyagokat, pl. pufferanya- 45 gokat is pasztillázhatunk, és a kapott szilárd, stabil pasztillákat a pasztillázott diagnosztikai reagensekkel együtt használhatjuk fel. A pasztillázott reagenseket a találmány szerint 5(j a következő lépés-sorozattal állítjuk elő: a) Meghatározott mennyiségű reagenst tartalmazó, meghatározott koncentrációjú vizes oldatot vagy szuszpenziót állítunk elő. b) Az oldatot vagy szuszpenziót pontosan lemért vagy kalibrált, szabadon eső cseppekre oszlatjuk. 55 60 c) A cseppeket vízzel nem elegyedő, a víznél kisebb sűrűségű folyadékot tartalmazó oszlopon bocsátjuk át. Az oszlop tetején uralkodó hőmérséklet szobahőmérséklet körüli érték, míg az oszlop alsó részében a kifagyasztandó folyadék gs fagyáspontjánál alacsonyabb hőmérséklet uralkodik. A cseppek az oszlopon áthaladva fagyott saemcsékké alakulnak. d) A folyadékoszlop alján összegyűjtjük a meghatározott mennyiségű reagenst tartalmazó, fagyott szemcséket. d) Az összegyűjtött fagyott szemcséket fagyasztva szárítjuk. Az előállítási eljárást az 1. ábrán folyamatábra-iszerűen ismertetjük. Az 1. ábrán a reagenst tartalmazó cseppek előállítását és azok fagyasztását tüntettük fel. A következőkben az eljárást az 1. ábrán feltüntetett számozás segítségéve] részletesen ismertetjük. Első lépésben ismert koncentrációjú vizes reagens-oldatot vagy -szuszpenziót állítunk elő. Az oldatba vagy szuszpenzióba előnyösen megfelelő mennyiségű közömbös vázképző vagy sűrítőanyagot is mérünk be, amelyek a fagyasztva szárított pasztillák alakképzését segítik elő. Töltőanyagként pl. cukrokat, így szukrózt, mannózt, laktózt vagy mannitot, fehérjeanyagokat, pl. szérumfehérjét, laktalbumin-hidrolizátumot vagy kazein-thidrolizátumot alkalmazhatunk. A reagens oldatát vagy szuszpenzióját az 1 tartályból a 3 adagoló szivattyú segítségével a 2 rugalmas vezetéken bocsátjuk át. A 2 rugalmas vezeték műanyagból, pl. átlátszó polietilénből készülhet. A 3 adagoló szivattyú előnyösen lüktető működésű szivattyú, amely görgőkkel nyomást gyakorol a rugalmas vezetékre, és így időegységenként előre meghatározott mennyiségű oldatot bocsájt át. Pontos méretű cseppek előállítása céljából percenként kb. 2,0 ml folyadékot átbocsájtó szivattyút alkalmazunk. Az oldat a 3 szivattyúból a 4 lüktetéscsillapítóba kerül, ahonnan közel egyenletes áramban távozik. A távozó oldat az 5 speciális cseppentőbe kerül, amely előre meghatározott, pontosan mért méretű cseppeket bocsájt ki. Egy csepp térfogata pl. 0,025—0,07 ml lahet. A HGG antiszéruim és antigén oldatok esetén a csepptérfogatot pontosan 0,05 ml-re állítjuk be, ezekből a cseppekből a vizsgálat céljaira megfelelő pasztillák képződnek. Az 5 cseppentet a 6 vízzel nem elegyedő folyadékoszlop felszínétől mért megfelelő távolságban helyezzük el. A 6 vízzel nem elegyedő folyadékoszlop a 7 tartályban helyezkedik el. Itt fagynak meg a cseppek. Az 5 cseppentő és a 6 folyadékoszlop felszíne közötti távolságot úgy állítjuk be, hogy a fröccsenést elkerüljük, és ugyanakkor a csepp szabadon essen — így biztosíthatjuk a megfelelő cseppméretet és azt, hogy a vízzel nem elegyedő oldószerbe lépés előtt vagy után gömb alakú csepp alakuljon ki. A csepp esési távolságának állandóan tartása és a fröccsenés elkerülése érdekében megfelelő magasságba 8 szívócsövet helyezünk el. Amikor a hexán-oszlop térfogata a bevitt oldatcseppek 2