159675. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tetrapeptidamidok előállítására
159675 8 szabadítása vagy a módosított karboxil-csoport szabad karboxil-osoportta való átalakítása a reakció közben a védőcsoport jellegétől függő legalkalmasabb módszerrel történhet. A védőcsoportok eltávolítására a következőkben néhány tipikus módszerre térünk ki: katalitikus hidrogénezés vagy ha védőcsoportként benziloxikarbonil-csoportot távolítunk el, akkor ecetsavas közegben hidrogénbromiddal való kezelés; t-butoxíkarbonil vagy t-amiloxikarboni] védőcsoportok esetén szobahőmérsékleten ásványi savval (pl. sósavval) történő hidrolízis. Tozil-védőcsoportot cseppfolyós ammóniában fémnátriumos kezeléssel távolítunk el, míg ha a karboxil-csoportot észter alakjában védjük, akkor szobahőmérsékleten nátriumhidroxiddal hidrolizálunk. A találmány szerinti eljárás egyik célszerű kiviteli módja során glicil-L-triptafil-L-metionil-glicinészter előállítása esetén — amelyben a véghelyzetű a-amino-csoport védett — úgy járunk el, hogy glicinésztert L^triptofil-L^metionilaziddal kondenzáljuk, amely véghelyzetű védett «-amino-csoportot tartalmaz, majd a véghelyzetű a-amino-csoport védőcsoportját az előzőekben ismertetett módon eltávolítjuk és a képződött tripeptid-észtert diciklohexilkarbodiimid jelenlétében védett cc-amino-osoportot tartalmazó glicinnel kondenzáljuk. Egy további előállítási változat véghelyzetben védett GC-amino-csoportot tartalmazó glicil-L-triptofil-L-metionil-glieinészter előállítására azzal jellemezhető, hogy L-t:riptofil-L-metionin-észtert diciklohexilkaíbodiimid jelenlétében védett amino-csoportot tartalmazó glicinnel kondenzáljuk, a képződött tripeptid-észtert hidrazinnal, majd fokozatosan salétromsavval reagáltatjuk, amikoris védett véghelyzetű a-amino-csoportot tartalmazó glicil-L-triptofil-L-metionil-azidhoz jutunk, amelyet glicinészterrel kondenzálunk. A találmány szerinti eljárás egy további kiviteli változata véghelyzetben védett ct-aminocsoportot tartalmazó glicil-L-triptofil-L-metionil-glicilészter előállítására azzal jellemezhető, hogy L-triptofü-L-metionil-glicinésztert védett a-amino-csoportot tartalmazó glicin-p-nitrofenilészterrel kondenzáljuk. A találmány szerinti eljárás előnyös foganatosítási módjait az alábbi példák során szemléltetjük : 1., példa:, (1) 13,5 g N-t-butoxikarbonil-L-triptofil-L-metionin-hídrazidot 200 ml dimetilformamidban feloldunk. Az oldathoz 42 ml 10%-os sósavat csepegtetünk, miközben a hőmérsékletet —10 C°-on tartjuk. 2,14 g nátriumnitrátot kevés vízben feloldunk és az oldathoz csepegtetjük. 3,8 g glicin-metilészter-tódrokloridot 80 ml kloroformban feloldunk. Ezt az oldatot trietilaminnal semlegesítjük és az így kapott oldatot az előző műveletben előállított elegyhez cse-8 pegtetjük —10 C°-on. Elegyítés után a keveréket éjjelen át állni hagyjuk, majd az oldatot • kloroformmal extraháljuk. A kloroformos fázist 1%-os sósavval kimossuk és 5%-os vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldatot adunk hozzá. Ez»0 után a kloroformos fázist megszárítjuk és az oldószert ledesztilláljük. A képződött kristályokat etilacetát-petroléter 3 :1 arányú elegyből átkristályosítjúk, amikoris 11 g ,N-t-butoxikarbonil-L-triptofil-L-metionil-glicin-metilésztert 15 kapunk. Olvadáspont 135—137 C°, Hozam: 72,4%. M20 D = —.16,06° (c=l, metanol). Analízis a C-MH.-MOBINUS képlet alapján. Számított: C: 56,90% H: 6,77% N: 11,06% 20 S: 6,39% Talált: C: 56,57% H: 6,86% N: 10,83% S: 6,36%. (2) 5 g N-t^butoxikarbonil-L-triptofil-L-25 -metionil-glicin-metilésztert 10 ml 8%-os meta-nolos sósav-oldatban feloldunk. Az oldatot 1 óra hosszat állni hagyjuk, majd étert adunk hozzá, amikoris a képződő olaj az oldattól elkülönül. Az így kapott olajat éterrel többször 30 mossuk, majd megszárítjuk, amikoris olaj alakjában, kvantitatív hozammal, L-triptofil-L-metionil-glicin-métilészter-jhidrokloridhoz jutunk. (3) 1,6 g N-t-butoxikarbonil-glicint 20 ml 35 kloroformban feloldunk. Az oldathoz 2,2 g diciklohexil-karbodiimidet adunk 0 C°-on való hűtés mellett és keverés közben. Az így kapott oldhathoz 4,4 g L-triptofil-L-metionil-.glicin-metilészter és 1,6 ml trimetilamin kloro-40 formos oldatát adjuk az előző hőmérsékleten. A reakcióelegyet 6 óra hosszat keverjük, majd a kloroformos oldatot szobahőmérsékleten egy éjjelen át állni hagyjuk. Állás után 1%-os sósavval és 5%-os nátriumhidrogénkarbonátol-45 dattal mossuk, végül .megszárítjuk. Az oldatot ezután az oldószer eltávolításával bepároljuk. A képződött maradékot etilacetátban feloldjuk és az oldhatatlan részeket kiszűrjük. Ezután az oldatból az oldószert eltávolítjuk, így kristá-50 lyos alakban N-t-butoxifcarbonil-glicil-L-triptofil-L^metionil-glicin-metileszterhez jutunk. Hozam: 80%. A kristályokat etilacetátból átkristályosítjuk, így azok olvadáspontja 182—183 C°ra emelhető. [a]wu = —25,24° (c=l, metanol). Analízis a C2fiH>7N5S képlet alapján. 55 Számított: C: 55,40'% H: 6,;62% N: 12,43% S: 5,68% Talált: C: 55,56% H: 6,76% N: 12,27% 60 S:5,6i70/0 . (4) 2,8 g N-t-butoxikarbonil-glicil-L-triptafil-L-metio.nil-glicin-metilésztert 200 ml 30%-os metanolos ammóniaoldatban feloldunk és az 65 oldatot hűtőszekrényben 1 napig állni hagyjuk. 4
