159594. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ösztrán-származékok előállítására
11 159594 12 4. példa: a) 5,0 g 14a-hidroxHhidrokortizon-21-acetát-, 3,0 g N-bróm-aceetamid és 50 ml piridin keverékét 15 percig nitrogénatmoszférában keverjük. Ezután a reakciökeveréket 10 C°-ra hűtjük, és kéndioxidgázt vezetünk az oldatba, amíg az megsavanyított káliumjodid-keményítő papíron negatív reakciót nem ad. A szteroidot 200 ml vízzel kiválasztva 4,4 g 14a,17űf,21-trihidroxi-4,9i(ll)-pregnadién-3,20-dion-21-acetátotj kapunk 187—190 C° olvadásponttal. Infravörös színkép (kloroformban): v ,,-„ = = 3605, 3555, 340S, 1743, 1729, 1665, 161:2 és 1373 cm-1 . b) 1% élesztőkivonatot és 0,5% peptont tartalmazó 10 liter 6,8 pH-ra beállított táptalajt beoltunk Corynebacterium simplex 500 ml rázott tenyészetével. A mikroorganizmust erőteljes keverés és levegőztetés közben 28 C°-on tenyésztjük. 12 óra múlva hozzáadunk 2 g golyósmalomban őrölt 14a,T7;a,21-trifaidroxi-4,9-(ll)-pregnadién-3,20-dion-21-<acetátot. 24 óra alatt az átalakulás befejeződik, ekkor a fermentlevet 3 ízben 10 liter metilizobutilketonnal extraháljuk, a kivonatot bepároljuk, és a maradékot metanolból kikristályosítva 0,5 g 14a,17a,-2l4trihidroxi-l,4,9l(ill)-pregnatrién-i3,;20-dion-i21--acetátot kapunk 196—199 C° olvadásponttal Infravörös színkép (kloroformban): v max — = 3605, 3560, 3460, 1745, 1730, 1665, 1625, 1608 és 1372 cm-1 . c) 1,0 g 14a,17a,21-trihidroxi-l,4,9(ll)-pregnatrién-<3,20-dion-21-aeetátnak, 30 ml 0,5 ml vizet tartalmazó piridinnek és 20 g cinkpornak a keverékét visszaifolyatás és keverés közben 210 percig forraljuk. Lehűlés után a cinket szűréssel eltávolítjuk, és metilizobutilketonnal mossuk. A szűredéket bepároljuk, a maradékot 25 ml metilizo'butilketónban oldjuk, és ezt az oldatot n kénsavval, majd vízzel mossuk. Az oldószert vákuumban elűzzük, és a maradékot metanolból kikristályosítva 0,50 g 3,14a,17ia,2'l-tetraihidroxi-(19-nor-!l ,3,5(10),9i(ill )-pregnatetraén-;20-onH21-«cetátot kapunk 212—213 C° olvadásponttal. NMR színkép (CDC13 és DMSO—d 6 elegyében): ő = 0,71, 2,15, 5,00, 6,i25 (multiplet), 6,56, 6,65 és 7,55 (AB-színkép) ppm. d) 10 g 3,il4a,17a,i21-tetráhidroxi-19-nor-l,3,5-(10),9(11 )-pregnatetraén-i20-on-J21-acetátnak, 100 ml metanolnak és 100 ml metilénkloridnak a keverékéihez 25 ml metanolos n nátriummetanolát-oldatot adunk, és nitrogénatmoszférában szobahőmérsékleten 30 percig keverjük. Ecetsavval való megsavanyítása után a reakciókeveréket bepároljuk, a maradékot víz és metilizobutilketon elegyében oldjuk, a szerves frakciót elválasztjuk, és vízzel mossuk. Az oldószert vákuumban elűzzük, és az olajos maradékot metanol és víz elegyéből kikristályosítva 7,0 g 3,14ct,17a,21-tetrahidroxi-19-nQr-l,3,5,{10),-9(ll)-'pregnatetraén-i20-ont kapunk 201—205 C° olvadásponttal. Infravörös színkép (RBr-ben): " max =3560, 5 3380, 3270, 3055, 3021, 1728, 1721, 1628, 1610, 1570 és 1492 can-1. e) Vákuumdesztillációra alkalmas reakcióedényben 10 g 3,14a,17ia,2il-tetrahidroxi-19-nor-l,3,5{10),9l(ll)-pregnatetraén-20-on, 50 ml di-10 oxán és 50 ml trimetilortoacetát szobahőmérsékletű, 30 torr nyomás alatt tartott keverékéhez 45 perc alatt hozzáadunk öt 70 mg-os adag p-toluolszuMonsavat. A reakciókeveréket piridinnel közömbösítjük, és 800 ml vízbe öntjük. 15 így csapadékként kiválik 10,:6 g 3,14a,17o,21--tetr ahidroxi-19-nor-Jl ,3,5<10),9)(11 )-pr egnatetraén-20-on-47,21-metilortoacetát 171—176 C° olvadásponttal. Infravörös színkép (kloroformban): v max = 20 = 3598, 3535, 1725, 1625, 1603, 1572, 1489 és 1389 cm-1 . f) 5 g 3,14a,17!a,21-tetrahidroxi-19-nor-l,3,5-(10),9(ll)-pregnatetraén-20-on-17,21^metilorto-25 acetát, 100 ml kloroform, 100 ml vizes kálilúg és 20 ml dimetilszulfát keverékét szobahőmérsékleten 45 percig keverjük. A kloroformos réteget elválasztjuk, 3 ízben vízzel mossuk, és szárazra bepároljuk. Metanolból átkristályosít-30 va 4,2 g 3-metoxi-14a,17ia,21-triihidroxi-j 19-nor-l,3,5i(10),9i(ll)-pregnatetraén-20-on-17,2!l-metilortoacetátot kapunk 157—Ißl C° olvadásponttal. NMR színkép (CDCl^ban): (3 = 0,73, 1,58, 35 3,30, 3,78, 4,10 és 4,25 (AB-színkép), 6,32 (széles), 6,63, 6,7 és 7,6 (AB-színkép) ppm. g) 7,0 g 3-metoxi-14a,17a,21-triihidroxi-19--nor-1,3,9(1 ö),9i(ill)-pregnatetraén-20-on-17,21--metilortoacetát, 60 ml dimetilformamid és 35 ml víz keverékét n sósavval 3 pH-ra állítjuk be, és szobahőmérsékleten 150 percig keverjük. Ezután a reakciókeverék pH-ját telített nátriumhidrogénkarbonát-oldattal 7 értékre növeljük, a keverést szobahőmérsékleten 18 óra hosszat folytatjuk, majd a keveréket 75 ml vízzel hígítjuk, és így 6,3 g 3-metoxi^l4a,il7b,21--trihidroxi-19-n or-1,3,5i(ll 0), 9 ,pl )r-pr-ggn at etr a én-20-on-^2il-aoetátot kapunk csapadékként. Olvadáspontja 200-^213 C°. Infravörös színkép (kloroformban): v max = = 3605, 3555, 3465, 1743, 1730, 1619, 1605, 1492 és 1040 cm-1 . h) A fenti d) alatt leírt módon eljárva 3--metoxi-14a;,17«,21-triihidroxi-19-nor-l,3,5(10),-9(11 )-pregnatetra én-20-on-21-,a!oetátot átalakítunk 3-metoxwl4a,l 7!ay21-trihidroxi-l 9-nor-tl ,3,-5(10),9i(ll)-pregnatetraén-20-onná. Olvadáspontja 167—,171 C°. Infravörös színkép (kloroformban): v max = 60 = 3610, 3555, 3485, 1712, 1620, 1606, 1568 és 1493 cm-1 . i) 1,8 g 3-metoxi-14a,17ía,21-triíhidroxi-49-nor-1,3,5(10),9(ill)-pregnatetraén-20-onnak 50 ml 65 tetrahidrafurán és 7 ml víz elegyével készült fi
