159229. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált A-norpregn-3-én-2-onok előállítására

159229 vegyület, mint az animoniumsok, alkáMnitrátok, aminosavak, karbaniid). A fermentációs közegben kellő steril levegő-ellátásról kell gondoskodni, például a közeg nagy felületét levegőnek kitéve vagy süllyesztett levegőztetett tenyésztést végezve. A szteroidot a tenyészethez hozzáadhatjuk inkubáció közben, vagy bevihetjük a közegbe sterilizálása vagy beoltása előtt. Előnyösen a szteroid koncentrációja a tenyészetben fcb. 0,01—0,10 s%. A tenyésztési idő jelentősen változhat, például 6 és 96 óra között. Ezután a szteroidot a szokásos, a példákban részletezett módon kinyerjük a fermentációs közegből. A találmány szerinti eljárás termékei fiziológiailag hatásos, az ember- és állatgyógyászatban használható anyagok. Igen hatásosan gátolják androgének, például tesztoszteron, hatását. Hiperandrogén akne (androgen túltermelés okozta állapot) esetében a bőrön keletkezett pattanások megszüntethetők a találmány szerinti antiandrogenek napi 10—200 mg/kg perorális alkalmazásával. Injekcióként, pl. szuibkután, is alkalmazhatók napi 2—60 mg/kg adagban. Helyi alkalmazásra a találmány szer'nti eljárás termékeiből 1—2,5 s%-ot tartalmazó kenőcs vagy krém alkalmas. A találmány szerinti eljárás termékei igen hasznosnak bizonyultak antiandrogénekiként az állatgyógyászatban. Kandisznók húsát élvezhetetlenné teszi az érett állatnak a húst átható szaga. A kanokat a találmány szerint' termékekkel kezelve a szagképződés visszaszorítható, és a hús élvezhetővé tehető, Hím csirkék kappanozhatók a találmány szerint készült termékek beadásával anélkül, hogy kasztrálni kellene őket. Ebből a célból a termékeket perorálisan napi 10—200 mg/kg testsúly vagy parenterálisan napi 2—60 mg/kg testsúly adagban adjuk az állatoknak. A következő példák szemléltetik a találmány szer'nti eljárást. Minden hőmérsékleti adatot Celsius-fokban adunk meg. 1. példa: 17ö,20a-Dihidroxi-A-norpregn-3-én-2-on 40 Ebből a szuszpenzióból 1—1 ml-rel beoltottunk nyolc 250 ml-es Erlennieyer-lombikban lévő 50—50 ml következő összetételű sterilizált táptalajt (B): glukóz szójafoabliszt szójaíbabolaj kalciumkarbonát 1° desztillált vízzel kiegészítve 20 g 2,2 g 2,5 g 1 literre. Forgó rázógépen (280 fordulat percenként, 5 cm löket) 25°-on végzett több napi inkubálás után 10 tf%-os adagokat átvittünk harmincnégy 15 250 ml-es Erlenmeyer-lomtbikban lévő 50—50 ml frissen sterilizált B közegbe. Ezután hozzá.... adtunk 300 jig/ml szteroidot, minden lombikhoz 0,25 ml 60 mg/ml koncentrációjú steril N,N-dimetilformamidos 17ia-hidroxi-A-norpr ogeszte-20 ron oldatot. Összesen 510 mg-ot fermentáltunk. A fentiekkel azonos körülmények között végzett további fcb. 48 órai inkubálás után a lombikok tartalmát egyesítettük, és a fermentlevet 25 12 n kénsavival beálítotituk 4,5 pH-ra. Ezután a megsavanyított fermentlevet Seitz-féle derítőszűrőn átszűrtük. A lombikokat, a micéliumot és a szűrőt többször 100—100 ml melegvízzel átmostuk. Az egyesített szűredék és mosófolya-30 dékok térfogata 2200 ml volt. Az így kapott szűredéket kloroformmal 3 ízben extraháltuk. A kloroformos kivonatokat vízzel 3 ízben mostuk, nátriumszulfáton meg-35 szárítottuk, és szárazra bepároltuk. A maradékot etilacetát és izopropiléter elegyéből átkristályosítva 227 mg 17ia,2Qa-dihidroxi-A-norpregn-3-én-2-ont kaptunk 195—196,5° olvadásponttal. Az etilacetát és izopropiléter elegyéből való átkirástályosítáisaal kapott analitikád minrtia 195,6— 197,5°-an olvad. iKBr 2,81, 2,94, 9,56 és 6,18 /*; CD'OIQ AEtOH 234 ix («=15,900), tTMS

3 9,22 (e, 18— 45 Me), 8,82 (e, 19—Me), 8,81 (d, 21—Me, J —6 c/s), 6,13 (k, 20a—H) és 4,24 (e,3—H) (e = erős, k = közepes, d = dupla), összetétel: 50 számított: C 75,43, H 9,50% talált: C 75,63, H 9,700/0 Streptomyces roseoűhromogenesnek (ATCC 13400) az A táptalajon kapott 2 kéthetes ferde agaros felületá tenyészetét 5 ml 0,01%r

as vizes nátriumlaurilszulfát-oldatban szuszpendáltuk. Az A táptalaj összetétele: glukóz élesztőkivonat dikálumhidriogénfoszfát agar desztillált vízzel kiegészítve 10 g 2,5 g 1 g 20 g 1 literre. 55 60 65 2. példa: 17!a-Hidroxi-20a-acetoxi-A-norpregn-3-én-2-on 40 mg 17a,20a-dihidroxi-A-norpregn-3-én-2--onnak, 0,2 ml eeetsavanhidriddel és 0,4 ml piridinnel készült oldatát szobahőmérsékleten 4 óra hosszat álni hagyjuk, majd vízzel hígítottuk, és a keletkezett csapadékot szűréssel elkülönítve 41 mg 17a-tódroxi^20ia-nacetioxi-A-inorpregn-3-én-2-ont kaptunk 235—237° olvadás«>