159220. lajstromszámú szabadalom • Eljárás élő mikroorganizmusok konzerválására és diszpergálására
159220 3 4 Az ilyen módon kiszerelt terméket szobahőmérsékleten, célszerűbben azonban alacsonyabb hőmérsékleten tárolhatjuk, pl. +4 és —30 C° között, a szóbanforgó mikroorganizmusok sajátos jelleimzőinek megfelelően. A különböző propellensekhen -— például halogénezett szénhidrogénekben, folyékony nitrogénben stb. — a fenti módon tárolt mikroorganizmusok túlélési ideje hasonló a vákuumban taroltakéhoz. A liofilizált mikrobiológiai vagy vírustartalmií készítmények diiklor^difluormetainban különösképpen megőrzik textúrájukat és szemcseszerkezetüket. A propellens hígítóanyag hatására nana agglowiierálódnak vagy tömörödnek, s a hajtóanyag teljes elpárolgása után újra képesek vizet felvenni, vagy a többi liofilizált termékhez hasonlóan vizes szuszpenziót képezni. Az alkalmas körülmények között történő vízfelvétel után a mikroorganizmusok ismét viszszakapják eredeti élet- és fertőzőképességüket, biokémiai és antigén tulajdonságaikat. Miután a liofilizált mikroorganizmusokból a propeilensben homogén szuszpenziót készítettünk, a keveréket száraz aeroszol formájában szétpermetezhatjük. A diklórdifluoirmetán már a termék kipermetezésének pillanatában, a szelepnél elkezd párologni, és a párolgás következtében finom részecskékből álló aeroszol képződik. A részecskék a propellens elpárolgása kövatkezitében lehűlnek, ami elősegíti vízfelvételüket. A kívánt szemcseeloszlásnak megfelelően ilyen módon valódi aeroszolt, porködöt, vagy finom szemcsék halmazát állíthatjuk elő. A találmány oltalmi körét nem korlátozzuk az alkalmazott edényzet természete és méretei, a készítmény statikus vagy dinamikus felhasználása, vagy a tartály szakaszos működésű, vagy segédhajtó szerkezettel ellátott megoldása szerint. Ugyanígy nem tekinthető korlátozó feltétéinek az aeroszol, köd, felhő, porsugár vagy permet előállítási módja sem, mivel a találmány szerinti eljárás folyamatos vagy más típusú aeroszol-előállító szerkezetre vonatkozik, mely folyamatos vagy fúvókás szeleptűvel vezényelt szeleppel van ellátva, nagyobb kapacitású tartályt tartalmaz, esetleg csappal vagy tolózárral van felszerelve, vagy olyan hasadó burkolattal van ellátva, amely a termék kiszabadulását idézi elő hasadás, szétrepedés vagy ütközés esetén fellépő lökés következtében. Az alábbi példák a találmány lényegét az oltalmi kör korlátozása nélkül világítják meg. 1- példa: Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus törzset (letéti szám: 65—6, Pasteur Intézet) agar-lemezen tenyésztünk, majd az elkülönített kultúrát 10 ml 7-es pH-jú steril fiziológiás nátriumklorid-oldatban szuszpendáljuk úgy, hogy a szuszpenzió milliliterenként 7—8 milliárd csírát tartalmazzon. A szóbanforgó szuszpenzió 2 ml-ét ezután 20 ml térfogatú, speciális aeroszolos palackba visszük, —30 C°-ra történő gyors hűtéssel megfagyasztjuk, majd a szokásos módon liofilizáljuk. A szárítás akkor tekinthető kielégítőnek, ha a liofiiizálás végén az, anyagot 2 órán keresztül szobahőmérsékleten (+20 C°) tartva a nyomás 1 x 10~2 — 2 x 10~ 3 Hgmm. Ez a száraz súlyra vonatkoztatva 1,5—2% maradék nedvességtartalomnak felel meg. Ezután a palackra benyúló cső nélkül nyomógombos szelepet szerelünk. Mielőtt a szelepet felhelyezzük: a palack nyakára, 5—10 csepp diklórdifluormetánt viszünk a palackba, amely forráspontja és sűrűsége következtében kiűzi a levegőt a palackból. Ezután a szelepen keresztül még 10 ml diklórdifluormetánt adagolunk a palackba. Az így kapott baktérium-készítményt ezután 22 + 3 C°-os laboratóriumi levegőn tároljuk, és 15 , naponként ellenőrizzük a készítményben levő baktériumok életképességét. E céiból a készítményt közvetlenül az agarlemezre porlasztjuk. Megállapíthatjuk, hogy a készítmény baktériumai még 270 nap után is megőrzik mikroszkópiai képükét és festőiképességüket. A baktériumok tenyésztési és biokémiai jellemzőiben — így a Cihapman-tközagiben történő fejlődésben, mannit fermentációjában és fenol-' vörös savas elcsapásában — semmiféle változás nam észlelhető. 2. példa: Bacillus suíbtilis Bacillus suhtilis törzset agar-lemezen tenyésztünk, majd az elkülönített kultúrákat 100 ml 7-es pH-jú steril fiziológiás konyhasóoldaltban szuszpendáljuk aly módon, hogy A szuszpenzió 7—8 milliard csírát tartalmazzon milliliterenként. A szóbanforgó szuszpenziót ezután —30 C"- •• on gyorsan megfagyasztjuk, majd szokásos módon liofilizáiljuk. A szárítást akkor tekinthetjük kielégítőnek, ha a liofilizáiás végén az anyagot 2 órán át szobahőmérsékleten (+20 C°) tartva a nyomás 1 x 10~2 — 2 x 10~3 Hgmm-Ez a szárazsúlyra vonatkoztatva 1,5—2% maradék nedvességtartalomnak felel meg. A terméket végül pori tjük és 20 mg-os adagokban például aeroszolos palackokba visszük. A palackra ezután benyúló cső nélküli zálróseelepet szerelünk. Mielőtt a szelepét felhelyeznénk a palack nyakára, a palackba 5—10 csepp diklórdifluormietént viszünk; a szóbanforgó anyag forráspontja és gőzsűrűsége következtében kiűzi a levegőt a palackból. Ezután a szelepen keresztül még 10 ml diklórdifluormetánt adagolunk a palackba. 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 o
