159220. lajstromszámú szabadalom • Eljárás élő mikroorganizmusok konzerválására és diszpergálására
159220 6 Az így kapott baktérium-készítményt ezután 22 ±3 C°-ois laboratóriumi levegőn tároljuk ás 15 naponként ellenőrizzük a készítményben levő baktériumok életképességét. E célból a készítményt közvetlenül agarlemezre porlasztjuk. Megállapíthatjuk, hogy a készítményben levő baktériumok még 270 nap után is megőrzik mikroszkópiai képüket és festőképességüket, A baktérium ok tenyésztési és biokémiai jellemzőiben semmiféle változás nem észlelhető. 3. példa: Klebsiella pneumoniae Az 1. példában ismertetett módszer szerint a Pasteur Intézet 52—144 letéti számú törzsét szin-agy agarlemezen tenyésztve aeroszol készítményt állítunk elő. A liofiiMzálásnál alkalmazott koncentráció 8—10 milliárd csíra/ml. A készítményt laboratóriumi hőmérsékleten tároljuk. A preparátum tulajdonságait 180 nap után ellenőrizzük: a mikroszkopikus kép és a festési jellemzők változatlanok maradtak (Gram-negatív baktérium, bipoláris festés, kifejezett polimorfizmus). A tenyésztési jellemzők változatlanak maradtak. 4. példa: Serratia marcescens 5. példa: Laictöbacillus casei Orla Jensen 1919 törzsbeli MRS folyadékban levő Lactobacillus casei kultúrát centrifugálással töményítünk, liafilizálunk, finoman elporítunk, majd a palackokba 175, 350 vagy 500 mg liofilizalt anyagot helyezünk, végül pedig az 1. példában leírt módon, aeroszolos készítményt állítunk elő. A készítmény tulajdonságait 100 nap után úgy ellenőrizzük, hogy az agar-agaros MRS közeget a baktériumtartalniú aeroszollal beoltjuk. A szabályosan eloszlatott oltásoknál a teljesen normális (aerob vagy anaerob) baktériumtörzsek az agár-magáron minden irányban fejlődnek. 6. példa: 10 Oltőanyag-virus Liofilizalt szérumsavót (szabványos himlő elleni oltóanyagot) készítünk és tárolunk a 4-példában megadottak szerint. A szérumnyirok 15 10 cg-já't steril aeroszolos palackba helyezzük, majd 30 napon keresztül laboratóriumi hőmérsékleten őrizzük. A készítményben levő virus élet- és fertőzőképességét úgy eHenőrízzük, hogy egyre hígabb (1/100, 1/1000 stb.) virus-20 koncentráoiójú készítményekkel nyúl borotvált bőrét sikarifiikáljuk. Ilyen módon 1 x 10~3 -os hígításnál összefolyó, 1 x 10~4 hígításnál különálló gennytüszőket kapunk. Ugyanazt az eredményt kapjuk, ha a készítményt +4 C°-on 25 őrizzük 70 napon keresztül. 7. példa: 30 Saceharomyces cerevisiae 35 40 A feltaláló labaratóriumánaik egy törzséből kiindulva az 1. példában ismertetett módon aeroszol-készítményt állítunk elő.- A szóbanforgó törzset agar-mannitot és Chapoteau-féle peptant tartalmazó közegben tenyésztjük. A liofilizálásihoz használt oldat koncentrációja 10 milliárd csíra/ml. A találmány szerinti készítaiény tulajdonságait 180 nap után ellenőriztük: a mikroszkopikus kép és a festési tulajdonságok változatlanok maradták. A tenyésztési tulajdonságok, 5 nevezjetesen az élénk gránátvörös pigment termelése ugyancsak változatlanok. 50 55 60 7% maradék nedvességet tartalmazó élesztőgomba megtört porából 200 mg-t steril aeroszol-palackba viszünk, majd a 4. példában leírtak szeriint aeroszolos készítményt állítunk elő. A 4. példában ismertetett módon tároljuk a készítményt. A készítményben levő élesztők életképességét 60 napos, szobahőmérsékleten történt tárolás után ellenőrizzük. E célból ! a készítményt speciálisan élesztők tenyésztésére szolgáló, glükóztartlalmú agáron (Pasteur Intézet) 'tároljuk. A szóbanforgó lemez pH-ját az alkalmazás pillanatában 10%^os borkősav adagolásával 3,5-re állítjuk be. A lemezeket 4 napon át 25 C°-on tenyésztve a Siacchariornyces cerevisae tenyészetei — az alkalmazott koncentrációtál és a diszperzió mértékétől függően rétegek vagy telepek farrniájlában — az agarlemez minden irányába szétterjednek. ' Szabadalmi igénypont: Eljárás élő, liofilizalt mikroorganizmusok konzerválására porított és száraz állapotban, amely eljárás lehetővé teszi a mikroorganizmusok közvetlen diszpergäMisät a kezelendő felületen, azzal jellemezve, hogy a mikroorganizmusokat diklór-diifluörmetán propellens jelenlétében +25 C° és —30 C° 'közötti hőmérsékleten, előnyösen szobahőmérsékleten táraljuk, adott esetben hordozóba ágyazva. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója. 7207163. Zrínyi (T) Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21—23. 3
