159207. lajstromszámú szabadalom • Eljárás naftacén-származékok előállítására
5 Az alábbi példákban szemléltetjük az eljárás gyakorlati végrehajtását anélkül, hogy a találmányt ezekre kívánnánk korlátozni. Azoknak az I általános képletű termékeknek az elnevezésében, amelyek képletében R| oxigénatomot képvisel, a 4-metoxi-5,12-dioxo-6,9,ll-trihidroxi-7-(2,3,6-tridezoxi-3-N-„szubsztitu3ns''-am;Í!no-l-L-lixohexozil)-9^aoetil-5,7,8,9,10,-12-hexahidronaftacén kifejezést N-,,szubsztituens"-daunorubicin kifejezéssel helyettesítjük. 1. példa: 0,5 g daunorubicin-hidrokloridot feloldunk 100 ml következő összetételű 10 pH-ra pufferolt oldatban: bórsav 6,184 g káliumklorid 7,456 g n-nátronlúg 88 ml desztillált vízzel kiegészítve 1 literre. Az így kapott daunorubicin^oldat pH-ját n nátronlúg hozzáadásával 10,2-re állítjuk be, majd az oldatot lehűtjük 0 C°-ra. Ezután az oldatot nitrogénatmoszférában igen hevesen keverjük, és hozzáadjuk 0,001 mól L-leucin-N-karibonsavanhidridnek 5 ml acetonnal készült, —10 C0 -ra hűtött oldatát. 0 C°-om és nitrogénatmoszíérá'ban hevesen keverjük további 5 percig. Ezután a pH-t n kénsavval 3,5-re állítjuk be, és 15 percig keverjük, majd 7 pH-ra állítjuk be n nátroinlúggal. Az így kapott oldatot liofilizálva vörös színű port kapunk; ezt feloldjuk 20 ml 1 : 1 térfogatarányú metanol-1,2-di'klóretán elegyben. Az oldatot egy 45 g kovasavgéllel megtöltött 20 mm belső átmérőjű oszlopon átszűrjük, a szűredéket 20 torr nyomáson 50 C°-on szárazra pároljuk, vízben oldjuk, és liofilizáljuk. A kapott port 3 ml 6:4 térfogatarányú meta;nol-l,2-diklóretán elegyben oldjuik, és az oldatot egy 40 g kovasavgélt tartalmazó 17 mm átmérőjű oszlopon kromatogírafáljuk. Egy 7 : 3 térfogatarányú metaniol-l,2-diklóretánnal eluált frakció N-L-leucil-daunorubicint tartalmaz kromatogoráfiailag tiszta állapotban. A kapott oldatnak csökkentett nyomáson szárazra párolása útján nyert N-L-leucildauinorubioint feloldjuk 1 mól egyenérték sósavat tartalmazó vízben. Az így kapott oldatot liofilizálva 0,3 g N-L-leucil-daunorubicin-hidrokloridhoz jutunk. N% 4,15 (elméleti 4,13) Rf = 0,74 (kovasavgél; metanol-l,2-diklóretán, 1 : 1 térfogatarány) 2. példa: 1,39 g daunorubicin-hidrokloridat feloldunk 40 ml dimetilformamidban. Hozzáadunk 0,344 6 ml trietilamint és 1,25 g N-hidroxiszu;kcinimid-N-tritil-D-leucinátot. A reakciákeveréket 24 óra hosszat 20 C°-on keverjük, majd 0,3 torr nyomásion 50°-on szárazra pároljuk. A kapott mara-5 dákot feloldjuk 95 : 5 térfoigatarányú 1,2-diklóretán-metanol elegyben, és az oldatot egy 120 g kovasavgélt tartalmazó 20 mm átmérőjű oszlopon át szűrjük. A szüredéket szárazra pároljuk 50 C°-on 20 torr nyomáson, és így 1,75 g 10 N-tritil-D-leucil-daunorubicint kapunk. Rf = 0,90 (kovasavgél; metanol-l,2-diklóretán, 1 : 1 térfogatarány) 15 Ezt a terméket felvesszük 100 ml 75%-os ecetsavban, és 1 óra hosszat 20 C°-on keverjük. A reakciókeveréket 0 C°-ra hűtjük, és tömény ammónia (15 n) hozzáadásával 7 pH-ra állítjuk be. Az oldhatatlant kiszűrjük, és bőséges desz-20 tillált vízzel mossuk. A szűredéket liofilizálva 1,12 g N-D-leucil-daunombicint kapunk 71% hozammal. N% 4,7 (elméleti (4,37) 25 Rf = 0,70 (kovasavgél: metanol-l,2-di'klóretán, 1 : 1 térfogatarány). Az N-hidroxiszukcinimid-N-tritil-D-leucinát előállítására 3,5 g N-tritil-D-leucint feloldunk í0 60 ml etilacetát és 10 ml dioxán elegy ében, és hozzáadunk 1,08 g N-hidroxiszukcinimidet. A reakcióíkeveréket 0 C0 -ra hűtjük, majd hozzáadunk 2,13 g diciklohexilikarbodiimidet. Ezután 0 C°-on 2 óra hosszat és 20 Cc -on 16 óra hosszat 35 keverjük, majd leszűrjük, a szüredéket 22 torr nyomáson 50 C°-on szárazra bepároljuk, és a má>adékot izopropilalkoholból átkristályosítjuk, így 1,25 g N-hidroxiiszuikcinimid-Nitritil-D-leucinátot kapunk. Szilikagélen kromaitogra-40 falva, metanollal kifejlesztve az Rf értéke 0,79. • 3. példa: Az 1. példában leírt módon eljárva, de 2,2 g daunorubicin-hidrolkloridból, 500 ml pufferolt oldatból, 0,691 g D-leucin-N^karboxianhidridből és 25 ml acetonból kiindulva 200 mg N-D^ -leucil-daunorubicin-'hidro'kloridot kapunk, Rf = 0,70 (kovasavgél; metanol-l,2-diklóretán, 1:1 térfogatarány). 4. példa: 55 100 rag daunorubicin-hidrokloridot feloldunk 3 ml dimetilformiamidban. Hozzáadunk 0,025 ml trietilamint és 95 mg N-hidroxiszukciinimid-tritil-D-fenilalaninátoit (készült tritil-'L-fenilalaninnak diciklohexilkarbodiimid jelenlétében dioxánban N^hidroxiszukcinimiddel való kondenzációjával). A kezelést a 2. példában közölt módon foly-65 tátva sorban kapjuk a következőket: 3
