159039. lajstromszámú szabadalom • Eljárás patogén baktériumok növekedését gátló antibiotikumok előállítására
19 159039 20 talmaz. Az így kapott tisztított elegyet az egyes komponensek: elkülönítése nélkül is felhasználhatjuk gyógyászati készítmények előállításához. A csekély mennyiségű SF—837—A2 , SF— —837— A3 és SF—837—A/, jelzésű anyagot tartalmazó, túlnyomórészt SF—837 jelzésű anyagból álló tisztított elegyet kívánt esetben közvetlenül savaddiciós sók elegyévé alakíthatjuk. A szabad bázisok elegyét szerves oldószerben, pl. etiléterben oldjuk, az oldathoz- szerves vagy szervetlen sav, pl. sósav, kénsav, borkősav, citromsav megfelelő szerves oldószerrel, pl. etiléterrel készített oldatát adjuk, a kivált savaddiciós só-elegyet kiszűrjük, szárítjuk, majd kívánt esetben gyógyászati készítményekké alakítjuk. A szabad bázisok tisztított elegyét kívánt esetben a szokásos acetilező eljárásokkal a" felsorolt aoetil-származékok elegyévé alakíthatjuk. Az egyik eljárásváltozat szerint a báziselegyet piridinben oldjuk, az oldatot szobahőmérsékleten, vagy enyhén megnövelt hőmérsékleten, megfelelő ideig ecetsavanhidriddel reagáltatjuk, és a termékéket jeges vízzel kicsapjuk. A reakció során az SF—83T és SF—837— —A2 jelzésű anyagok diacetil-származékokat, és az SF—837—A3 és SF—837—A4 jelű anyagok monoacetil-származékokat képeznek. Az acetilezett vegyületek elegyét kiszűrjük, a szennyezéseket vízzel kimossuk, és a kapott elegyet kívánt esetben gyógyászati készítményekké alakítjuk. Az SF—837, SF—837—A2 , SF—837—A3 és SF—837—A4 jelű anyagokat megfelelő adszorbensen, pl. aktivált alumíniumoxidon vagy szilikagélen, megfelelő eluálószerrel végzett kromatográfiával, és/vagy ellenáramú megosztásos módszerrel különíthetjük el egymástól. A fenti elválasztási és tisztítási műveletek után kapott, tisztított elegyben az SF—837 jelzésű anyag általában nagy mennyiségben van jelen, míg az SF--837—A2 , SF—837—A :! és SF—837—A* jelzésű termékek az elegy kisebb hányadát képezik. Ennek megfelelően az elválasztást úgy végezhetjük, hogy a szabad bázisok tisztított elegyét első lépésben ellenáramú megosztásnak vetjük alá, amikor egy SF—837 jelzésű anyagban dús, és egy SF—337—A2 , SF—837—A3 és SF—-837—A/, jelzésű anyagokban dús frakciói különíthetünk el. A kapott két frakciót ezután külön-ikülön ikromatografárjuk szilikagélen vagy alumíniumoxidon, és az egyes komponenseket tökéletesen elválaszthatjuk egymástól. Az SF—837, SF—837—A2 , SF—837—A3 és SF—-837—A4 jelzésű anyagokat általában úgy választjuk el, hogy a hatóanyagok elegyét tartalmazó nyers por szerves oldószeres oldatát aktivált alumíniumoxid- vagy szilikagél-oszlopon kromatografáljuk, 1 :1 arányú etilacetát : : benzol vagy 4 :1 arányú benzol : aceton elegygyel eluáljuk, és szükség esetén a műveletet többször megismételjük. Alumíniumoxid-oszlopról, 1 : 1 arányú etilacetát-benzol eleggyel általában a következő sorrendben oldhatjuk le a hatóanyagokat: SF—837—A4 jelzésű anyag. SF—837—A3 jelzésű anyag, SF—837—A2 jel-5 zésű anyag és végül SF—837 jelzésű anyag. Az eluátumifrakciók kis mintáját alumíniumoxidom végzett vékonyrétegkromatográfiával is megvizsgáljuk. Azokat a frakciókat, amelyek vé-konyrétegkromatográfiásan csak egyetlen fol-10 tot adnak, és így egységes anyagot tartalmaznak, egyesítjük, majd csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A műveletet az SF—837 jelű anyagot, SF—837—A2 jelű anyagot, SF— —837—A3 jelű anyagot ül. SF—837—A4 jelű 15 anyagot tartalmazó frakciókkal többször megismételjük. Az eljárás során fehér, por alakú, tiszta SF—837, SF—837—A2 , SF—837—A 3 ill. SF—837—A4 jelű termékeket kapunk, 20 Tekintettel arra, hogy az SF—837, SF—837— —A2 , SF—837—A3 és SF—837—A 4 jelzésű anyagok makrolid antibiotikumok, a termékek elválasztását és tisztításét egyéb, a makrolid antibiotikumok elválasztásária és tisztítására 25 szolgáló módszerekkel is végrehajthatjuk. Az SF—837, SF—837—A2 , SF—837—A3 és SF— —837—A4 jelzésű antibiotikumokat azonban előnyösen a következő módon állítjuk elő, választjuk el és tisztítjuk: 30 Az SF—837-törzset ismert, asszimilálható nitrogén- és szénforrásokat tartalmazó táptalajon, folyékony közegben, levegőztetéssel 20—30 C°on tenyésztjük, amikor a tenyészet megfelelő 35 antibakteriális aktivitást mutat, szűrjük, a szűrletet pH = 7—9 értéken vízzel nem elegyedő szerves oldószerrel, pl. etilacetáttal, butilacetáttal, kloroformmal, etiléterrel, metilizobutilíketorinal vagy butanollal extraháljuk, a 40 kapott, SF—837, SF—837—A2 , SF—837—A :i és SF—837—A4 jelzésű anyagot tartalmazó szerves oldatot pH — I2Í——13! értékű híg vizes savval, pl. vizes sósavoldattal, vizes kénsavoldattal vagy hasonló anyagokkal extraháljuk, a kapott vi-45 zes oldatot előnyösen pH = 7—Q értékre lúgosítjuk, majd ismét valamely fent említett vízzel nem elegyedő szerves oldószerrel extraháljuk, a savas vizes és szerves oldószeres extrahálást legalább egyszer megismételjük, az 50 extrakció során kapott, részben tisztított hatóanyagokat tartalmazó szerves oldatot vákuumban szárazra pároljuk, a kapott nyers, por alakú hatóanyag-elegyet etilacetátban vagy butilaoetátiban oldjuk, az oldatot aktív szén-55 oszlopon bocsájtjuk át, etilacetáttal vagy butilaoetáttal eluáljuk, az aluátum aktív frakcióit összegyűjtjük, kis térfogatra bepároljuk,x a koncentrátumot híg vizes sósavoldattal extraháljuk, a vizes^savas , extraktum ot bázissal meg-50 lúgosítjuk, a kivált, lényegében tiszta hatóanyag-elegyből álló csapadékot elválasztjuk, benzolban oldjuk, a ibemzolos oldatot szilikagéloszlopon kromatografáljuk, benzol-raceton elegygyel eluáljuk, az eluátumot frakciónként felfog-65 juk, a frakciókat alumíniumoxid-rétegen vé-10
