158741. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ciklopeptidek előállítására
17 158741 18 Összetétel: elméleti: C 61,90%, H 8,72% talált: C 60,90%, H 8,70% Rf = 0,55 (kovasavgél; 1,2-diklór-etán — metanol 6:5 : 3:5 térfogatarány) szorboil-A«ciklopeptid Összetétel: elméleti: N 11,97%; talált: N 1,1,99% Rf = 0,75 (kovasavgél; 1,2-diklór-etán — metanol 65 : 35 térfogatarány) (11 -pirrolidmo-undekianoil)-A-ciiklopeptid-'hidiroklorid Összetétel: elméleti: N 11,35%, Cl 2,87% talált: :N 10,90%, Cl 2,65%, Rf = 0,60 (kovasavgél; l,2^dilklór-etán — metanol 65 : 35 térfogiatarány) (2-pirrolidino-h:exanoil)-A-cifclopeptid^hidrolklorid összetétel: elméleti: N 12,05% talált: ,N 11,81%, Rf = 0,70 (kovasavgél; 1,2-diMór-etán — metanol 65 : 35 térfogatarány) gatarányú etilacetáit-metanol eleggyel eluálva. A 90 : 10 térfogatarányú etiilacetát-im etanol elegygyel eluált fraikciófcaít egyesítjük, és az oldószert 25 torr nyom;áson elűzzük. A maradéikat felvesszük 50 ml víziben, és az oldatot liofilizáljuk. így 0,52 g (L-metionil)-A-rildopeptid-hidro-Moridot kapunk. Összetétel: elméleti: S 2,84% talált: S 2,92% Rf = 0,47 (Ikovasavgél; 1,2-diklór-etán — metanol 8 : 2, térfogatarány) Ugyanilyen módon eljárva a megfelelő kiindulási anyagokból a következő terméket állítjuk elő: (6-pirrolidiino-hexanoil)-A-eiklopeptid-Mdroklorid Összetétel: ejméieti: N 1:2,05% talált: N 12,05% Rf = 0,52 (kovasavgél; 1,2-diklór-etán — metanol 65 : 35 térfogatarány) -8. példa: 2 g H-A-oiklopeptidet feloldunk 40 ml metilénkloridiban, majd hozáadunk 0,28 ml distilamint. Az oldatot lehűtjük —5 és —10 C° közötti hőmérsékletre, majd 10 perc alatt egyidejűleg hozzáadjuk a következő két oldatot: a) 15 ml metilénlkloridban oldo-tt 0,56 ml tristilamin és b) 15 ml metilénkloridlban oldott 0,684 g lil-dietilamino-und'ecil-klórformiiát-ihidröklorid. A keveréíkeit 0 C°-on 2 óra hosszat, majd 10 C°-on 18 óra hosszat keverjük. Ezután a reafcciólkeverékeit 5%-os nátriumhidrogénkartaonát-oldattal, majd telített nátriumklorid-oldaitltal mossuk, nátriumszulfáíton megszárítjuk, szűrjük, és 25 torr nyomáson szárazra pároljuk. A kapoitst mariadákot 1,2 cm átmérőjű oszlopban lévő 25 g kovasavgélen kromatograifáljuk, sorban 125 ml 98 : 2 térfogatarányú, 225 ml 95 : 5 térfogatarányú és 375 ml 7 : 3 térfogatarányú etilacetát-metanol eluálva. A 98 : 2 és 95 : 5 térfogatarányú etilaicetát-'metanol elegyekfcel eluált frakciókat egyesítjük, és 25 torr nyomáson szárazra pároljuk. A rmaradiékot felvesszük 40 ml vízben, majd eseppenként n sósavat adunk hozzá 3 pH4g. A kevés oldhataltton részt kiszűrjük, és a szűredéket liofilizáljuk. így 1,24 g (ll-dietila:miino-undeeiioxikaríbonil)-A-ciklopeptid-ihidrokloridot kapunk 50% hozammal. összetétel: elméleti: N ll,0i7% talált: N 10,87% 7. példa: 2,875 g H-A-ciklopeptidet feloldunk 10,5 ml dimetilformaimicUban, majd hozzáadunk 1,28 g •2,4,5-itrilMórifenil-N-terc.buitíloxifcaríbonil-L- 45 Hmetionáitot. Az oldatot 0 C°-ria hűtjük, majd lassan hozzáadunk 0,42 ml trietilaminit, és 18 óra hosszat 0 C°-on keverjük. Ezután ezt az oldatot 45 g jég ós 0,02 ml ecetsavat tartalmazó 15 ml ciklohexánkevetrékre önitjük. így színtelen 5() olajat kapunk, dekarctáluník, és az olajat feloldjuk 6 ml ertilacetátban. 100 ml petrolétert hozzáadva fehér szilárd anyagot kapunk, ezt szűrőre visszük, és megszárítjuk. 2,85 g (iM-itercbutoxikarfoonil-L-meti'Oin.il)-A-ciklopeptidet kapunk. Ebből a termeteiből 1,2 g-ot felveszünk 2,73 ml 1,8 n dioxán-hidrokloridibain, és 5 óra hosszat 20 C°-on tartjuk. Ezután 25 torr nyomáson szárazra pároljuk, a kapott terméket felvesszük etilacatátiban, majd egy 1,2 cm átmérőjű oszlopban lévő 15 g kovasavgiélen kromatografáljuik, soriban 120 ml etiiaceitátal, 30 ml 95 : 5 térfogatarányú, 30 ml 00 : 10 térfogatarányú, 30 ml 75 : 25 térfogatarányú és 30 ml 5:5 térfo- ss 10 1 * 20 25 S0 35 40 45 50 55 60 •
