158741. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ciklopeptidek előállítására
158741 24 jégecetet, és a képződött csapadékot kiszűrjük. A szűredéket 25 torr nyomásion bepároljuk, és a maradókot 500 ml etülacetátiban szuszpendáljjufc. A szuszpenziót 30 percig jégfürdőben tartjuk, majd az oldhatatlan részt kiszűrjük, és a szűredéket 25 torr nyomáson szárazra bepároljulk. Az így kapott nyersterméket fcromiatografálással tisztítjuk. E óéiból a nyersterméknek 500 ml etilacetáttal készült oldatát felöntjük a 2 kg sziliciumidioxidot tartakniazó 10 cm átmérőjű oszlopra. Az eluálást növekvő metanol tartalmú etilacetát-anebandl eleggyel végezzük. 300 ml-es frakciókat gyűjtünk. A 98 :2 térifogatarányú etikoetát-<rnletianol eleggyel kapott frakcióikat egyesítjük, és 25 torr nyomáson szárazra pároljuk. A maradéklhoz 900 ml vizet adunk, siósav hozzáadásával beállítjuk 1 pH-ra, majd 2 óra hosszat keverjük a teljes feloldódásig. A fölös sósav eltávolítására 0,3 torr nyomáson szárazra bepároljuk, majd a maradéklhoz 500 ml vizet adunk, és 0,3 torr nyomásion bepároljufc. A maradékot 900 ml vízben oldjuk, és liofilizáljuk. így 74 g NJauril-N-imetín-D^valil-A-ciklopeptidet kapunk. Összetétel: elméleti: C 63,06%, H 9,25%, Cl 2,77% talált: C 62,7 %, H 9,25%, Cl 2,6 % Rf = 0,51 (kovasavgél; l,2ndi)kloretan — metanol 8 : 2 térfogatarány) 14. példa: A 13. példában leírt módon járunk el, de H0 ml mstilénkloridlban oldott" 1,7S g N-undecil-N-imetil-D-valkit, 1,52 g trietálatniint, 5,4 g H-A-ciklopeptidet és 1,12 g diciklohexilkarbodiimidet hasznáüiunk. 120 g kovasavgél; tartalmazó oszlopon való kromatografálás után 1,83 g N-und'ecil-N-mietil-D-ivaMl-A-ciklopeptidet kapunlk. összetétel: elméleti: C 64,68%, H 9,54%, N 11,43% talált: C 64,0 %, H 9,09%, N 11,1 % 10 1 r ' 1 M 20 25 30 35 40 45 R£ = 0,63 (kovasavgél; 1,2-difclóretán — metanol 8 : 2 térfogaitarány) 15. példa: A 13. példában leírt módon járunk el, de 80 ml etiköetátban oldott 1,4 g N-tridiecil-NHmetil-D-valinit, l,;li2 ml trieitilamint, 4 g H-A-ciklopeptidet és 0,9 g dicáklohiexOkarlbodiimidet használunk. A nyersterméket 50 g koyasavgélt tartalmazó oszlopon kromatografálva tisztítjuk, miajd hidrofcloriiddá átalakítva 0,48 g Nntrlidecil-N-metil-D^valil-A-ciklopieptid4hidrofcloridot kapunik. 16. példa: A. 13. példában leírt módon járunk el, de 27 ml m0ti3iénkloridban oldott 4,8 g NnmMsztil-N-matdl-D^valint, 2,4 ml trietilamint, 10,3 g H-A-eiklopepitidét 'és 2,09 g diciklohexillfcarbodiiimidet használunk. A nyersterméket 100 g kovasavgél tartalmazó oszlopon kroimaitografálva tisztítjuk, majd hidnokloriddá átalakítva 2 g NHn^risztál-íN^metil-DHvalil-A-ciklopeptid•nhidrokloridot kapunk. Összetétel: elméleti: N 10,73%, 101 2,71% talált: N 10,5 %, Ol 2,56% Rf = 0,68 (koivaslavgél; 1,2-diklóretán — metanol 8 : 2 térfogat arány). Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás az R'—A—ciklopeptid I általános képletű új eiklopeptideik előállítására bázis, valaimdnit annak savatokai alkotott addiciós sói és kvaterner ammóniuimsói alakjában — az I általános képletben ,,A-ciklopeptid" egy CH, -N-CO—MeThr Leu-MePro-Leu-MeVal Gly-MeLeu-Pro képletű nonapeptid-szármiazékot jelent (ebben a képletben MePro L-transz^4-metilprolil-, MeThr L-N-imeítiltreonil-, MeVal L-N-metilvaMl-, MeLeu D-N-metilleueil-, Pro L-iproliil-, Gly glicil- és Leu L-leucil-csoportoit jelent), és 60 R' az .A-ciklopeptid oldallánéa L-transz-4~metilprolil-csoportjának nitrogénatomjához egy sft karlbonil-, szulfenil- vagy szulfonil csoporton át kapcsolódó alkanoil-, alkjenoil-, allkadiénoil-, alkoxikarbonil-, aralkianoil-, aroil-, arilszulfenil-, arilszulfonil-, ciMoalkilkarbonil . . csoportot, heterociklusos karbonsav. gyököt vagy heterociklusos csoporttal szuibsztiítuálit alikanoil^csoportot fvagy lineáris peptidcsoportmaradékot jelent, ; 12
