158546. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az aminocsoportok átmeneti megvédésére peptidszintéziseknél
158546 17 togramban, szakíbutanol-jégecat-ívíz (67 : 10 : 23) elegyben. Acetátjából. káliumkarbonát-oMattal felszabadítva a termék vizes metanolból kristályosodik ki. Qp.: 206—207° (bomlás közben). 1.2. példa: N-2-(p^difenil)-izopriQpiloxikafbonil-L-liéucil-L-valil-S-tritil-L-cisateiniPglicil-L-glutaminsav-di-tercier-butilészter előállítása 18 diciMohexilkarbamid leszűrése után. ecetészterrel hígítjuk, 0°-on 0,5 mól citromlsavval, 1 n nátriumihidrogénkiarblonáttal és vízzel mossuk, szárítjuk és bepároljuk. Szilikagélien kroma-5 tografálva eoeftészteres eluciöval 775 mg N-2--(p-difenilJ-izopropiloxiJkarbonil-L-Jleucil-L-valil-S-tritil-L-ci)szteinil-glicil-L-iglutanainSaiV^di-tei rcier-j butilésztert kapunk egységes termékként. Rf == 0,55 kloroform-metanol (9 : 1) efegy-10 ben; Rf = 0,63 toluol-acieton (1:1) elegyben. A kiindulási anyagiként szükséges S-tritil-L-cisztemil-glicil-L-glutaniinsavHdi-tercier-butilészitert a következőképpen állítjuk elő: Karbobenzoxi^glicinből és L-glutaminsav-di-tiercier-butilészterből a vegyes anhMrid-mádszerrel kanbobenz'OXÍ-glicil-L-'glutaminsav-di-,ter,cier-butilésztert kapunk, op.: 74—76°. Az ebből hidrálással nyert glicil-L-glutaminsav-di^tercier^butilészitert N,S-di-tritil-L^eiszteinnel és diciklohexilkarbodiimiddel átalakítjuk és N,S-<ii-tritii-L-ciszteinil-iglicil-L-glutaminsiav-idi-tercier-butilészter keletkezik, op.: 98—4)10°. Az N-tritilcsopont 80%-űts ecetsavval történő lehasításával S-'tritil-L-ciszteinil-'glicil-L-glutamínsav^di-tercier-butilészter keletkezik. 1,3. példa: 15 ljl-difenil-etiloxikarbonil-csoporit bevezetése 8,2 g difenil-metilHkarbindlt, 5,35 g izocianát-ecetsavetilésztert és 4 ml piridint 48 órán át 5Q°-on melegítünk. Az oldatot 100 ml éterrel 20 hígítjuk, 0°-on 0,1 mól citromfeavoldattal és vízzel kirázzuk, nátriumszulfát felett szárítjuk és vákuumban teljesen bepároljuík. 10,6 g sűrű olajat kapunk, mely l,l-difenil-4etoxi!kar!bohil-gncin-etilészfterfoől áll; Rf = 0,7 véfconyréteg-25 kromatogramon, klorof arm-rnetanol (95 : 5) elegyben. N-2-(p-dif,eniI)-izopropiloxi!karbanil-L-valint (melyet 1,91 ,g (4,2 mmol) cikWhexilammóniums ójából citromsawal felszabadítva nyertünk) .20 ml ecetészterben oldunk, 0,59 ml (4,2 mmól) tríetilamint és —10°-ra váló hűtés után 0,56 ml (4,2 mmól) 'klórszénsav-izöbutilésztert adunk hozzá. 10 perces keverés után —10°-on 2,78 g (4,i2 mmól) fenti tripeptiddiészter 25 ml ecetészteres oldatát csepegtetjük hozzá és 15 percig —ílO°~on, majd 1 órán át szobaihőmérsékleten keverjük. Ecetészteres hígítás után 0°-«n 0,5 mól citromsavval, 1 n nátóumlhidrogénkaribonáttal és vízzel kirázzuk, szárítjuk és szárazra pároljuk. A maradékot acéton-éter elegyből kikristályosítjuk. 2,91 g N-2-(p-,dife:nil)-izoipropiloxikarbonil-L-valil-S-tritil-L^ciszteinil-glici'l-L-glutammsav-di-tercierHbutilésztert kapunk. Op.: 184—186°. Rf = 0,6 kloroform-nretanol (95 : 5) elegyben. . • -A tetrapeptidészter 1 g-ját (1 mmól) 10 .nil jógecet-82,8%-«s hangyasav-jvíz (7:1 : 2 tf. rész) eleggyel 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. 10 ml vízzel és 40 ml klorof onmmal történő egyesítés után 0°-on tömény ammóniával lúgosítjulk, a kloroformos fázist elválasztjuk, mossuk, szárítjuk és vákuumban szárazra pároljuk. A marádékot petroléterrel eldörzsöljűk, amiboris 0,76 g L^valil-fí-tritil-L-ciszteinil-glicil-L-glutaminsav-di-tercier-ibuítilésztiert kapunk, vékonyra teg-kroniatográfiásian egységes olaj formájában. Rf = 0,25 kloroform-metanol (95 : 5) elegyben. 370 mg (1 mmól) N~2-i(p-difenil)-izopropiloxifcarbonil-L-leucinlhoz és a fenti tetra. peptidészter 766 mg-jának 7 ml tetralhidrofurános oldatához 0°-on 238 mg diciklolhlexilkaiibodiimidet adunk és 4 órán át 0°-on keverjük. A 30 45 14. példa: Az l,l~difenilr-etiloxilk,arbonil-csoport lehasítása 207,8 mg 1,1 tdifenil-etoxikairbonil-g'liciin-etilésztert 25°-on 3,15 ml 80%-os ecetsavban oldunk. Különböző időpontokban 0,20 ml próbá$5 kat veszünk, azokat 4 ml dimetilfonmamidhoz adjuk és a felszabadított glicinetllésztert 0,1 n perklórsawal megtitráljuk. A védőcsoport lehasadásának felezési ideje kb. 30 perc. 5 óra múlva a leihasadás kvantitatív. 40 15. példa: 1,1-jdifenil-tpropiloxikaiibonil-csQport bevitele 3,2 g difenil-etil-karbinolt, 1>9 g. izocianáteoetsavetilésztent és 1,6 ml. piridint 72 órán át 50°-on melegítünk. Az oldatot 50 ml éterrel hígítjuk, 0°-on többször 0,1 mól citromsavóldattal 50 és vízzel mossuk, nátriumszulfát felett szárítjuk és vákuumban teljesen bqpároljufc. A 2,3 g difenilHetillkarbinol petroléterrel történő eltávolítása után 1,1-difenil-propiloxilkarbcmil-gücin-etilésztert kapunk olajos formáiban; Rf = 0,2 55 véTkonyréteg-íkromatagiriaman kloroformban. 16. példa: . Az 1,1 -dif enil^pr opiloxikarbonil^csoport 60 lebasítása 409 mg l^-difectil-propiloxikarbonil-glicin-etilésztert 22°-on 80%-os ecetsavban oldunk. 65 Különböző időpontokban 0,5 ml próbákat ve-9
